AYŞE SERPİL NALBANTOĞLU, Zafer KARAER, AYŞE ÇAKMAK, Neslihan SÜRSAL, NAFİYE KOÇ, ÖMER ORKUN

Molecular Characterization of Tick-Borne Blood Protozoa in Stray Dogs from Central Anatolia Region of Turkey with a High-Rate Hepatozoon Infection

Kene kaynaklı kan protozoonları köpek sağlığında önemli bir yer tutmaktadır. Bu protozoonların başında Babesia ve Hepatozoon türleri yer almaktadır. Mevcut türler köpeklerde ılımlı hastalık tablosundan şiddetli enfeksiyona varan derecede klinik belirtilere neden olmaktadırlar. Bu çalışmada, sokak köpeklerindeki kene kaynaklı kan protozoonlarının varlığı mikroskobik ve moleküler olarak araştırılmıştır. İncelenen kan preparatlarının hiçbirinde Babesia spp.'nin piroplazmik formuna rastlanmamıştır. Ancak örneklerin %3.8'inde Hepatozoon spp.'nin gametositleri tespit edilmiştir. Yapılan PCR analizleri sonucunda köpeklerde yüksek oranda (%49.5) Hepatozoon enfeksiyonu tespit edilmiştir. Buna karşın hiçbir köpekte Babesia spp. varlığına rastlanmamıştır. Sekans ve filogenetik analizler sonucunda pozitiflerin %86'sının Hepatozoon canis, %13.7'sinin ise Hepatozoon sp. MF olduğu belirlenmiştir. Bu çalışmada elde edilen pozitiflik oranın, Türkiye'deki birçok bölgeden rapor edilen oranlardan daha yüksek olduğu görülmüştür. Bu durum bölgedeki köpekler için Hepatozoon enfeksiyonu açısından risk teşkil etmektedir. Ayrıca henüz patojenitesi hakkında net bir veri bulunmayan ve yeni bir genotip olan Hepatozoon sp. MF varlığı da bölgedeki köpeklerden bildirilmiş olup bu genotip ile ilgili detaylı patojenite ve epidemiyolojik çalışmalara ihtiyaç duyulduğu görülmüştür. Sonuç olarak Ankara'daki sokak köpeklerinde H. canis'in yaygın olarak bulunduğu ortaya konmuştur. Bu nedenle, kliniklerde hepatozoonosis enfeksiyonları dikkate alınmalı ve ayırıcı tanıda göz ardı edilmemelidir

İç Anadolu Bölgesindeki Sokak Köpeklerinde Kene-Kaynaklı Kan Protozoonları Varlığının Araştırılması ve Yüksek Orandaki Hepatozoon Enfeksiyonunun Moleküler Karakterizasyonu

Tick-borne blood protozoa play an important role in canine health, especially, Babesia and Hepatozoon species. In dogs, these species lead to clinical symptoms ranging from mild to severe. This study aimed to investigate the presence of tick-borne blood protozoa in stray dogs using microscopy and molecular methods. While none of the blood smears showed any Babesia spp. piroplasms, Hepatozoon spp. gametocytes were detected in 3.8% of examined samples. PCR analyses revealed the presence of a Hepatozoon infection in 49.5% of dogs. However, the presence of Babesia spp. was not found in any dogs. Sequence and phylogenetic analyses revealed that 86% of the positive cases were Hepatozoon canis and 13.7% were Hepatozoon sp. MF. The positivity rate obtained in this study was higher than the reported rates in many regions in Turkey. This suggests that Hepatozoon infections present a risk to dog health in this region. In addition, Hepatozoon sp. MF (a new genotype of undetermined pathogenicity) is reported in dogs from this region and detailed pathogenicity and epidemiological studies are thus required for this genotype. This study, therefore, suggests that H. canis is common in stray dogs in Ankara. Canine hepatozoonosis should be taken into consideration in pet clinics and the differential diagnosis should not be overlooked

PDF

___

1. Otranto D, Dantas-Torres F, Breitschwerdt EB: Managing canine vector-borne diseases of zoonotic concern: Part one. Trends Parasitol, 25 (4): 157-163, 2009. DOI: 10.1016/j.pt.2009.01.003
2. Chomel B: Tick-borne infections in dogs - An emerging infectious threat. Vet Parasitol, 179, 294-301, 2011. DOI: 10.1016/j.vetpar.2011.03.040
3. Dantas-Torres F, Chomel BB, Otranto D: Ticks and tick-borne diseases: A one health perspective. Trends Parasitol, 28 (10): 437-445, 2012. DOI: 10.1016/j.pt.2012.07.003
4. Irwin P: Babesiosis and cytauxzoonosis. In, Shaw SE, Day MJ (Eds): Arthropod-Borne Infectious Diseases of the Dog and Cat. 63-77, Manson Publishing Ltd, London, 2005.
5. Solano-Gallego L, Sainz A, Roura X, Estrada-Pena A, Miro G: A review of canine babesiosis: The European perspective. Parasit Vectors, 9: 336, 2016. DOI: 10.1186/s13071-016-1596-0
6. Schnittger L, Rodriguez AE, Florin-Christensen M, Morisson DA: Babesia: A world emerging. Infect Genet Evol, 12, 1788-1809, 2012. DOI: 10.1016/j.meegid.2012.07.004
7. Baneth G, Florin-Christensen M, Cardoso L, Schnittger L: Reclassification of Theileria annae as Babesia vulpes sp. nov. Parasit Vectors, 8, 207, 2015. DOI: 10.1186/s13071-015-0830-5
8. Baneth G, Vicent-Jhonson N: Hepatozoonosis. In, Shaw SE, Day MJ (Eds): Arthropod-borne Infectious Diseases of the Dog and Cat. 78-88, Manson Publishing Ltd, London, 2005.
9. Aydin MF, Sevinc F, Sevinc M: Molecular detection and characterization of Hepatozoon spp. in dogs from Central part of Turkey. Ticks Tick Borne Dis, 6, 388-392, 2015. DOI: 10.1016/j.ttbdis.2015.03.004
10. Baneth G: Perspectives on canine and feline hepatozoonosis. Vet Parasitol, 181, 3-11, 2011. DOI: 10.1016/j.vetpar.2011.04.015
11. Ulutas B, Bayramli G, Ulutas PA, Karagenc T: Serum concentration of some acute phase proteins in naturally occurring canine babesiosis: A preliminary study. Vet Clin Path, 34 (2): 144-147, 2005. DOI: 10.1111/ j.1939-165X.2005.tb00028.x
12. Gokce E, Kirmizigul AH, Taskin GT, Uzlu E, Gunduz N, Vatansever Z: Türkiye’de köpeklerde Babesia canis canis’in klinik ve parazitolojik olarak ilk tespiti. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 19 (4): 717-720, 2013. DOI: 10.9775/kvfd.2013.7598
13. Duzlu O, Inci A, Yildirim A, Onder Z, Ciloglu A: Köpeklerde kene kaynaklı bazı protozoon ve rickettsial enfeksiyonların Real Time PCR ile araştırılması ve saptanan izolatların moleküler karakterizasyonları. Ankara Univ Vet Fak Derg, 61, 275-282, 2014.
14. Aktas M, Ozubek S, Altay K, Ipek NDS, Balkaya I, Utuk AE, Kirbas A, Simsek S, Dumanli N: Molecular detection of tick-borne rickettsial and protozoan pathogens in domestic dogs from Turkey. Parasit Vectors, 8, 157, 2015. DOI: 10.1186/s13071-015-0763-z
15. Aktas M, Ozubek S: A survey of canine haemoprotozoan parasites from Turkey, including molecular evidence of an unnamed Babesia. Comp Immunol Microb, 52, 36-42, 2017. DOI: 10.1016/j.cimid.2017.05.007
16. Guven E, Avcioglu H, Cengiz S, Hayırli A: Vector-borne pathogens in stray dogs in Northeastern Turkey. Vector Borne Zoonotic Dis, 17 (8): 610-617, 2017. DOI: 10.1089/vbz.2017.2128
17. Gulanber A, Gorenflot A, Schetters TPM, Carcy B: First molecular diagnosis of Babesia vogeli in domestic dogs from Turkey. Vet Parasitol, 139, 224-230, 2006. DOI: 10.1016/j.vetpar.2006.02.035
18. Ciftci G, Ural K, Aysul N, Cenesiz S, Guzel M, Pekmezci D, Sogut MU: Investigation of the 8-hydroxy-2’-deoxyguanosine, total antioxidant and nitric oxide levels of serum in dogs infected with Babesia vogeli. Vet Parasitol, 204, 388-391, 2014. DOI: 10.1016/j.vetpar.2014.05.002
19. Guo H, Sevinc F, Ceylan O, Sevinc M, Ince E, Gao Y, Moumouni PFA, Liu M, Efstratiou A, Wang G, Cao S, Zhou M, Jirapattharasate C, Ringo AE, Zheng W, Xuan X: A PCR survey of vector-borne pathogens in different dog populations from Turkey. Acta Parasitol, 62 (3): 533- 540, 2017. DOI: 10.1515/ap-2017-0064
20. Aysul N, Ural K, Ulutas B, Eren H, Karagenc T: First detection and molecular identification of Babesia gibsoni in two dogs from the Aydin Province of Turkey. Turk J Vet Anim Sci, 37, 226-229, 2013. DOI: 10.3906/ vet-1201-45
21. Orkun O, Karaer Z, Cakmak A, Nalbantoglu S: Identification of tickborne pathogens in ticks feeding on humans in Turkey. PLoS Negl Trop Dis, 8 (8): e3067, 2014. DOI: 10.1371/journal.pntd.0003067
22. Orkun O, Karaer Z: Molecular characterization of Babesia species in wild animals and their ticks in Turkey. Infect Genet Evol, 55, 8-13, 2017. DOI: 10.1016/j.meegid.2017.08.026
23. Tuzdil AN: Bizde ilk defa görülen bir Hepatozoon canis vakası. Türk Bay Cem Mec, 13, 35, 1933.
24. Voyvoda H, Pasa S, Uner A: Clinical Hepatozoon canis infection in a dog in Turkey. J Small Anim Pract, 45, 613-617, 2004. DOI: 10.1111/ j.1748-5827.2004.tb00184.x
25. Kiral F, Karagenc T, Pasa S, Yenisey C, Seyrek K: Dogs with Hepatozoon canis respond to the oxidative stress by increased production of glutathione and nitric oxide. Vet Parasitol, 131, 15-21, 2005. DOI: 10.1016/j.vetpar.2005.04.017
26. Karagenc TI, Pasa S, Kirli G, Hosgor M, Bilgic HB, Ozon YH, Atasoy A, Eren H: A parasitological, molecular and serological survey of Hepatozoon canis infection in dogs around the Aegean coast of Turkey. Vet Parasitol, 135, 113-119, 2006. DOI: 10.1016/j.vetpar.2005.08.007
27. Pasa S, Kiral F, Karagenc T, Atasoy A, Seyrek K: Description of dnaturally infected with Hepatozoon canis in the Aegean region of Turkey. Turk J Vet Anim Sci, 33 (4): 289-295, 2009. DOI: 10.1016/j.vetpar. 2005.08.007
28. Aktas M, Ozubek S, Ipek DNS: Molecular investigations of Hepatozoon species in dogs and developmental stages of Rhipicephalus sanguineus. Parasitol Res, 112, 2381-2385, 2013. DOI: 10.1007/s00436- 013-3403-6
29. Aktas M, Ozubek S, Altay K, Balkaya I, Utuk AE, Kirbas A, Simsek S, Dumanli N: A molecular and parasitological survey of Hepatozoon canis in domestic dogs in Turkey. Vet Parasitol, 209, 264-267, 2015. DOI: 10.1016/j.vetpar.2015.02.015
30. Bolukbas CS, Pekmezci D, Gurler AT, Pekmezci GZ, Guzel M, Acici M, Umur S: Molecular survey of Hepatozoon canis in dogs from Samsun Province of Northern part of Turkey. Etlik Vet Mikrobiyol Derg, 27 (2): 104-107, 2016.
31. Aktas M, Ozubek S: Transstadial transmission of Hepatozoon canis by Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae) in field conditions. J Med Entomol, 54 (4): 1044-1048, 2017. DOI: 10.1093/jme/tjx050
32. Aktas M: A survey of ixodid tick species and molecular identification of tick-borne pathogens. Vet Parasitol, 200, 276-283, 2014. DOI: 10.1016/j. vetpar.2013.12.008
33. Casati S, Sager H, Gern L, Piffaretti JC: Presence of potentially pathogenic Babesia sp. for human in Ixodes ricinus in Switzerland. Ann Agric Environ Med, 13, 65-70, 2006.
34. Inokuma H, Okuda M, Ohno K, Shimoda K, Onishi T: Analysis of the 18S rRNA gene sequence of a Hepatozoon detected in two Japanese dogs. Vet Parasitol, 106, 265-271, 2002. DOI: 10.1016/S0304- 4017(02)00065-1
35. Hall TA: BioEdit: A user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucleic Acid Symp, 47, 95- 98, 1999.
36. Posada D: jModelTest: Phylogenetic model averaging. Mol Biol Evol, 25, 1253-1256, 2008. DOI: 10.1093/molbev/msn083
37. Kumar S, Strecher G, Tamura K: MEGA7: Molecular evolutionary genetic analysis version 7.0 for bigger datasets. Mol Biol Evol, 33, 1870- 1874, 2016. DOI: 10.1093/molbev/msw054