Koç Spermasına Katılan Bazı Antioksidanların Dondurma ve Çözdürme Sonrası Spermatolojik Parametreler, Oksidatif Stres ve DNA Hasarı Üzerine Etkileri

Bu çalışmada, spermaya katılan antioksidanların dondurma çözdürme sonrası spermatolojik, bigisayar destekli sperma analiz cihazı (CASA), oksidatif stres parametreleri ve DNA hasarları üzerine etkilerinin belirlenmesi amaçlandı. Afyonkarahisar koşullarında yetiştirilen 2-3 yaşlı Pırlak ırkına ait toplam 10 koçtan alınan spermalar birleştirilip 5 eşit hacme bölünerek kontrol başta olmak üzere taurin, trehaloz, trolox ve lipoik asit içeren Tris bazlı sulandırıcılar ile sulandırıldı. Sulandırılan örnekler 0.25 mL’lik payetlerde 5 0C’de 3 saat ekilibrasyona tabi tutulduktan sonra sıvı azot buharında dondurularak sıvı azot içerisinde (-196 ⁰ C) saklandı. Çözdürülen spermalarda subjektif motilite, CASA motilitesi, ortalama rota hızı μm/s (VAP) ve düz çizgi hızı μm/s (VSL) açısından taurin grubunda en yüksek değerler tespit edildi. Anormal spermatozoon baş, orta kısım ve akrozom oranı açısından kontrol grubuna göre tüm gruplarda en düşük değerler elde edildi. Spermatozoon hipo-ozmotik eosin boyama testi (HE-test) parametrelerinden H+/E- tip spermatozoonlarda kontrol grubuna göre taurin, trehaloz ve lipoik asit gruplarındaki artışlar önemli (P

Effects of Some Antioxidant Additives on Spermatological Parameters, Oxidative Stress and DNA Damage After Freezing-Thawing Process in Ram Semen

In this study, determing the effects of antioxidants on the computer assisted sperm analysis(CASA), oxidative stress parameters and the DNA damage of the thawed sperm was aimed.Semen collected from 10 Pirlak rams was divided into five equal aliquots and diluted with the trisbase extender containing taurine, trehalose, trolox, lipoic acid and no antioxidant (control), cooledto 5 ⁰ C and frozen in 0,25 mL French straws in liquid nitrogen vapour and stored in liquid nitrogen.In the thawed semen, the highest values were detected in taurine group with regard to subjectivemotility and CASA motility, average path velocity μm/s (VAP) and straight linear velocity μm/s(VSL). The lowest values in spermatozoa with abnormal head, middle piece and acrosome werefound in all antioxidant groups when compared with the control group. The increases inhypoosmotic eosin staining test (H+/E- type) spermatozoa were significant (P

___

  • Bailey JL, Bilodeau JF. Cormeir semen cryopereservation in domestic animals: A damaging and capacitating phenomenon. J. of And 2000; 21: 1-7.
  • Oehninger S, Duru NK, Srisombut C, Morshedi M. Assessment of sperm cryodamage and strategies to ımprove outcome. Mol. Cell. Endocrinol 2000; 169: 3-10.
  • Agarwal A, Prabakaran S, Allamaneni S. What an andrologist/urologist should know about free radicals and why. Urology 2006; 67: 2-8.
  • Perıs SI, Bilodeau JF, Dufour M, Bailey JL. Impact of cryopreservation and reactive oxygen species on DNA integrity, lipit peroxidation, and functional parameters in ram sperm. Mol Reprod Dev 2007; 74: 878-892.
  • Aitken J, Clarkson JS, Fishel S. Generation of reactive oxygen species, lipit peroxidation, and human sperm function. Biol. Reprod 1989; 41: 183-197.
  • Chen Y, Foote RH, Brockett CC. Effect of sucrose, trehalose, hypotaurine, taurine and blood serum on survival of frozen bull sperm. Crybiol 1993; 30: 423-431.
  • Hua Li J, Qin Ling Y, Jing Fan J, Ping Zhang X, Cui S. Expression of cysteine sulfinate decarboxylase (CSD) in male reproductive organs of mice. Histochem Cell Biol 2006; 125: 607-613.
  • Aisen EG, Quıntana M, Medina V, Morello H, Venturino A. Ultramicroscopic and biochemical changes in ram spermatozoa cryopreserved with trehalose-based hypertonic extenders. Cryobiol 2005; 50: 239-249.
  • Akiyama M. In vivo scavenging effects of ethylcysteine on reactive oxygen species in human semen. Nippon Hinyokika Gakkai Zasshi 1999; 90: 421-428.
  • Rice D, Kennedy S. Vitamin E: Function and effects of deficiency. Br Vet J 1988; 144: 482-492.
  • Roy S, Packer L. Redox regulation of cell functions by alpha-lipoate: Biochemical and molecular aspects. Biofactors 1998; 8: 17-21.
  • Schafer S, Holzmann A. The use of transmigration and Spermac TM stain to evaluate epididymal cat spermatozoa. Anim Reprod Sci 2000; 59: 201-211.
  • Gündoğan M, Yeni D, Avdatek F, Fidan AF. Influence of sperm concentration on the motility, morphology, membrane and DNA integrity along with oxidative stress parameters of ram sperm during liquid storage. Anim Reprod Sci 2010; 122: 200-207.
  • Draper HH, Hadley M. Malondialdehyde determination as index of lipid peroxidation. Methods Enzymol 1990; 186: 421-430.
  • Sedlak J, Lindsay RHC. Estimation of total, protein bound and nonprotein sulfhydryl groups in tissue with Ellmann’s reagent. Anal Biochem 1968: 25; 192-205.
  • Geva E, Lessing JB, Lerner-Geva L, Amit A. Free radicals, antioxidants and human spermatozoa. Clinical Implications 1998; 13: 1422-1424.
  • Lopes S, Jurısicova A, Sun J, Casper R. Reactive oxygen species: potential cause for DNA fragmentation in human spermatozoa. Hum Reprod 1998; 13: 896-900.
  • Hafez ESE. Semen evaluation. In: Hafez, ESE. (Editor). Reproduction in Farm Animals. 5th Edition, Philadelphia: Lea and Fabiger, 2000: 365-376.
  • Aitken J, Ryan AL, Baker MA, Mclaughlin EA. Redox activity associated with the maturation and capacitation of mammalian spermatozoa. Free Radic Biol Med 2004; 36: 994-1010.
  • Başpınar N, Çoyan K, Bucak MN, ve ark. Koç spermasının ekilibrasyon ve dondurma-çözdürme sonrası spermatolojik ve biyokimyasal parametreleri üzerine lipoik asitin etkisi. Eurasian J Vet Sci 2011; 27: 87-92.
  • Bucak MN, Atessahin A, Varisli O, et al. The influence of trehalose, taurine, cysteamine and hyaluronan on ram semen microscopic and oxidative stres parameters after freze-thawing process. Theriogenology 2007; 67: 1060- 1067.
  • Anghel A, Zamfirescu S, Coprean D, Sogorescu E. The effects of cystein, bovine serum albumin and vitamin e on the calitative parameters of frozen-thawed ram semen. Annals of RSCB 2010; 16: 26-32.
  • Avdatek F, Gündoğan M, Yeni D. Functional tests in semen quality determination. J. Anim Vet Adv 2010; 9: 862-871.
  • Marco-Jimenez F, Puchades S, Gadea J, Vicente JS, Viudes-De-Castro MP. Effect of semen collection method on pre- and post-thaw Guirra ram spermatozoa. Theriogenology 2005; 64: 1756-1765.
  • Maia MDS, Bicudo SD, Azevedo HC, et al. Motility and viability of ram sperm cryopreserved in a Tris-egg yolk extender supplemented with anti-oxidants. Small Rum Res 2009; 85: 85-90.
  • Joshi A, Bag S, Naqvi SMK, Sharma RC, Mittal JP. Effect of post-thawing incubation on sperm motility and acrosomal integrity of cryopreserved Garole ram semen. Small Rum Res 2005; 56: 231-238.
  • Moustacas VS, Zaffalon FG, Lagares MA, et al. Natural, but not lyophilized, low density lypoproteins were an acceptable alternative to egg yolk for cryopreservation of ram semen. Theriogenology 2011; 75: 300-307.
  • Uysal O, Bucak MN. Effects of oxidized glutathione, bovine serum albumin, cysteine and lycopene on the quality of frozen-thawed ram semen. Acta Vet Brno 2007; 76: 383-390.
  • Gündoğan M, Avdatek F, Yeni D. Effect of extenders on motility, morphology and osmotic resistance parameters of ram sperm during liquid storage. Revue Méd Vét 2011; 162: 546-551.
  • Olive PL, Banath JP. The Comet assay: A method to measure DNA damage in individual cells. Nature Protocols 2006; 1: 23-29.
  • Collins AR. The Comet assay for DNA damage and repair principles, applications, and limitations. Mol Biotechnol 2004; 26: 249-260.
  • Baumber J, Ball BA, Gravance CG, et al. The effect of reactive oxygen species on equine sperm motility, viability, acrosomal integrity, mitochondrial membrane potential and membrane lipit peroxidation. J Androl 2000; 21: 895-902.
  • Bucak MN, Tuncer PB, Sarıözkan S, et al. The effect of antioxidants on post-thawed bovine sperm oxidative stres parameters: Antioxidants protect DNA integrity against cryodamage. Cryobiol 2010; 61: 248-253.
  • Hu JH, Li QW, Jıiang ZJ, Li WY. Effects of different extenders on DNA integrity of boar spermatozoa following freezing–thawing. Cryobiol 2008; 57: 257–262.
  • Kim SH, Yu DH, Kim YJ. Effects of cryopreservation on phosphatidylserine translocation, intracellular hydrogen peroxide, and DNA integrity in canine sperm. Theriogenology 2010; 73: 282-292.
  • Kumar R, Mohanarao GJ, Atreja SK. Freeze–thaw induced genotoxicity in buffalo (Bubalus bubalis) spermatozoa in relation to total antioxidant status. Mol Biol Rep 2011; 38: 1499-1506.
  • Tuncer PB, Bucak MN, Büyükleblebici S, et al. The effect of cysteine and glutathione on sperm and oxidative stress parameters of post-thawed bull semen. Cryobiol 2010; 61: 303-307.
Fırat Üniversitesi Sağlık Bilimleri Veteriner Dergisi-Cover
  • ISSN: 1308-9323
  • Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
  • Yayıncı: Prof.Dr. Mesut AKSAKAL
Sayıdaki Diğer Makaleler

Ratlarda Siklofosfamid ile Oluşturulmuş Hemorajik Sistitte Propolis ve Enginarın Koruyucu Etkileri

Seval YILMAZ, Emre KAYA

Sıçanlarda, 7,12 Dimetil Benzantrasen ile Oluşturulan Yumuşak Doku Sarkomunda Genisteinin Koruyucu Rolü

Hasan GENÇOĞLU, Mehmet TUZCU, Fatih AKDEMİR, Cemal ORHAN, Zeynep TUZCU, İbrahim H. ÖZERCAN, Kazım ŞAHİN, Nurhan ŞAHİN

Bir Danada Fibrinli Hemorajik Sekokolitis Olgusu

Ömer KIZIL, Kenan Çağrı TÜMER

Şap Hastalıklı ve Şap Aşısı Yapılan Sığırlarda Bazı Hematolojik ve Biyokimyasal Parametrelerin Değerlendirilmesi

Mustafa İSSİ, Müjdat KAYA

Tavuk Kas Dokularında LC-MS/MS ile Çoklu Antibiyotik Kalıntılarının Taranması

İbrahim Ozan TEKELİ, Cemil KÜREKCİ, Mustafa YİPEL

Otlu Peynirlerde Histamin, Bazı Mikrobiyolojik ve Kimyasal Özelliklerin Araştırılması

Osman İrfan İLHAK, Gökhan Kürşad İNCİLİ, Zafer AKKOÇ

Diyabetik Sıçanlarda Taurinin Kalp Dokusu Antioksidan Düzeyleri ile NF-B ve Nrf2 Sinyal Yolakları Üzerine Etkisi

Hasan GENÇOĞLU, Mehmet TUZCU, Cemal ORHAN, Zeynep TUZCU, Can Ali AĞCA, Kazım ŞAHİN

Koç Spermasına Katılan Bazı Antioksidanların Dondurma ve Çözdürme Sonrası Spermatolojik Parametreler, Oksidatif Stres ve DNA Hasarı Üzerine Etkileri

Fatih AVDATEK, Mustafa GÜNDOĞAN

Karma Yeme İki Farklı Metot ile Korunan Esansiyel Yağ Karışımı İlavesinin Kınalı Kekliklerde (Alectoris chukar) Performans ve Bazı Kan Parametreleri Üzerine Etkileri

Mehmet ÇİFTÇİ, Mehtap ÖZÇELİK, Gülşah GÜNGÖREN, Zafer ÇAMBAY, Seda İFLAZOĞLU MUTLU, Anıl KIZILASLAN, Zeki ERİŞİR, Ülkü Gülcihan ŞİMŞEK

Teknik Arıcılıkta Kritik Bakım ve Besleme Uygulamaları

Pınar TATLI SEVEN, İsmail SEVEN