Tavşan karaciğer arginazının optimize edilmesi ve dokulardaki dağılımı

Tavşan karaciğer arginazı için optimal şartlar ve dokulardaki dağılımının araştırıldığı çalışmada bir yaşında 6 adet New Zelland tavşanının dokuları kullanıldı. Tavşan karaciğer doku arginazı için preinkübasyon ısısı 65°C, preinkübasyon zamanı 13 dakika, inkübasyon zamanı 10 dakika ve optimum pH 10 olarak saptanmıştır. En yüksek aktiviteyi 2 mM MnCl2 konsantrasyonunda veren enzimin L-arginine karşı olan Km’i 1.6 mM olarak saptanmıştır. Sonuç olarak enzimin aktivasyonu +2 için Mn iyonlarının ve 65 °C’de preinkübasyonun gerekli olduğu tespit edilmiştir. Karaciğer, böbrek, kalp, uterus, beyin, dalak, bağırsak, yemek borusu, kas, dil, akciğer, mide, soluk borusundan alınan örneklerde en yüksek aktivite karaciğer, en düşük aktivite soluk borusunda saptanmıştır.

Optimization of liver arginase in rabbit and distiribution in tissues

Optimum conditions for liver arginase in rabbit and distribution in the tissues was investigated. In the study, the tissues of six one-year-old New Zealand rabbits were used. Its was found that preincubation temperature 65 °C, preincubation period 13 minutes, incubation period 10 minutes and optimum pH 10 for arginase in rabbit liver tissue. Enzyme achieved its highest activity at 2 mM MnCl2 concentration. Km of arginase in rabbit liver tissue for L-arginine were measured to be 1.6 +2 mM. Consequently, it was determined that Mn ions and preincubation at 65 °C were essential for the activation of the enzyme. Among liver, kidney, heart, uterus, brain, spleen, intestine, esophagus, muscle, tongue, lung, stomach, trachea samples, the highest arginase activity was found in the liver and the lowest arginase activity was found in trachea.

PDF

___

1. Aminlari M, Vaseghi T. Arginasedistribution in tissue of domesticanimals. Comp Biochemand Physiol B 1992; 103: 385-389.
2. Aminlari M, Shahbazkia HR, Esfandiari A. Distribution of arginase in tissues of cat (Feliscatus). J Feline Med Surg 2007; 9: 133-139.
3. Cederbaum SD, Yu H, Grody WW, et al. Arginases I and II: Do theirfunctionsoverlap? Mol Genet Metab 2004; 81: S38- 44.
4. Hakovirta H, Keiski A, Toppari J, et al. Polyamines and regulation of spermatogenesis: Selective stimulation of late spermatogonia in transgenic mice over expressing the human ornithinede carboxylase gene. Mol Endocrinol 1993; 7: 1430-1436.
5. Heby O, Emanuelsson H. Role of the polyamines in germcell differentiation and in early embryonic development. Med Biol 1981; 59: 417-422.
6. Castillo L, deRojas TC, Chapman TE, et al. Splanchnic metabolism of dietary arginine in relation to nitricoxide synthesis in normal adult man. Proc Natl Acad Sci USA 1993; 90: 193-197.
7. Geyer JW, Dabich D. Rapid method for determination of arginaseactivity in tissue homogenates. Anal Biochem 1971; 39: 412-417.
8. Lowry OH, Rosenbrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurements with the folin phenol reagent. J Biol Chem 1951; 193: 265-275.
9. Erişir M, Erçel E, Yılmaz S, Ozan ST. Evaluation of optimal conditions for arginase activity in streptozotocin induced diabetic rats. Vet Med-Czech 2005; 50: 69-76.
10. Erişir M, Ozan S. Sığır rumen doku arginazının saflaştırılmasından önce ve saflaştırılmasından sonra bazı özellikleri. Turk J Vet Anim Sci 1999; 23: 597-608.
11. Spector EB, Rice SCH, Moedjono S, Bernard B, Cederbaum SD. Biochemical properties of arginase in human adult and fetal tissues. Biochem Med 1982; 28: 165-175.
12. Halifeoğlu İ. İnsan Karaciğer, Eritrosit ve Uterus Doku Arginazının Kinetik Özellikleri. Doktora Tezi, Elazığ: Fırat Ünivüniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü, 1993.
13. Benzer F, Ozan ST. Fascioliosisli koyunların arginaz enzim aktivite düzeyleri ile karaciğer doku arginazının bazı biyokimyasal özellikleri. Fırat Üniv Sağ Bil Derg (Vet) 2002; 16: 217-222.
14. Altundağ Y. Bronj lavaj sıvısında arginaz enziminin özellikleri ve klinik diagnostik önemi. Uzmanlık Tezi, Edirne: Trakya Üniversitesi Tıp Fakültesi Biyokimya Anabilim Dalı, 2001.
15. Kandemir MF, Özdemir N. Koyun dalak doku arginazının bazı kinetik özellikleri. Kafkas Univ Vet Fak Derg 2009; 15: 553-559.
16. Muszynska G. Immobilization of Rat Liver Arginase. In: H. Peeters (Editor). Protides of The Biological Fluids. Oxford, Newyork: Pergamon Press, 1976: 633-637.
17. Scolnick LR, Kanyo ZF, Cavalli RC, Ash DE, Christianson DW. Altering the binuclear manganes ecluster of arginase diminishes thermostability and catalytic function. Biochem 1997; 36: 10558-10565.
18. Colombo JP, Konarska L. Arginase. In: Bergmayer GM. (Editor). Methods of Enzymatic Analysis. 3rd Edition, Weinheim: Vertag Chemie 1984: 285-294.
19. Glass RD, Knox WE. Arginase isozymes of rat mammarygl and, liver, and other tissues. J Biol Chem 1973; 248: 5785- 5789.
20. Reczkowski RS, Ash DE. Rat liver arginase: Kinetic mechanism, alternate substrates, and inhibitors. Arch Biochem Biophys 1994; 312: 31-37.
21. Soler G, Mataix FJ, Ruiz-Amil M. Physico-chemical properties of Guinea Pig liver arginase. Rev Esp Fisiol 1981; 37: 37-44.
22. Lisowska-Myjak B, Tomaszewski L, Kraszewska- Domańska B. Intestinal arginase in the phylogenetic development of animals. Pol Arch Weter 1987; 25: 283- 296.
23. Yasuda N, Moriwaki K, Furuyama S. Distribution andproperties of arginase in the salivary glands of four species of laboratory mammals. J Comp Physiol B. 2004; 174: 237-242.
24. Spector EB, Rice SC, Kern RM, Hendrickson R, Cederbaum SD. Comparison of arginase activity in red blood cells of lower mammals, primates, and man: Evolution to high activity in primates. Am J Hum Genet 1985; 37: 1138-1145.