Cloning and expression of citrate permease gene Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetylactis MAD61

Protoplastlarda indiiklenen plazmid giderme çalışmaları sonucu, Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetylactis (L. diacetylactis) MAD61 susunda sitrat permeaz (Cit-P) determinantının 8.4 kb büyüklükteki pMC8 plazmidi olduğu tanımlandı. 1.9 kb büyüklükteki Cit-P gen fragmenti pNZ9019 plazfnidinin Hindlll / Pst l bölgesi içerisine klonjandı. Oluşturulan rekombinant plazmid pNZ9020 E. coli E10-1 ve sitrat permeaz negatif ($Cit-P^-$) L. diacetylactis MAD61-22 susuna aktarıldı ve kullanımı sağlandı. Bu sonuçlar, MAD61 susundan aktarılan sitrat permeaz geninin tür içi ve türler arası konakçılarda ifade edilebildiğini gösterdi.

Sitrat permeaz geninin Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetylactis MAD61 suşundan klonlanması ve ifadesi

The citrate permease determinant (Cit-P) in Lactococcus lactis subsp. lactis biovar. diacetylactis MAD61 (L. diacetylactis) was demonstrated to be encoded by a 8.4 kb plasmid, pMC8, by protoplast induced plasmid curing experiments. The 1.9 kb Cit-P gene fragment was cloned into the Hindllll Psf/site of plasmid pNZ9019. Resulting recombinant plasmid, pNZ9020, enabled Escherlchia co//E10-1 and citrate permease negative ($Cit-P^-$) L diacetylactis MAD61 -22 to transport and utilise citrate, indicating expression ot the citrate permease from strain MAD61 to interspecific and intraspecific hosts.

___