Kars Yöresinde Atık Yapan İneklerin Çeşitli Örneklerinden Brucella Etkenlerinin Kültürel ve Moleküler Yöntemlerle Araştırılması ve Olguların Epidemiyolojik Analizi

Bu çalışmada, Kars yöresinde atık yapan ineklerden alınan çeşitli örneklerden Brucella etkenlerinin bakteriyolojik ve moleküler yöntemlerle araştırılması ve atık olgularının epidemiyolojik ve klinik özelliklerinin belirlenmesi amaçlandı. Bu amaçla brusellozise karşı aşılanmamış ve atık yapan 284 inekten alınan 265 süt ve 261 vajinal sıvap örneği ile 97 ineğe ait atık fötal doku örneği incelendi. Bakteriyolojik inceleme sonucunda 265 süt örneğinin 41 (%15.47)’inden ve 261 vajinal sıvap örneğinin 25 (%9.57)’inden ve 97 atık fötus örneğinin 40 (%41.23)’ından olmak üzere toplam 106 (%17.01) örnekten Brucella spp. izolasyonu yapıldı. İneklerin 8 (%3.30)’inin hem süt hem de vajinal sıvap örneğinden Brucella spp. izole edildi. İzolatların 105 (%99.05)’i Brucella abortus ve 1 (%0.94)’i Brucella melitensis olarak identifiye edildi. İzolatların tümü saha suşu olarak saptandı. 105 B. abortus izolatının 92 (%87.61)’si B. abortus biyotip 3, 2 (%1.90)’si B. abortus biyotip 6, 2 (%1.90)’si B. abortus biyotip 9 ve 1 (%0.95)’i B. abortus biyotip 1 olarak tiplendirildi. Atık fötus doku örneğinden izole edilen 1 adet B. melitensis suşu B. melitensis biyotip 3 olarak tiplendirildi. B. abortus olarak identifiye edilen 8 suş klasik yöntemlerle biyotiplendirilemedi ve atipik B. abortus olarak belirlendi. Brucella cins spesifik PZR kiti ile tüm izolatlar Brucella spp. ve Brucella tür spesifik PZR kiti ile 105 izolat B. abortus ve 1 izolat B. melitensis olarak teyit edildi. Çalışmada, hastalık için risk oluşturabilecek epidemiyolojik faktörler incelendi ve bu faktörlerin brusella pozitifliğine katkı sağladıkları belirlendi.

Anahtar Kelimeler:

epidemiyolojik araştırmalar, yavru atma, biyotip, brusellozis, inek, süt sığırı, süt ineği, hastalık yaygınlığı, hastalık tetkiki, Türkiye, Kars, sığır, Brucella melitensis, Brucella abortus, technetium, soy, süt, metodoloji, epidemiyoloji

Investigation of Brucella Species from Various Samples of Aborted Cattle in Kars Province (Turkey) by Cultural and Molecular Methods and Epidemiological Analysis of Cases

In this study, investigation of Brucella agents from various samples obtained from aborted cattle in Kars province by bacteriological and molecular methods and determination of epidemiological and clinical characteristics of cases were aimed. For this purpose 265 milk and 261 vaginal swab samples were obtained from 284 aborted cattle that were not vaccinated against brucellosis and 97 tissue samples of aborted foetuses were examined. As a result of bacteriological examination, Brucella spp. were isolated from total of 106 (17.01%) samples, in 41 (15.47%) out of 265 milk, 25 (9.57%) out of 261 vaginal swab and 40 (41.23%) out of 97 aborted foetus samples. Brucella spp. were isolated from both milk and vaginal swab samples of 8 (3.30%) cattle. Among 106 isolates, 105 (99.05%) and 1 (0.94%) were identified as Brucella abortus and Brucella melitensis, respectively. All of the isolates were detected as field strains. Among 105 B. abortus isolates, 92 (87.61%), 2 (1.90%), 2 (1.90%), 1 (0.95%) were typed as B. abortus biotype 3, B. abortus biotype 6, B. abortus biotype 9 and B. abortus biotype 1, respectively. One B. melitensis strain isolated from aborted foetus tissue was typed as B. melitensis biotype 3. Eight B. abortus strains couldn’t be biotyped by classical methods and they were determined as atypical B. abortus. All of the isolates were confirmed as Brucella spp. with Brucella genus-spesific PCR and 105 isolates were identified as B. abortus and one isolate was identified as B. melitensis with Brucella species-specific PCR. In the study, some epidemiological factors that pose a risk for the disease were also investigated and it was found that these factors contributed to brucella positivity.

Keywords:

epidemiological surveys, abortion, biotypes, brucellosis, cows, dairy cattle, dairy cows, disease prevalence, disease surveys, Turkey, Kars, cattle, Brucella melitensis, Brucella abortus, technetium, strains, milk, methodology, epidemiology,

PDF

___

Corbel MJ: Brucellosis: An overview. Emerging Infect Dis, 3 (2): 213-221, 1997.
Ray WC: Brucellosis (due to Brucella abortisand B. suis). In, Steele JH (Ed): Bacterial, Rickettsial and Mycotic Diseases. pp. 99-127. CRC Press, Boca Raton, Florida, USA, 1979.
De BK, Stauffer L, Koylass MS, Sharp SE, Gee JE, Helsel LO, Steigerwalt AG, Vega R, Clark TA, Daneshvar MI, Wilkins PP, Whatmore AM: Novel Brucella strain (BO1) associated with a prosthetic breast implant infection. J Clin Microbiol, 46, 43-49, 2008.
Scholz HC, Nöckler K, Göllner C, Bahn P, Vergnaud G, Tomaso H, Al-Dahouk S, Kämpfer P, Cloeckaert A, Maquart M, Zygmunt MS, Whatmore AM, Pfeffer M, Huber B, Busse HJ, De BK: Brucella inopinata sp. nov., isolated from a breast implant infection. Int J Syst Evol Microbiol, 60, 801-808, 2010.
Corbel MJ, Banai M: Genus I. Brucella Meyer and Shaw 1920, 173AL. In, Brenner DJ, Krieg NR, Staley JT (Eds): Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. 2nd ed., Vol. 2 (Part C). pp. 370-386, Springer, New York, 2005.
WHO: Brucellosis in human and animals. 2006. http://www.who.int/csr/ resources/publications/Brucellosis. pdf. Accessed: 22.08.2010.
Tun TN: Prevalence survey of bovine Brucellosis (Brucella abortus) in dairy cattle in Yangon, Myanmar. Master of Veterinary Public Health, Chıang Mai University and Freie Universitat, Berlin, 2007.
Erdenliğ S: Türkiye’de Brucella kökenleri. XI. Türk Klinik Mikrobiyoloji ve İnfeksiyon Hastalıkları Kongresi. 30 Mart - 03 Nisan İstanbul, 2003.
Genç O, Otlu S, Şahin M, Aydın F, Gökce Hİ: Seroprevalence of Brucellosis and Leptospirosis in aborted dairy cows. Turk J Vet Anim Sci, 29, 359-366, 2005.
Sağlam YS, Türkütanıt S, Taştan R, Bozoğlu H, Otlu S: Kuzeydoğu Anadolu Bölgesinde görülen bakteriyel sığır ve koyun abortlarının etiyolojik ve patolojik yönden incelenmesi. Vet Bil Derg, 14 (2): 133-145, 1998.
Şahin M, Atabay Hİ, Otlu S, Ünver A, Çelebi Ö: Kars ve çevresinde bulunan insan, sığır ve koyunlarda Brusellozisisin prevalansının serolojik ve kültürel metotlarla araştırılması. VI. Ulusal Veteriner Mikrobiyoloji Kongresi. 14-16 Eylül Elazığ, 2004.
Güllüce M: Kars ve Çevresinde Sığırlarda Brucella abortus’a karşı oluşan antikorların ELISA ve diğer serolojik yöntemlerle (RBPT, SAT, MRT) saptanması ve sonuçların karşılaştırılması. Doktora Tezi. Kafkas Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Kars, 1993.
Alton GG, Jones LM, Angus RD, Verger JM: Techniques for the brucellosis laboratory. pp.17-62. Institut National de la Recherche Agronomique, Paris, France, 1988.
Unver A, Atabay Hİ, Güneş V, Çitil M, Erdoğan HM: Kars Yöresinde sığır tüberkülozunun yaygınlığının PCR ile belirlenmesi. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 13 (1): 27-31, 2007.
Otlu S, Sahin M, Atabay HI, Unver A: Serological investigation of brucellosis in cattle, farmers and veterinarians in the Kars district of Turkey. Acta Vet Brno, 77, 117-121, 2008.
Şahin M, Genç O, Ünver A, Otlu S: Investigation of bovine brucellosis in the Northeastern Turkey. Trop Anim Health Prod, 40 (4): 281-286, 2008.
Erdoğan I, Gurel A, Tekin C, Uyanık F, Bitgel A: Detection and distribution of bacterial abortion in sheep, goats and cattle in the Thrace region. J Pendik Vet Microbiol, 24, 23-35, 1993.
Leal-Klevezas DS, Martinez-Vazquez IO, Lopez-Merino A, Martinez-Soriano JP: Single-step PCR for detection of Brucella spp. from blood and milk of infected animals. J Clin Microbiol, 33 (12): 3087-3090, 1995.
Peter AT: Abortions in dairy cows: New insights and economic impact. Adv Dairy Technol, 12, 233-244, 2000.
Buyukcangaz E, Sen A: The first isolation of Brucella melitensis from bovine aborted fetus in Turkey. J Biol Environ Sci, 1 (3): 139-142, 2007.
Genc O, Kamber U: Biotyping of Brucella strains isolated from abortions of cows in Kars province. Ind Vet J, 81, 1164-1165, 2004.
Unver A, Erdoğan HM, Atabay Hİ, Şahin M, Güneş V, Çitil M, Gökçe Hİ: Sığır atıklarından izole edilen Brucella türlerinin RAPD-PCR ile genotiplendirilmesi. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 12 (2): 121-127, 2006.
Aydın F, Leloğlu N, Şahin M, Otlu S: Kars yöresinde sığır ve koyunlarda görülen abortların bakteriyolojik yönden araştırılması. I. Ulusal Veteriner Mikrobiyoloji Kongresi. 27-29 Eylül, Ankara, Türkiye, s. 47. 1994.
Brodie J, Sinton GP: Fluid and solid media for isolation of Brucella abortus. J Hyg Comb, 74 (3): 359-367, 1975.
Farrell ID, Robertson L: A comparison of various selective media including a new selective medium for the isolation of Brucellae from milk. J Appl Bact, 35, 625-630, 1972
İlhan Z, Keskin O, Sareyyüpoğlu B, Kökçü L, Akan M: Bir sığırcılık işletmesinde Brucella abortus epidemisi. Ankara Üniv Vet Fak Derg, 46, 257- 262, 1999.
Karasoy MH: Brucellosis’li koyunlardan elde edilen sütlerden yapılan peynirlerde Brucella melitensis’in dayanma süresi üzerinde araştırmalar. Ankara Üniv Vet Fak Derg, 8 (1): 105-112, 1961.
Langoni H, Ichihara SM, Silva AV, Pardo RB, Tonin FB, Mendonça LJP, Machado JAD: Isolation of Brucella spp. from milk of brucellosis positive cows in São Paulo and Minas Gerais states. Braz J Vet Res Anim Sci, 37 (6): 444-448, 2000.
Çelebi Ö, Otlu S: Kars yöresinde atık yapmış inek sürülerinden alınan süt ve vajinal sıvap örneklerinden Brusella etkenlerinin bakteriyolojik ve moleküler tanımlanması. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 17 (1): 53-58, 2011.
Aydın N: Brucella İnfeksiyonları. In, Aydın N, Paracıkoğlu N (Eds): Veteriner Mikrobiyoloji (Bakteriyel Hastalıklar). s. 145-163, İlke-Emek Yayınları, Ankara, 2006.
Al Dahouk S, Tomaso H, Nockler K, Neubauer H, Frangoulidis D: Laboratory based diagnosis of Brucellosis-A review of the literature. Part I: Techniques for direct detection and identification of Brucella spp. Clin Lab, 49, 487-505, 2003.
OIE: Bovine Brucellosis. OIE Terrestrial Manual. www.oie.int/eng/ normes/mmanual/2008/pdf/2.04.03BOVINE_BRUCELL.pdf, Accessed: 15.08.2010.
Anonim: Brucellosis.www.kkgm.gov.tr/birim/hay_sagl/Hastaliklar/ brucella.htm. Erişim tarihi: 16.09.2010
Anonim: http://erzurum.vet.gov.tr/ErzurumVetKont/BakteriyelHast. html#Brucellozis. Erişim tarihi: 22.09.2010.
. Sarisayin F, Eroğlu M, Nadas UG: Yurdumuzda izole edilen brusella suşlarının tür ve biyotiplerini tayini ile dağılış durumu üzerine bir çalışma. Pendik Vet Kont Araşt Derg, 1, 24-35, 1969.
Refai M: Incidence and control of brucellosis in the Near East region. Vet Microbiol, 90, 81-110, 2002.
Koneman E, Winn W, Alen S, Janda W, Procop G, Schreckenberger P, Woods G: Koneman’s Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology. 8th ed., Lippincott Willams&Wilkins. 482-490, 2006.
Corbel MJ. Atypical Brucella melitensis strains. International Comitee on Sytematic Bacteriology Subcomitee on the Taxonomy of Brucella. 1994. Prague. Czech Republic. Int J Syst Evol, 56, 1169-1170, 2006.
Corbel MJ, Morris JA: Studies on a smooth phage-resistant variant of Brucella abortus. I. Immunological properties. Br J Exp Pathol, 55, 78-87, 1974.
Harrington RJr, Bond DR, Brown GM: Smooth phage-resistant Brucella abortus from bovine tissue. J Clin Microbiol, 5, 663-664, 1977.
Morgan WJB: The examination of brucella cultures for lysis by phage. J Gen Microbiol, 30, 437-443, 1963.
Garcia MM, Brooks BW, Ruckerbauer GM, Rigby CE, Forbes LB: Characterization of an atypical biotype of Brucella abortus. Can J Vet Res, 52, 338-342, 1998.
Bricker BJ: PCR as a diagnostic tool for brucellosis. Vet Microbiol, 90 (1-4): 435-446, 2002.
Fekete A, Bantle JA, Halling SM, Sanborn MR: Preliminary development of a diagnostic test for Brucella using polymerase chain reaction. J Appl Bacteriol, 69 (2): 216-227, 1990.
Evangelista TBR, Santos HO De los, Navarro AFL, Basulto GEM, Nielsen K, Francisco M, Gomez M, Roseles JFM, Manriquez LCP: Evaluation of polymerase chain reaction test (PCR) for the diagnosis of bovine brucellosis. Tec Pecu Mex, 43, 117-126, 2005.
Al-Majali AM, Talafha AO, Ababneh MM, Ababneh MM: Seroprevalence and risk factors for bovine brucellosis in Jordan. J Vet Sci, 10 (1): 61-65, 2009.
Kassahun J: Seroepidemiological study of brucellosis in humans and dairy cattle in Addis Ababa. Master Thesis, Addis Ababa University, Addis Ababa, 2003.