İhsan Hakkı ÇİFCİ, Engin KARAKEÇE, Tayfur DEMİRAY, Gülşah AŞIK, Halil ER

Karbapenem dirençli Klebsiella pneumoniae suşlarında OXA-48 ve KPC varlığının araştırılması

Son 10 yılda tüm dünyada karbapenem dirençli Enterobacteriaceae izolatlarında artış bildirilmektedir. Çalışmamızda Ocak 2011 ve Temmuz 2012 tarihleri arasında Sakarya Üniversitesi Hastanesinde saptanan karbapenem dirençli Klebsiella pneumoniae suşlarında OXA-48 ve KPC gen bölgelerinin araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya toplam 273 K.pneumoniae izolatı dahil edilmiştir. Tanımlama ve antibiyotik duyarlılık testleri konvansiyonel ve Vitek 2 otomatize sistemi ile gerçekleştirilmiştir. Karbapeneme dirençli saptanan iki izolat üç farklı primer seti ile 23S rRNA, OXA 48 ve KPC gen bölgeleri için araştırılmıştır. Laboratuvarımızda izole edilen karbapenem dirençli K.pneumoniae suşlarının küçük M tipi koloni morfolojileri, EMB agarda zayıf laktoz pozitiflikleri ve üreyi geç hidrolize etmeleri ile konvansiyonel çalışmalarda farklı algılara neden olabileceği gözlenmiştir. Otomatize sistemle K.pneumoniae olarak bildirilen izolatların tanımlaması 23S rRNA gen bölgelerinin gösterilmesiyle moleküler olarak doğrulanmıştır. Karbapenem direnciyle ilişkili olarak her iki suşunda OXA-48 gen bölgesine sahip olduğu gözlenmiştir. KPC gen bölgesiyle ilişkili pozitiflik saptanamamıştır. Sonuç olarak; mevcut veriler K.pneumoniae suşları arasında karbapenem direncinin sınırlı olduğunu göstermektedir. Ancak karbapeneme dirençli K.pneumoniae klinik önemi bütün dünyada artan bir konudur. Sonuçlarımız K.pneumoniae suşlarında direnç düzeyi ve mekanizmalarının izlenmesi ihtiyacına işaret etmektedir.

An Investigation on the Presence of OXA-48 and KPC in Carbapenem Resistant Klebsiella pneumoniae Strains

Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae isolates increasingly have been reported worldwide in the past 10 years. In this study; we aimed to investigate OXA-48 and KPC gene regions of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae isolatesSakarya University Hospital, Sakarya between January 2011 and July 2012. A total of 273 K.pneumoniae isolates were included in this study. Identification and antibiotic susceptibility tests were performed with conventional and Vitek 2 automated system. Two carbapenem-resistant isolates screened using three different primers set to detect 23S rRNA, OXA-48 and KPC gene region. Carbapenem resistant K.pneumoniae isolates, isolated in our laboratory, have been observed that they could cause different perceptions during conventional studies due to their properties of having small M-type colony morphology, having weak positivity of lactose and having late urea hydrolysis. By demonstrating the 23S rRNA gene region of K.pneumoniae isolates where defined by automated system; it was accepted that the identification has been confirmed as molecular basis. It was obser- ved that both isolates had OXA-48 gene region in relation to carbapenem resistance. KPC gene regions were not positive in our isolates. In conclusion; available data concerning carbapenem resistance among K.pneumoniae strains are limited but these agents are a matter of increasing clinical concern worldwide. Our results highlighted the need to monitor resistance level and mechanisms among K.pneumoniae isolates. at

PDF

___

Aktaş Z, Kayacan CB, Schneider I, Can B, MidillK, Bauernfeind A. Carbapenem-hydrolyzing oxacillinase, OXA-48, persist in Klebsiella pneumoniae in İstanbul, Turkey, Chemotherapy 200854(2):101-6. http://dx.doi.org/10.1159/000118661 PMid:18303258
Aktaş Z, Satana D, Kayacan Ç et al. Carbapenem resistance in Turkey: repeat report on OXA-48 in Klebsiella pneumoniae and first report on IMP-1 beta-lactamase in Escherichia coli, Afr J MicrobioRes 2012;6(17):3874-8.
Aşık G, Er H, Şahin M, Ünal Z, Demirörs AAltındiş M. Klebsiella pneumoniae izolatlarında OXA-48 geninin varlığının araştırılması, 10Antimikrobik Kemoterapi Günleri Kitabı, Poster no.16, İstanbul (2012).
Bell JM, Mathai D, Jones RN, Turnidge JDEmergence of OXA-48 carbapenemases among Klebsiella spp from India, 50 th Intersci, ConAntimicrob Agents Chemother, Amerikan Society for Microbiology, Poster no.C2-650, Boston (2010).
Benouda A, Touzani O, Khairallah MT, Araj GFMatar GM. First detection of oxacillinase mediated resistance to carbapenems in K.pneumoniae from Morocco, Ann Trop Med Parsitol 2010;104(4)327-30. http://dx.doi.org/10.1179/136485910X12743554760108 PMid:20659393
Biçmen M, Sarı A, Gülay Z. OXA-48 karbapenemaz üreten Enterobacteriaceae üyelerinin klonailişkilerinin araştırılması, Antimikrobik Kemoterapi Günleri Kitabı, Poster no.48, İstanbul (2012).
Bush K, Jacoby GA. Updated functional classifica- tion of beta-lactamases, Antimicrob Agents Chemother 2010;54(3):969-76. http://dx.doi.org/10.1128/AAC.01009-09 PMid:19995920 PMCid:2825993
Carrer A, Poirel L, Eraksoy H, Cagatay A, Badur S, Nordmann P. Spread of OXA-48 positive carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae iso- letes in İstanbul, Turkey, Antimicrob Agents Chemother 2008;52(8):2950-4. http://dx.doi.org/10.1128/AAC.01672-07 PMid:18519712 PMCid:2493117
Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSL). Performans Standart for antimicrobial Suspectibility Testig. Twentieth Informational Supplement, M100- S20, Wayne, PA (2010).
Cuzon T, Naas T, Bogaerts P, Glupczynski Y, Huang TD, Nordmann P. Plasmid encoded carba- penem hydrolyzing beta-lactamase OXA-48 in an imipenem susceptible K.pneumoniae strain from Belgium, Antimicrob Agent Chemother 2008;52(9): 3463-4. http://dx.doi.org/10.1128/AAC.00543-08 PMid:18644970 PMCid:2533501
Cuzon G, Naas T, Lesenne A, Benhamou M, Nordmann P. Plasmid mediated carbapenem hydrolyzing beta-lactamase OXA-48 in an imipe- nem susceptible K.pneumoniae strain from Tunisia, Int Antimicrob Agent 2010;36(1):91-3. http://dx.doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2010.02.014 PMid:20356714
Erdem B. Enterobacteriaceae, Ustaçelebi Ş (ed). Temel ve Klinik Mikrobiyoloji kitabında s.471- 515, Güneş Kitabevi, Ankara (1999).
European Antimicrobial Resistance Surveillance System, http:/www.hpsc.ie/hpsc/A-Z/Microbio- logyAntimicrobialResistanceSuryellanceSystem EARSS/(accessedinFebruary2011).
Gur D, Hascelik G, Aydın N et al. Antimicrobial resistance in Gram negative hospital isolates: results of the Turkish HITIT-2 Surveillance Study of 2007, J Chemother 2009;21(4):383-9. PMid:19622455
Gülmez D, Woodford N, Palepou MF et al. Carbapenem-resistant Escherichia coli and Klebsiella Pneumoniae isolates from Turkey with OXA-48 like carbapenemases and outher memb- rane protein loss, Int J Antimicrob Agents 2008;31(6): 523-6. http://dx.doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2008.01.017 PMid:18339523
Hidron AI, Edwards JR, Patel J et al. NHSN annual update: antimicrobial-resistant pathogens associated with healthcare associated infections: annu- al summary of data reported to the National Healthcare Safety Network at the Centers for Disease Control and Prevention, 2006-2007, Infect Control Hosp Epidemiol 2008;29(11):996-1011. http://dx.doi.org/10.1086/591861 PMid:18947320
Korten V, Ulusoy S, Zarakolu P, Mete B. Antimiotic resistance surveillance over a 4-year period (2000- 2003) in Turkey: results of the MYSTIC Program, Diagn Microbiol Infect Dis 2007;59(4):453-7. http://dx.doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2007.06.016 PMid:17888609
Livermore DM. Has the era of untreatable infecti- ons arrived ? J Antimicrob Chemother 2009;64(Suppl 1):29-36. http://dx.doi.org/10.1093/jac/dkp255 PMid:19675016
MacKenzie FM, Forbes KJ, Doraia John T, Amyes SG, Gould IM. Emergence of a carbapenem- resistant Klebsiella pneumoniae, Lancet 1997; 350(9080):783. http://dx.doi.org/10.1016/S0140-6736(05)62567-6
Maltezou HC. Metallo-beta-lactamases in Gram negative bacteria:introducing the era of panresis- tance ? Int J Antimicrob Agents 2009;33(5):405. http://dx.doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2008.09.003 PMid:19095416
Nordmann P, Naas T,Poirel L. Global spread of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae, Emerg Infec Dis 2011;17(10):1791-8. http://dx.doi.org/10.3201/eid1710.110655 PMid:22000347 PMCid:3310682
Poirel L, Heritier C, Tolun V, Nordmann P. Emergence of oxacillinase-mediated resistance to imipenem in Klebsiella pneumoniae, Antimicrob Agents Chemother 2004;48(1):15-22. http://dx.doi.org/10.1128/AAC.48.1.15-22.2004 PMid:14693513 PMCid:310167
Quenaan AM, Bush K. Carbapenemases; the ver- satile beta-lactamases, Clin Microbiol Rev 2007;20(3);440-58. http://dx.doi.org/10.1128/CMR.00001-07 PMid:17630334 PMCid:1932750
Samra Z, Ofir O, lishtzinsky Y, Madar Shapiro L, Bishara J. Outbreak of carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae producing KPC-3 in terti- ary medical centre in Israel, Int J Antimicrob Agents 2007;30(6):524-9. http://dx.doi.org/10.1016/j.ijantimicag.2007.07.024 PMid:17931835
Schwaber MJ, Klarfeld-Lidji S, Navon-Venezia S, Schwartz D, Leavitt A, Carmeli Y. Predictors of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae acquisition among hospitalized adults and effect of acquisition on mortality, Antimicrob Agents Chemother 2008;52(3):1028-33. http://dx.doi.org/10.1128/AAC.01020-07 PMid:18086836 PMCid:2258527
Somer A, Aktaş Z, Kayacan ÇB ve ark. Çocuk yogun bakım ünitesinde OXA-48 üreten karbape- nem dirençli Klebsiella pneumoniae, 23.ANKEM Antibiyotik ve Kemoterapi Kongresi, Poster no.71, Çeşme (2008). PMCid:3057183
Us E, Tekeli A, Akan ÖA, Dolapçı İ, Şahin F, Karahan ZC. Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesinde 2004-2007 yılları arasında izole edilen karbapene- me dirençli Klebsiella pneumoniae suşlarının moleküler epidemiyolojisi, Mikrobiyol Bul 2010; 44(1):1-10. PMid:20455393
Yigit H, Queenan AM, Anderson GJ et al. Novel carbapenem-hydrolyzing beta-lactamase, KPC-1, from a carbapenem-resistant strain of Klebsiella pneumoniae, Antimicrob Agents Chemother 2001; 45(4):1151-61. http://dx.doi.org/10.1128/AAC.45.4.1151-1161.2001 PMid:11257029 PMCid:90438