Bu çalışmada, antimikrobiyal aktivitenin belirlenmesi amacıyla bakteriyel üremenin optik dansitesindeki değişmeleri sürekli izleme temeline dayanan mikrobuyyon kinetik sistem kullanılmıştır. Bu sistemi kullanarak Staphylococcus aureus’un bir model antibiyotiğin (gentamisin) artan konsantrasyonları varlığında türbidimetrik üreme eğrilerinin oluşturulması ve minimum inhibitör konsantrasyonunun (MİK) belirlenmesi amaçlanmıştır. Ayrıca sonuçlar konvansiyonel sıvı mikrodilüsyon yöntemi ile de karşılaştırılmıştır. Bu kinetik yöntemde Mueller Hinton sıvı besiyerinde üretilen S.aureus (ATCC 25923) süspansiyonu ve gentamisin (0.0625-64 µg/ml) mikroplaklara dağıtılmıştır. Her bir kuyucuğun optik dansitesi 600 nm’de, “multi-detection” mikroplak okuyucu yardımıyla 37°C’de 24 saat süreyle ve 15 dakika aralıklarla otomatik olarak ölçülmüş ve kaydedilmiştir. S.aureus’un türbidimetrik üreme eğrileri ve gentamisin MİK değeri mikrobuyyon kinetik sistemi ile belirlenmiştir. Buna göre gentamisin MİK50 ve MİK90 değerleri inkübasyon periyodunun ilk yarısında sırasıyla 0.235 ve 0.488 µg/ml olarak hesaplanmıştır. Konvansiyonel sıvı mikrodilüsyon yöntemi ile gentamisin MİK değeri 0.5 µg/ml olarak belirlenmiştir. Mikrobuyyon kinetik sistem ile sıvı mikrodilüsyon yönteminin sonuçları benzer bulunmuş ve kinetik sistem ile in vitro antimikrobiyal duyarlılık daha erken bir aşamada belirlenmiştir. Sonuç olarak, mikrobuyyon kinetik sistemin antibakteriyel aktivitenin değerlendirilmesinde hızlı ve objektif sonuç veren bir yöntem olduğu anlaşılmıştır.

In this study a microbroth kinetic system based on continuous monitoring of changes in the optical density of bacterial growth was used for determination of antimicrobial activity. By using this system we aimed to describe turbidimetric growth curves of Staphylococcus aureus in the presence of increasing concentrations of a model antibiotic (gentamicin) and to determine minimum inhibitory concentration (MIC). Additionally, we compared these results with conventional broth microdilution method. S.aureus (ATCC 25923) strain grown in Mueller Hinton broth and gentamicin (0.0625-64 µg/ml) were dispensed in microtiter plates for this kinetic assay. Optical densities for each well were measured for 24 hours by 15 min interval at 37°C via multi-detection microplate reader at 600 nm and were automatically recorded. Turbidimetric growth curves of S.aureus were obtained and MIC of gentamicin was determined by microbroth kinetic system. Accordingly, MIC50 and MIC90 values of gentamicin on S.aureus were determined as 0.235 and 0.488 µg/ml respectively at the first half of the incubation period. Gentamicin MIC value was also determined as 0.5 µg/ml by using conventional broth microdilution method. The results in microbroth kinetic system were similar to the conventional broth microdilution method and in vitro antimicrobial susceptibility was determined in an earlier stage. In conclusion, the microbroth kinetic system is rapid and objective method for assessing the antibacterial activity.