Ayşe PARMAKSIZ, Aysel İTİK EKİNCİ, Bünyamin İREHAN, Selim ÇOMAKLI, Mustafa ÖZKARACA

Koyun ve Keçi Abortlarında Neospora caninum ve Toxoplasma gondii' nin Dubleks PCR, İmmunohistokimyasal ve İmmunfloresans Yöntemlerle Teşhisi

Ülkemizde koyun ve keçilerde görülen abortlarda genel olarak bakteriyel ve viral etkenlerin aranmasına gidilmiştir. Koyun ve keçi abortlarında Neospora caninum ve Toxoplasma gondii' nin etkenlerinin teşhisine yönelik dubleks PCR, immunohistokimya ve immunfloresans metotlarını içeren bir çalışma yapılmamıştır. Bu çalışmada koyun ve keçi abortlarında Neospora caninum ve Toxoplasma gondii varlığının tespit edilmesi amaçlanmıştır. İncelenen 16 koyun ve 7 keçi abort örneğinde Neospora caninum tespit edilmedi. T. gondii 1 koyun abortunda dubleks PCR, immunohistokimya ve immunfloresans yöntemleriyle, 1 keçi abortunda ise dubleks PCR ve immunohistokimya yöntemleriyle saptanmıştır. İmmunohistokimyasal olarak pozitif tespit edilen koyun abort örneğinde antijenler karaciğerde, keçi abort örneğinde ise karaciğere ek olarak, miyokardda görüldü. İmmunfloresans yöntemle yapılan boyamalarda keçi abortunda herhangi bir pozitiflik tespit edilmezken, koyun abortunda dalakta pozitiflik görüldü. Sonuç olarak sunulan çalışma ile T. gondii' nin koyun abortlarında Türkiye' de varlığı dubleks PCR, immunohistokimyasal ve immunfloresans yöntemleri birlikte kullanılarak ilk kez ortaya konulmuştur.

Determination of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in Sheep and Goat Fetuses Using Dublex PCR, Immunohistochemistry, and Immunflourescence Methods

Bacterial and viral agents have been commonly started to investigate in abortions which are seen in sheep and goats in our country. The study, which involves three different methods (dublex PCR, immunohistochemistry and immunofluorescence) onto sheep and goat abortions which are caused by Neospora caninum and Toxoplasma gondii agents has been never performed before. This study is aimed to determination of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in sheep and goat abortions. Neospora caninum was not determined in samples of inspected 16 sheep and 7 goat abortions. However, Toxoplasma gondii was detected into one sheep abortion with dublex PCR, immunohistochemistry and immunofluorescence methods, it was also detected into one goat abortion with dublex PCR, immunohistochemistry methods. The antigens, which was immnunohistochemically positive detected in samples of sheep were observed into the liver, but they were observed into myocard in addition to liver in samples of goat abort. In contrast to any positiveness was not detected in dyeing that was performed with immunofluorescence methods, positiveness was observed into spleen of sheep abortions. Consequently, this project suggested that existence of Toxoplasma gondii has been first revealed by using duplex PCR together with immunohistochemistry and immunofluorescence methods in sheep and goat abortions in our country.

PDF

___

1. Altıntaş K., 1997. Tıbbi Genel Parazitoloji ve Protozooloji, 171-192, Medical Network- Nobel, Ankara.
2. Kuman HA., Altıntaş N., 1996. Protozoon Hastalıkları, 112-142, Bornova İzmir.
3. Onul B., 1991-1998. İnfeksiyon Hastalıkları. 391 (6), Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Yayını, Ankara.
4. Kuman HA., Altıntaş N., Üstün S., Gürüz AY., 1995. Toksoplasmoz. In "İmmun yetmezlikte Önemi Artan Parazit Hastalıkları", Eds., MA Özcel, 137- 164, Ege Üniversitesi yayını, İzmir.
5. Saygı G., 1998. Temel Tıbbi Parazitoloji, 71-77, Esnaf Ofset Matbaacılık, Sivas.
6. Töre O., 2002. Toxoplasma gondii In "İnfeksiyon Hastalıkları ve Mikrobiyolojisi", Eds., AW Topçu, G Söyletir, M Doğanay, cilt 1, 676-685, Nobel Tıp Kitapevleri, Ankara.
7. Kuman AH., 2002. "Toxoplasma gondii In "İnfeksiyon Hastalıkları ve Mikrobiyolojisi", Eds., AW Topçu, G Söyletir, M Doğanay, 1883- 1897, Nobel Tıp Kitapevleri, Ankara,
8. Dubey JP., Beattie CP., 1988. Toxoplasmosis of Animal and Man. 61-80, CRC Press. Inc. Boca Raton. Florida.
9. Kaufmann J., 1996. Parasitic infections of domestic animals. A diagnostic manual, 423, Birkhause Verlag Basel Boston, Berlin.
10. Levine ND., 1985. Veterinary Protozoology, 413, Iowa State University Press, Ames.
11. Rommel M., 2000. Protozoenfektionen der wiederkaufer, 121-191, Blackwell WissenschaftsVerlag, Berlin.
12. Soulsby ELJ., 1986. Helminths. Artropod and protozoa of domesticated animals. 7th ed., 809, Bailliere Tindall, London.
13. İnci A., Iça A., Yıldırım A., Düzlü Ö., 2008. Memelilerin (Yabani) Önemli Paraziter Hastalıkları-I: Protozoon Enfeksiyonları, 51-60, Erciyes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Parazitoloji Anabilim Dalı, Kayseri.
14. Dubey JP., 1988. Lesions in transplacentally induced toxoplasmosis in goats. American Journal of Veterinary Research, 49, 905-909.
15. Freyre A., Bonino J., Falcon J., Castells D., Mendez J., Casaretto A., 1997. Toxoplasmic abortion in sheep: economic significance in Uruguay, Produccion Ovina, 10, 29-41.
16. Slosarkova S., Literak I., Skrivanek M., Svobodova V., Suchy P., Herzig I., 1999. Toxoplasmosis and iodine deficiency in Angora goats. Veterinary Pathology, 81, 89-97.
17. Wendy J., Joseph S., 1992. Toxoplasmosis Infection in Sheep. Compendium of Continuing Education, 14, 1543-1549.
18. Wilson M., Ware DA., Juranek DD., 1990. Serologic Aspects of Toxoplasmosis. Journal of the American Veterinary Medical Association, 196, 277-281.
19. Aktaş M., Dumanlı N., Babür C., Karaer Z., Öngör H., 2000. Elazığ yöresinde gebe ve yavru atmış koyunlarda Sabin-Feldman (SF) testi ile Toxoplasma gondii yönünden seropozitiflik oranının belirlenmesi. Turkish Journal of Veterinary Animal Science, 24, 239-241.
20. Zeybek H., Yaralı C., Nishikawa F., Dündar B., 1995. Ankara yöresi koyunlarında Toxoplasma gondii' nin prevalansının saptanması. Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, 8, 80-86.
21. İnci A., Aydın N., Babür C., Çam Y., Akdoğan C., Kuzan S., 1999. Kayseri yöresinde sığır ve koyunlarda toxoplazmozis ve brusellozis üzerine seroepidemiyolojik araştırmalar. Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, 30, 41-46,
22. Sevinç F., Kamburgil K., Dik B., Güçlü F., Aytekin H., 2000. Konya yöresinde atık yapan ve yapmayan koyunlarda indirekt fleurosan antikor (IFA) testi ile toxoplazmozis araştırması. Fırat Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi, 24, 180-185.
23. Aslantas Ö., Babür C., 2000. Kars yöresinde sığır ve koyunlarda Bruselloz ve Toxoplazmoz üzerine seroepidemiyolojik araştırmalar. Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, 11, 47-55.
24. Kamburgil K., Durgut R., Handemir E., 2001. Hatay yöresinde atık problemi olan koyun sürülerinde toxoplasmozisin seroprevalansı. Veterinarium, 12, 1-4.
25. Tütüncü M., Akkan HA., Babür C., Ayaz E., Karaca M., 2001. The seroprevalence of Toxoplasma gondii in sheep detected by Sabin Feldman Dye Test in the region of Van, Turkey. Yüzüncü Yıl Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 12, 33-35.
26. Tramuta C., Lacerenza D., Zoppi S., Goria M., Dondo A., Ferroglio E., Nebbia P., Rosati S., 2011. Development of a set of multiplex standard polymerase chain reaction assays for the identification of infectious agents from aborted bovine clinical samples. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 23, 657-664.
27. Alkan Z., Özbel Y., Özensoy S., Atambay M., 1997. Moleküler Biyolojik Yöntemler. In "Parazit Hastalıklarında Tanı", Ed., MA Özcel, N Altındaş, No: 15, 373-411, Türkiye Parazitoloji Derneği Yayını. İzmir.
28. Masala G., Porcu R., Madau L., Tanda A., Ibba B., Satta G., Tola S., 2003. Survey of ovine and caprine toxoplasmosis by IFAT and PCR assays in Sardinia, Italy, Veterinary Parasitology, 117, 15- 21.
29. Hurtado A., Aduriz G., Moreno B., Barandika J., Garcia-Perez AL., 2001. Single tube nested PCR for the detection of Toxoplasma gondii in fetal tissues from naturally aborted ewes. Veterinary Parasitology, 102, 17-27.
30. Dubey JP., Kirkbride CA., 1990. Toxoplasmosis and other causes of abortions in sheep from the north central United States. Journal of the American Veterinary Medical Association, 196, 287-290.
31. Masala G., Porcu R., Daga C., Denti S., Canu G., Patta C., Tola S., 2007. Detection of pathogens in ovine and caprine abortion samples from Sardinia, Italy, by PCR. Journal of Veterinary Diagnostic Investigaton, 19, 96-98.
32. Steuber S., Niu A., Bauer C., Reetz J., Roth A., Janitschke K., 1995. Der Nachweis von Toxoplasma gondii in Abortgeweben vom Schaf mittels der Polymerase-Kettenreaktion, Deutsche Tierarztliche Wochenschrift, 102, 91-93.
33. Chanton-Greutmann H., Thoma R., Corboz L., Borel N., Pospischil A., 2002. Abortion in small ruminants in Switzerland: investigations during two lambing seasons (1996-1998) with special regard to chlamydial abortions. Schweizer Archiv für Tierheilkunde, 144, 483-492.
34. Moeller RB., 2001. Cause of caprine abortion: diagnostic assessment of 211 cases (1991-1998). Journal of Veterinary Diagnostic Investigation, 13, 265-270.
35. Motta AC., Vieira MIB., Bondan C., Edelweiss MIA., Dametto MA., Gomes A., 2008. Aborto em ovinos associada à toxoplasmose: Caracterizac¸ ao sorologica, anatomo-patologica e imunoistoquimica. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinaria, 17, 204-208.
36. Benavides J., Maley S., Pang Y., Palarea J., Eaton S., Katzer F., Innes EA., Buxton D., Chianini F., 2011. Development of lesions and tissue distribution of parasite in lambs orally infected with sporulated oocysts of Toxoplasma gondii. Veterinary Parasitology, 179, 209-215.
37. Munhoz IAS., Pinto ARS., Albuquerque GR., Oliveira FCR., Loss ZJ., Lopes CWG., 2002. Toxoplasmose em coelhos: comparac¸ ao do perfil bioquimico hepatico como sachados patologico sem infecc¸ ao pelo Toxoplasma gondii. Parasitologia Latinoam, 57, 83-87.
38. Pereira-Bueno J., Quıntanilla-Gozalo A., PerezPerez V., Alvarez-Garcia G., Collantes-Fernandez E., Ortega-Mora LM., 2004. Evaluation of ovine abortion associated with Toxoplasma gondii in Spain by different diagnostic techniques. Veterinary Parasitology, 121, 33-437.