Zübeyde LALE, Funda AL DOĞRUMAN, Işıl FİDAN, Gülcan ADYAMAN, EMİNE YEŞİLYURT ŞÖLEN, Kayhan ÇAĞLAR, Seçil ÖAKAN

İshalli hastaların dışkı örneklerinde Clostridium difficile toksin A/B sıklığının araştırılması

Clostridium difficile, antibiyotik ile ilişkili ishallerin en önemli etkenlerindendir. Toksijenik C.difficile suşları, asempto- matik kolonizasyondan, pseudomembranöz kolite kadar değişen farklı klinik semptomlara neden olmaktadır. C.difficile ile ilişkili kolit tanısında dışkı örneklerinde toksin üretimini belirleyen testler yaygın olarak kullanılmaktadır. Çalışmamızda ishalli hastalara ait dışkı örneklerinde C.difficile toksin A/B varlığının belirlenmesi amaçlanmıştır. Toksin A/B varlığının belirlenmesi, enzim immünoassay yöntemi (ELISA) ile yapılmıştır. Bu amaçla, Serazym Clostridium difficile Toxin A/B(Seramun, Almanya) ticari kiti kullanılmıştır. İncelenen 592 adet dışkı örneğinde C.difficile toksin A/B pozitifliği % 24 olarak tespit edilmiştir. Kan ve dışkı lökosit sayılarının Toksin A/B pozitif hastalarda toksin negatif hastalara göre anlamlı düzeyde düşük olduğu belirlenmiştir (p< 0.01, p=0.012). C.difficile toksin A/B pozitiflik oranı en sık hematoloji-onkoloji, kemik iliği nakil ünitelerindeki hastalara ait dışkı örneklerinde tespit edilmiştir. C.difficile infeksiyonunun ishalli hastalardaki dışkı örneklerinde yüksek oranda bulunduğu tespit edilmiştir. Özellikle antibiyotiklerin yoğun olarak kullanıldığı ve immünsupresif hastaların bulunduğu ünitelerde C.difficile infeksiyonlarının daha sık görüldüğü tespit edilmiştir. Bu nedenle, C.difficilenin, ishal ayırıcı tanısında mutlaka düşünülmesi gereken bir patojen olduğu ve tanısına yönelik testlerin yapılmasının uygun olacağı düşünülmüştür. C.difficile ile ilişkili ishallerde antibiyotik kullanımının yüksek oranda olması nedeniyle, hastanelerin belirli zaman aralıklarında antibiyotik kullanım stratejilerini gözden geçirmeleri gerekmektedir.

The Investigation of Frequency of Clostridium difficile Toxin A/B in Stool Samples of Patients with Diarrhea

Clostridium difficile is one of the most important causes of diarrhea associated with antibiotics. Toxigenic strains of C.difficile lead to various clinical symptoms, ranging from asymptomatic colonization to pseudomembranous colitis. The most widely used test for diagnosing C.difficile associated colitis is a test that detects toxins produced by C.difficile in stool samples. In our study, stool samples of 592 patients with diarrhea were studied for prevalence of C.difficile Toxin A/B. To investigate the presence of Toxin A/B, the enzyme immunoassay method (ELISA) was carried out using ile Serazym Clostridium difficile Toxin A/B kit (Seramun, Germany). In the stool samples examined, 24 % C.difficile toxin A/B positivity was found in total 592 stool examples. The number of leukocytes in the blood and stool samples was significantly lower in Toxin A/B positive patients than those of Toxin A/B negative patients (p< 0.01, p=0.012). The rate of C.difficile Toxin A/B positivity was more frequently detected in patients stool samples the divisions of hematology-oncology and bone marrow transplantation. C.difficile infection rate in patients stool samples showing symptoms of diarrhea was high. In divisions which antibio- tics were widely used and patients were immunsuppressed, C.difficile infections were more common. C.difficile should be considered as a pathogen in the differential diagnosis of diarrhea and diagnostic testing might be appropriate. In addition, since the use of antibiotics is high in C.difficile associated diarrhea, hospitals should revise their antibiotic strategies periodically.

PDF

___

Alam S, Mushtaq M. Antibiotic associated diarrhea in children, Indian Pediatrics 2009;46(6):491-6. PMid:19556659
Alfa MJ, Du T, Beda G. Survey of incidence oClostridium difficile infection in Canadian hospitals and diagnostics approaches, J Clin Microbio1998;36(7):2076-80. PMid:9650966 PMCid:104982
Altindiş M, Usluer S, Çiftçi İ, Tunç N, Çetinkaya Z, Aktepe O. Antibiyotiğe bağlı ishal olgularında Clostridium difficile varlığının kültür ve toksin saptama yöntemleriyle araştırılması, MikrobiyoBul 2007;41(1):29-37. PMid:17427550
Asha NJ, Tompkins D, Wilcox MH. Comparative analysis of prevalence, risk factors, and molecular epidemiology of antibiotic-associated diarrhea due to Clostridium difficile, Clostridium perfringens, and Staphylococcus aureus, J Clin Microbio2006;44(8):2785-91. http://dx.doi.org/10.1128/JCM.00165-06 PMid:16891493 PMCid:1594656
Aygün G, Aslan M, Yaşar H, Altaş K. Antibiyotikle ilişkili ishal olgularında Clostridium difficile toksin A+B araştırılması, Turk Mikrobiyol Cem Derg 2003;33(1):39-41.
Büyükbaba Boral Ö. Clostridium difficile infeksiyonu ön tanılı hastaların dışkı örneklerinde toksin A ve Bnin belirlenme sıklığı, Türk Mikrobiyol Cem Derg 2003;32(3-4):220-4.
Deniz U, Ülger N, Aksu B, Karavuş M, Söyletir GMarmara Üniversitesi Hastanesinde yatan ishallhastalardan izole edilen Clostridium difficile kökenlerinde toksin genlerinin araştırılmasıMikrobiyol Bul 2011;45(1):1-10. PMid:21341153
Drudy D, Harnedy N, Fanning S, Mahony RO, Kne L. Isolation and characterisation of toxin A-negativetoxin B-positive Clostridium difficile in DublinIreland, Clin Microbiol Infect 2007;13(3): 298-304. http://dx.doi.org/10.1111/j.1469-0691.2006.01634.x PMid:17391385
Garcia C, Samalvides F, Vidal M, Gotuzzo EDupont HL. Epidemiology of Clostridium difficile associated diarrhea in a Peruvian tertiary care hospital, Am J Trop Med Hyg 2007;77 (5):802-5. PMid:17984329
Gasperino J, Garala M, Hillel W Cohen, Kvetan V, Currie B. Investigation of critical care unit utilization and mortality in patients infected with Clostridium difficile, J Crit Care 2010;25(2):282-6. http://dx.doi.org/10.1016/j.jcrc.2009.04.002 PMid:19592210
Güzel-Tunçcan Ö, Ulutan F, Karakuş R. Antibiyotiğe bağlı ishal gelişen nötropenik ve nötropenik olmayan hastalarda Clostridium diffi- cile toksin sıklığı ve risk faktörlerinin analizi, Mikrobiyol Bul 2008;42(4);573-83.
Hookman P, Barkin JS. Clostridium difficile asso- ciated infection, diarrhea and colitis, World J Gastroenterol 2009;15(13):1554-80. http://dx.doi.org/10.3748/wjg.15.1554 PMid:19340897 PMCid:2669939
Kelly CP, LeMont T. Clostridium difficile-more diffi- cult than ever, N Engl J Med 2008;359(18):1932-40. http://dx.doi.org/10.1056/NEJMra0707500 PMid:18971494
Poxton IR, McCoubrey J, Blair G. The pathogeni- city of Clostridium difficile, Clin Microbiol Infect 2001;7(8):421-7. http://dx.doi.org/10.1046/j.1198-743x.2001.00287.x PMid:11591205
Poutanen SM, Simor AE. Clostridium difficile- associated diarrhea in adults, CMAJ 2004;171(1): 51-8. http://dx.doi.org/10.1503/cmaj.1031189 PMid:15238498 PMCid:437686
Samra Z, Talmor S, Bahar J. High prevalence of toxin-A negative, toxin-B positive Clostridium difficile in hospitalized patients with gastrointes- tinal disease, Diag Microbiol Infect Dis 2002; 43(3):189-92. http://dx.doi.org/10.1016/S0732-8893(02)00400-5
Shin BM, Kuak EY, Lee EJ, Songer JG. Algorithm combining toxin immunoassay and stool culture for diagnosis of Clostridium difficile infection, J Clin Microbiol 2009;47(9): 2952-6. http://dx.doi.org/10.1128/JCM.00609-09 PMid:19625481 PMCid:2738110
Warny M, Pepin J, Fang A et al. Toxin production by an emerging strain of Clostridium difficile associated with outbreaks of severe disease in North America and Europe, Lancet 2005; 366(9491): 1079-84. http://dx.doi.org/10.1016/S0140-6736(05)67420-X