Comparison of PBP2a latex agglutination test with disk diffusion, mecA PCR and Vitek for the detection of methicillin resistant Staphylococcus aureus isolates

Metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) izolatlannin saptanmasında genotipik vefenotipikyöntemlerin güvenilirliği araştırılmıştır. Bu amaçla çeşitli klinik örneklerden izole edilen 111 S.aureus izolatınm oksasiline duyarlılıkları dört farklı yöntem [1- NCCLS disk difüzyon testi, 2- Vitek GPS 101 (bioMerieux, Fransa) kartları ile duyarlılık saptanması, 3- MRSA-Screen (Denka Seiken, Japonya) ile direkt PBP2a belirlenmesi ve 4- PCR ile mecA geni varlığının gösterilmesi] kullanılarak incelenmiştir. Metisiline dirençli izolatların sayısı disk difüzyon yönteminde 80, Vitek sistemi ile 85, MRSA-Screen test ile 81 ve mecA gen analizi ile 76 olarak bulunmuştur. mecA gen analizi sonuçlarına göre disk difüzyon, Vitek ve MRSA-Screen testinin duyarlılık ve özgüllükleri sırasıyla % 100 ve % 90; % 100 ve % 80; %100ve% 88 olarak bulunmuştur. Gerek fenotipik gerekse genotipik yöntemler arasında sonuçların uyumsuz olduğu örnekler yeniden çalışıldığında, sonuçların MRSA-Screen ile örtüşecek şekilde değiştiği gözlenmiştir. NCCLS disk difüzyon yönteminin ve Vıtek sisteminin inokulum miktarına dikkat edilerek kullanıldığı takdirde rutin laboratuvarlarda MRSA belirlenmesinde kullanılabilecek güvenilir yöntemler olduğu saptanmıştır. Ayrıca, MRSA-Screen testinin hızlı, kolay ve güvenilir bir yöntem olduğu, doğrulama testi olarak tercih edilebileceği düşünülmüştür.

Metisiline dirençli Staphylococcus aureus izolatlarında PBP2a lateks aglutinasyon testinin disk difüzyon ve Vitek ile karşılaştırılması

To determine the most accurate genotypic orphenotypic method for the detection ofMRSA, oxacillin susceptibility of 111 S. aureus isolates recovered from various clinical specimens were studied by 4 different methods: 1. NCCLS disk diffusion test; 2. Susceptibility determination by the Vitek GPS 101 (bioMerieux, France) cards; 3. Direct detection of PBP2a with MRSA-Screen (Denka Seiken, Japan) test; 4. mecA gene detection by PCR. The numbers of isolates found to be methicillin resistant were 80 by the disk diffusion test, 85 by the Vitek system, 81 by the MRSA-Screen test, and 76 by the mecA gene analysis. According to mecA gene analysis, sensitivity and specificity of disk diffusion, Vitek, and MRSA-Screen tests were found as 100 % and 90 %;100 % and 80 %; 100 % and 88 %, respectively. When the isolates which had shown discrepancies with both phenotypic and genotypic methods were re-studied, it was observed that all results were in complete agreement with MRSA-Screen test. NCCLS disk diffusion test and Vitek system, providing that all recommendations were followed carefully, are suitable tests to be used in routine laboratories io detect MRSA isolates, whereas MRSA-Screen test can be preferred as a verification tool due to its being a fast, easy and dependable method.

___

  • 1. Archer GL:Staphylococcus aureus; a well-armed pathogen, Clin Infect Dis1998:26:1179.
  • 2. Cavassini M, Wenger A, Jaton K, Blanc DS, Bille J: Evaluation of MRSA-Screen, a simple anti-PBP 2a slide latex agglutination kit, for rapid detection of methicillin resistance Staphylococcus aureus, J Clin Microbiol 1999:37:1591.
  • 3. Chambers HF: Methicillin resistance in staphylococci; molecular and biochemical basis and implications, Clin Microbiol Rev 1997:10:781.
  • 4. Frebourg NB, Nouet D, Lemee L, Martin E, Lemeland JF: Comparison of ATB Staph, Rapid ATB Staph, Vitek and E-test methods for detection of oxacillin heteroresistance in staphylococci possessing mec A, J Clin Microbiol 1998;36:52.
  • 5. Griethuysen A, Pouw M, Leeuwen N, Heck M, Willemse P, Buiting A, Kluytmans J: Rapid slide latex agglutination test for detection of methicillin resistance in Staphylococcus aureus, J Clin Microbiol 1999;37:2780.
  • 6. Jaffe RI, Lane JD, Alburg SV, Niemeyer DM: Rapid extraction from, and direct identification in clinical samples of methicillin-resistant staphylococci using the PCR, J Clin Microbiol 2000;38:3407.
  • 7. Kolbert CP, Arruda J, Varga-Delmore P, Zheng X, Lewis M, Kolberg J, Persing DH: Branched-DNA assay for detection of the mecA gene in oxacillin-resistant and oxacillin-sensitive staphylococci, J Clin Microbiol 1998;36:2640.
  • 8. Louie L, Matsumura SO, Choi E, Louie M, Simor AE: Evaluation of three rapid methods for detection of methicillin resistance in Staphylococcus aureus, J Clin Microbiol 2000;38:2170.
  • 9. Lyon BR, Skurray R: Antimicrobial resistance of Staphylococcus aureus: Genetic basis, Microbiol Rev 1987;51:88.
  • 10. Nakatomi Y, Sugiyama J: A rapid latex agglutination assay for the detection of penicillin binding protein 2, Microbiol Immunol 1998;42: 739.
  • 11. National Committee for Clinical Laboratory Standards: Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests, 9 th ed., Approved standard M2-A6, NCCLS, Wayne Pa (1999).
  • 12. Skulnick M, Simor AE, Gregson D, Patel M, Small GW, Kreiswirth B, Hathoway D, Low DE: Evaluation of commercial and standard methodology for determination of oxacillin susceptibility in Staphylococcus aureus, J Clin Microbiol 1992;30:1985.
  • 13. Ünal S, Hoskins J, Flokowitsch JE, Wu CYE, Preston D, Skatrud PL: Detection of methicillin-resistant staphylococci by using the polymerase chain reaction, J Clin Microbiol 1992;30:1685.
  • 14. van Leeuwen WB, Kreft DE, Verbrugh H: Validation of rapid screening tests for the identification of methicillin resistance in staphylococci, Microb Drug Resist 2002;8:55.
  • 15. Yamazumi T, Marshall SA, Wilke WW, Diekema DJ, Pfaller MA, Jones RN: Comparison of the Vitek Gram-positive susceptibility 106 card and the MRSA-Screen latex agglutination test for determining oxacillin resistance in clinical bloodstream isolates of Staphylococcus aureus, J Clin Microbiol 2001;39:53.
  • 16. Zheng X, Kolbert CP, Varga-Delmore P, Arruda J, Lewis M, Kolberg J, Cockerill FR, Persing DH: Direct mecA detection from blood culture by branched-DNA signal amplification, J Clin Microbiol 1999;37: 4192.
ANKEM Dergisi-Cover
  • ISSN: 1301-3114
  • Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
  • Başlangıç: 1986
  • Yayıncı: Antibiyotik ve Kemoterapi Derneği
Sayıdaki Diğer Makaleler

Hastane infeksiyonu etkeni üropatojen Escherichia coli izolatlarının çeşitli antibiyotiklere direnç durumu

İdris ŞAHİN, İrfan ŞENCAN, Demet KAYA, Aynur GÜLCAN, Şükrü ÖKSÜZ

Klinik örneklerden izole edilen tüberküloz basili kompleksinin majör antitüberküloz ilaçlara direnç oranları

Adil KARADAĞ, Murat TOKAÇ, Abdullah GÜVENLİ, Mustafa SÜNBÜL, Murat GÜNAYDIN, Ahmet SANIÇ

Çeşitli dezenfektan ve antiseptik maddelerin antibakteriyal etkinliğinin araştırılması

YAŞAR NAKİPOĞLU, Bülent GÜRLER

Rinoserebral mukormikoz: Bir olgu sunumu

Özge TURHAN, Dilara İNAN, Rabin SABA, Filiz GÜNSEREN, Latife MAMIKOĞLU

İstanbul Tıp Fakültesi'nde çeşitli örneklerden izole edilen Stafilokok suşlarında glikopeptit direncinin araştırılması

YAŞAR NAKİPOĞLU, Handan KATRANCI, Atahan ÇAĞATAY, Şengül DERBENTLİ

Toplum kökenli üriner sistem infeksiyonlarından soyutlanan Escherichia coli suşlarına fosfomisinin in-vitro etkinliğinin diğer antibiyotiklerle karşılaştırılması

Meltem I. TAŞBAKAN, Hüsnü PULLUKÇU, Tansu YAMAZHAN, Bilgin ARDA, Sercan ULUSOY

Brucella melitensis suşlarının antibiyotik duyarlılıklarının belirlenmesinde agar dilüsyon ve E-test yöntemlerinin karşılaştırılması

DUYGU PERÇİN RENDERS, Bülent SÜMERKAN, Demet AYANGİL, MURAT TELLİ

Alt solunum yolu infeksiyonlarından izole edilen Streptococcus pneumoniae suşlarının serotiplendirilmesi

Yeşim GÜROL, Rahmiye BERKİTEN, Apostolos GEORGOPOULOS

Pseudomonas aeruginosa suşlarının aminoglikozidlere in-vitro duyarlılıkları

Turan GÜNDÜZ, Ayşe ARISOY, Ümit ALGÜN, Beril ÖZBAKKALOĞLU

Yetişkin bir hastada Streptococcus agalactiae menenjiti

Rezan HARMAN, Dilara İNAN, Feryal ÖZTÜRK, Özge TURHAN, Ata Nevzat YALÇIN