Kohya'da ( Bozkır otu,Kochia prostrata L.) in vitro rejenerasyon çalışmaları
Bu çalışmada, Kohya'nın (Kochia prostrata L.) çeşitli doku kültürü teknikleri yoluyla çoğaltma imkanları araştırılmıştır. Kültür öncesi tohumlann yüzey sterilizasyonu 20 dakika süreyle %7 (v/v)'lik sodyum hipokloritle kanştınlarak yapılmıştır. Steril tohumlar, büyüme düzenleyicileri içeren MS ve B5 temel ortamlarında cam kavanozlarda çimlendirilerek fideler elde edilmiştir. Otoklavdan sonra besin ortamına % 0.2 (v/v) oranında ilave edilen ve bir biyosit olan Bitki Koruma Solüsyonu (PPM) hava kaynaklı kontaminasyonu tamamen engellemiştir. Aseptik şartlarda yetiştirilen fidelerden alınan çeşitli parçalar, farklı kombinasyon ve konsantrasyonlarda bitki büyüme düzenleyicileri içeren yan-katı MS ve B5 gibi temel besin ortamlarında kültüre alınarak, bitki rejenerasyonu ve diğer tepkileri gözlemlenmiştir. Kohya'da meristematik olmayan somatik hücreleri ihtiva eden dokular hariç hiçbir eksplantta sürgün oluşumu ortaya çıkmamıştır. Çoğunlukla yumuşak veya sert yapılı ve embryogenik olmayan kallus elde edilmiş fakat bu kallusîar regenerasyon ortamına alındıktan belirli bir süre sonra yavaş yavaş canlılığım kaybetmişlerdir. Özellikle kotiledon boğumlarında bulunan yan meristemlerden çok sayıda sürgün elde edilmiş fakat bu sürgünlerde köklerime oldukça düşük oranda gerçekleşmiştir.
İn vitro regeneration studies on kochia ( Kochia prostrata L.) abstract
Tissue culture of Kochia (Kochia prostrata) was investigated. Surface sterilization of seeds, prior to culture was achieved by immersion in 7% (v/v) sodium hypoclorite solution for 20 min. Sterile seeds were germinated on semi-solidifed MS or B5 media with 3% (w/v) sucrose, semi-solidified with 0.8% (w/v) agar, contained in 175 ml glass jars, in culture room, All media were added 0.2% (v/v) Plant Preservative Mixture, which successfully prevented air-borne contamination. Various explants were tested for their responses to media containing different levels and combinations of plant growth regulators. None of the explants, except those containing organised axillary meristems, was responsive. Tissues turned into brown after a sligth callusing stage which than became necrotic. Callus induction on B5 medium with different levels of 2,4- D and Kinetin was achieved but all calli produced were not embryogesiic upon subculture on various media containing different levels of cytokinins.
