Yavuz Alev YILMAZ, Ayça VİTRİNEL, Çiler Gülay ERDAĞ, Semiramis SADIKOĞLU, Gülnur TOKUÇ, Nur BERZONONA, YASEMİN AKIN

Akut bakteriyel menenjit tanısında gram boya ve akridin oranj boyasının karşılaştırılması

Amaç: Akut bakteriyel menenjit (ABM) tanısında Akridin Oranj (AO) boyasının kullanılabilirliğini belirlemek ve BOS kültürü ile Gram (Gr) ve AO boyanma arasındaki ilişkiyi ortaya koymaktır. Yöntem: Eylül 1999 - Eylül 2000 tarihleri arasında ABM tanısıyla kliniğimizde izlenen yaşları 3 gün ile 14 yaş arasında değişen 36 vakada BOS'tan hazırlanan konsantre ve konsantre olmayan yaymalarının Gr ve AO ile boyanma sonuçları karşılaştırıldı. Bulgular: Dokuz vakamızın (% 25) BOS kültüründe üreme oldu; bu vakaların 7'sinde (% 77.8) hem Gr hem de AO ile hazırlanan preparatlarda bakteri saptandı. Gr boyayla bakteri saptanmayıp AO boyasıyla bakteri görülen sadece l vaka (% 11.1) ve AO boyasıyla bakteri saptanmayıp Gr boyayla bakteri görülen sadece l vaka (% 11.1) mevcuttu. BOS kültüründe üreme olup hem Gr hem de AO boyasıyla bakteri saptanamayan hastamız yoktu. BOS kültüründe üreme olmayan 27 vakamızın ise 3'ünde (% 11.1) hem Gr hem de AO ile hazırlanan preparatlarda bakteri saptandı. Gr boyayla bakteri saptanmayıp AO boyasıyla bakteri görülen 4 vaka (% 14.8) ve AO boyasıyla bakteri saptanmayıp Gr boyayla bakteri görülen 4 vaka (% 14.8) mevcuttu. BOS kültüründe üreme olmayan vakaların 16'sında (% 59.3) hem Gr hem de AO boyasıyla bakteri saptanmadı. Sonuç: Birçok çalışmada BOS'da bakteri aranmasında AO boyasının kullanımının hızlı, güvenilir ve Gr boyamadan daha sensitifbir teknik olduğu bildirilmiştir. Ancak bizim çalışmamızda BOS kültüründe üreme olan ve olmayan vakalarda AO boyasının Gr boyadan daha üstün olmadığı sonucuna varılmıştır. AO boyası BOS'ta bakteri aranmasında yardımcı bir teknik olarak kullanılabilir. Ancak AO boyasıyla bakteri saptandığında mutlaka Gr boyama yapılarak bakterinin ayrımsal özellikleri saptanmalıdır.

Anahtar Kelimeler:

Beyin omurilik sıvısı, Akridin oranj, Menenjit, bakteriyel, Tanı, Çocuk

The comparison of gram strain and acridine orange strain in the diagnosis of acute pyogenic meningitis

Aim: The purpose of this study was to assess the impor-tance of using AO strain in the diagnosis ofAPM and the relationship between CSF culture Gram (Gr) and AO strain. Methods: In this study, we compared the Gram andacridine orange (AO) strain of concentrated and non-concentrated cerebrospinal fluid (CSF) in 36 cases with the diagnosis of acute pyogenic meningitis, ages between 3 days and 14 years, from September 1999 through September 2000. Results: CSF cultures were positive in 9 patients (25 %), in 7 (77.8 %) of these patients bacteria have been observed in both preparations prepared with Gr and AO strain. Only 1 case (11.1 %) has been observed, where bacteria was detected with AO smear and not with Gr smear. Again, only 1 case (11.1 %) has been observed where bacteria was detected with Gr smear and not with AO smear. In three of the 27 patients with negative CSF culture, CSF smears were positive with microorganism in Gr and AO strain together. In 4 cases microorganism was seen in smear with AO strain. In the remaining 16patients with negative culture, nothing was detected in the CSF smears with both of the strain types. Conclusion: Although AO strain was confirmed as quick, confident anda more sensitive technique than Gr strain, in our study, no superiority of A O strain to Gr strain was seen in the cases with positive and negative CSF culture. AO strain can be used as a secondary (auxiliary) technique in the isolation of microorganism in CSF. But if microorganism was seen in AO strain, Gr strain should be applied in order to establish the distinguishable features of the microorganism.

Keywords:

Cerebrospinal Fluid, Acridine Orange, Meningitis, Bacterial, Diagnosis, Child,

___

1. Bell WE. Bacterial and other nonviral infections. Bacterial meningitis. In: Rudolph AM, Hoffman J, Rudolph CD, eds. Rudolph's Pediatrics. Connecticut: Appleton&Lange 1996: 202-4.
2. Feigin RD, Schneider JH. Bacterial meningitis beyond the newborn period. In: Me Millan JA, De Angelis CD, Feigin RD, Warshaw JB, eds. Oski's Pediatrics. Philadelphia: Lipponcott Williams and Wilkins 1999:855-63.
3. Prober CG. Central nervous system infections. Acute bacterial meningitis beyond the neonatal period. In: Behrman RE, Kliegman RM, Jenson HB, eds. Nelson Textbook of Pediatrics. Philadelphia: WB Saunders Company 2000: 751-7.
4. Saez-LIorens X, McCracken GH. Meningitis. In: Katz SL, Gershon AA, Hotez PJ, eds. Krugman's Infectious Diseases of Children. Missouri: Mosby St. Louis 1998:265-79.
5. Stutman HR, Marks MI. Bacterial meningitis in children: Diagnosis and therapy. A review of recent development. Clin Pediatr 1987; 26:431-8.
6. Chapin K. Clinical microscopy. In: Murry PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH, eds, Manual of Clinical Microbiology. Washington DC: ASM Press 1995:33-53.
7. Lim LC, Pennell DR, Schell RF. Rapid detection of bacteria in cerebrospinal fluid by immunofluorescence staining on membrane filters. J Clin Microbiol 1990; 4:670-7.
8. Giorgio A, Rambaldi M, Maccario P, Ambrosone L, Moles DA. Detection of microorganism in clinical specimens using slides prestained with acridine orange (AOS). Microbiologica 1989; 12:97-100.
9. Kleiman MB, Reynolds JK, Watts NH, Schneiner RL, Smith JW. Superiority of acridine orange stain versus Gram strain in partially treated bacterial meningitis. J Pediatr 1984; 104:401-4.
10. Kronwall G, Myhre E. Differential staining of bacteria in clinical specimens using acridine orange buffered at low pH. Acta Pathol Microbial Scand 1977; 85:249-54.
11. Lauer BA, Roller LB, Mirrett S. Comparison of acridine orange and Gram strains for detection of microorganisms in cerebrospinal fluid and other clinical specimens. J Clin Microbiol 1981; 14:201-5.
12. Yüksel Ş, Öztürk MK, Çaksen H, Semerkan B, Coşkun A. Akut bakteriyel menenjit tanısında akridin oranj lökosit sitospin testinin kullanılması. Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Dergisi 1999; 42:55-64.
13. Choi HS, Anderson PJ. Diagnostic cytology of cerlebrospinai fluid by the cytocentrifuge method. Am Soc Clin Pathol 1979; 72:931-43.
14. Fripp PJ, Mason PR, Super H. A method for diagnosis of Trichomonas vaginalis using acridine orange. J Parasitol 1975; 61:966-7.
15. Forsum U, Hailen A. Acridine orange staining of urethral and cervical smears for the diagnosis of gonorrhea. Acta Derm Venerol 1979; 59:281-2.
16. Hanes VE, Lucia HL. Acridine orange as a screen for organisms in clinical specimens and comparison with gram's stain. Arch Pathol Lab Med 1988;112:529-32.
17. Hansen DW, Hunter DT, Richards DF, Allred L. Acridine orange in the staining of blood parasites. J Parasitol 1970; 56:386-7.
18.Shanholtzer CJ, Schaper PJ, Peterson LR. Concentrated Gram stain smears prepared with cytospin centrifuge. J Clin Microbiol 1982; 16:1052-6.