Necmi ÖZDEMİR, Fatih Mehmet KANDEMİR, Mehtap ÖZÇELİK

Koyun böbrek doku Arginazının etilen diamin tetra asetik asit (EDTA), para kloromerküri benzoik asit (P-CMBA), N- Etil maleimid (NEM) tarafından inhibisyonu ve inhibisyon kinetiği

Bu çalışmada koyun böbrek doku arginazı üzerine EDTA, NEM, p-CMBA’ in inhibisyon etkileri incelenmiştir. Arginaz aktivitesi Tiyosemikarbazid-Diasetilmonoksim-Üre metodu kullanılarak spektrofotometrik olarak ölçülmüştür. Protein Lowry metoduna göre saptanmıştır. Koyun böbrek dokuları Elazığ Elkas Kesimevi’nden temin edilmiştir. Araştırmada 20 tane koyun böbrek dokusu kullanılmıştır. Sonuç olarak, koyun böbrek doku arginazını EDTA’ nın kompetetif tipte; NEM, p-CMBA’ in ise nonkompetetif tipte inhibisyona uğrattığı saptanmıştır.

Inhibitory effect of ethylene diamine tetra acetic acid (EDTA), p-Chloromercuri benzoic Acid (p-CMBA), N-Ethyl maleimide (NEM) on Arginase activity of the sheep kidney tissue and kinetic of inhibition

In this study, the inhibition effects of EDTA, p-CMBA, NEM on arginase activity in sheep kidney tissue were studied. Arginase activity was spectrophotometrically measured using the Tiyosemicarbazid- Diacetylmonoksim-Urea Method. Protein was determined by the method of Lowry. The kidney tissues of sheep in the present study were obtained from the Elkas sloughterhause in Elazıg. This study was carried out using 20 sample of kidney tissue. In conclusion, arginase activity in sheep kidney tissue was determined to be inhibited competative inhibition by EDTA but to be inhibited noncompetative inhibition by NEM, p-CMBA.

PDF

___

1. Powers GS, Meister T. Urea synthesis and ammonia metabolism. In: Arias I, Popper H, Schachter D, Shafrits DA (Editors), The Liver: Biology and Pathobiology. New York: Raven Press 1982: 251-263.
2. Braissant O, Gotoh T, Loup M, et al. L- Arginine uptake, the citrulline- NO cycle and arginase II in the rat brain : An in situ hybridization study. Mol Brain Res 1999; 70: 231- 241.
3. İlhan N. İnsan Tiroid Doku Arginazının Kinetik Özellikleri. Doktora Tezi, Elazığ: Fırat Üniversitesi Tıp Fakültesi Biyokimya Anabilim Dalı, 1992.
4. Fuentes JM, Campo ML, Soler G. Kinetics and inhibition by some aminoacids of lactating rat Mammary gland arginase. Arch Int Phys Bioch Bioph 1994; 102: 255-258.
5. Konarska L, Tomaszewski L, Rolczyk U. Studies on LArginase in developing rat small intestine, Brain and Kidney. Biochem Med Met Biol 1986; 35: 170-178.
6. Nadolska - Lutyk J, Grabon W, Poremska Z. Arginase in bull testis. Acta Biochim Pol 1990; 37(3): 377-384.
7. Nakamura H, Saheki T, Nakagawa S. Diferential cellular lokalization of enzymes of L- Arginine metabolism in the rat brain. Brain Res 1990; 530: 108-112.
8. Ozan ST, Yaralıoğlu S, İleri T, Halifeoğlu İ. Akkaraman ve ivesi koyunlarında, gebelikte ve doğumdan sonra eritrosit, tükürük ve serum arginaz aktiviteleri ile serum üre ve östrojen düzeyleri. Tr J Vet Anim Sci 1999; 23: 345-350.
9. Özçelik M, Özdemir N. Koyun meme doku arjinazının bazı biyokimyasal özellikleri. Tr J Vet Anim Sci 2003; 27: 719- 725.
10. Jenkinson CP, Grigor MR. Rat mammary arginase: Isolation and characterization. Biochem Med Met Biol 1994; 51: 156-165.
11. Ikemeto M, Tabata M, Murachi T, et al. Purification and properties of human erytrocyte arginase. Ann Clin Biochem 1989; 26: 547-553.
12. Kandemir FM, Özdemir N. Koyun dalak doku arginazının bazı kinetik özellikleri. Kafkas Üniv Vet Fak Derg 2009;15(4):553-559.
13. Kandemir FM, Özdemir N. L- Lizin ve L- Ornitinin sığır böbrek doku arginaz aktivitesi üzerine inhibisyon etkisi. F Ü Sağ Bil Derg 2008; 22(1): 01-04.
14. Efron DT, Barbul A. Arginine and nutrition in renal disease. J Nutr 1999; 9(3): 142-144.
15. Wu G, Morris SM. Arginine metabolism: Nitric oxide and beyond. Biochem J 1998; 336: 1-17.
16. Muszynska G, Wojtczak M. Influence of immobilization on conformation of rat liver arginase. Int J Bioch 1979; 10: 665-668.
17. Porembska Z, Grabon W, Zelazowska E, et al. Nonidentity of subunits of human kidney arginase A1 and human liver arginase A5. Acta Biochim Pol 1993; 40(4): 465-470.
18. Erişir M, Ozan ST. Sığır rumen doku arginazının bazı amino asitler tarafından inhibisyonu ve kinetiği. Tr J Vet Anim Sci 2000; 24: 65-70.
19. Özçelik M, Özdemir N. L- Lizin ve L- Ornitinin manda karaciğer ve böbrek doku arginazı üzerine etkisi. F Ü Sağ Bil Vet Derg 2009; 23(2): 73-79.
20. Reczkowski RS, Ash DE. Rat liver arginase: Kinetic mechanism, alternate substrates and inhibitors. Arch Biochem Biophys 1994; 312(1): 31-37.
21. Özdemir N, Özçelik M. Manda karaciğer ve böbrek doku arginazının fotoinaktivasyonu ve kinetik özellikleri. Tr J Vet Anim Sci 2001; 25(6): 995-1000.
22. Erişir M. Sığır Rumen Doku Arginazının Bazı Biyokimyasal Özellikleri. Doktora Tezi, Elazığ: Fırat Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, 1997.
23. Geyer JW, Dabich D. Rapid method for determination of arginase activity in tissue homogenates. Analy Biochem 1971; 39(2): 412-417.
24. Lowry OH, Rosenbrough NJ, Farr AL, et al. Protein measurements with the folin phenol reagent. J Biol Chem 1971; 193(1): 265-275.
25. Moss S. Sodium nucleata inhibition of arginase activity. Science 1952; 115: 69-70.
26. Ishmael J, Gopinath C, Howell J. Studies with copper calcium EDTA. J Comp Path 1971; 81, 279-290.
27. Menz GL, Holmes EM, Ferrero RL. In situ charecterization of helicobacter pylori arginase. BBA 1998; 1388(2): 465- 477.
28. Kuhn NJ, Ward S, Piponski M, et al. Purification of human hepatic arginase and its manganese (Iı)- dependent interconversion between active and inactive forms: A possible Ph- sensing function of the enzyme on the ornithine cycle. Arch Biochem Biophys 1991; 320(1): 24- 34.
29. Ber E, Muszynska G, Cechova D. The lack of free –SH groups in rat liver arginase. Bull Acad Pol Sci Biol 1978; 26(10): 665-667.
30. Erişir M, Ozan ST. Sığır doku rumen arginazının saflaştırılmasından önce ve saflaştırılmasından sonra bazı özellikler. Tr J Vet Anim Sci 1999; 23(3): 597-608.
31. Özdemir N, Ozan ST. NEM, EDTA ve p-CMBA’nın M. Benedeni arginazı üzerindeki inhibisyon etkileri ve kinetik özellikleri. Tr J Vet Anim Sci 1994; 19: 157-160.