Kangal Köpeği Spermasının Ticari Sulandırıcı (CaniPlus Freeze) Kullanılarak Dondurulması

Günümüzde köpek spermasının kısa süreli ya da dondurularak uzun süreli saklanması amacıylasperma sulandırıcısı olarak çeşitli solüsyonlar kullanılmaktadır. Bu çalışmada Kangal köpeğispermasının CaniPlus Freeze sulandırıcısı kullanılarak dondurulabilirliğinin araştırılmasıamaçlanmıştır. Bu amaçla ırka ait fenotipik özellikleri taşıyan iki adet Kangal köpeğinden masajyöntemi ile alınan toplam 32 ejekülat sperma kullanılmıştır. Dondurma işlemi için birleştirme(pooling) sonrası sperma iki eşit kısma bölünerek birinci kısım Tris solüsyonu ile ikinci kısım iseCaniPlus Freeze sulandırıcısı ile sulandırılmıştır. Payetlere çekilen spermalar buzdolabına (+4 ⁰ C)yerleştirilmiş ve 1.5 saat ekilibrasyona bırakılmıştır. Ekilibrasyon süresi sonunda payetler, sıvı azotseviyesinden 4 cm yükseklikte (-120 ⁰ C) 20 dakikada dondurulmuş ve buradan sıvı azotadaldırılarak saklanmıştır. Dondurma işleminden sonra spermaların bulunduğu payetler 38 ⁰ C’dekisu banyosunda 30 saniyede çözdürülmüş ve spermatolojik muayeneye tabi tutulmuştur. Çalışmadaçözüm sonu motilite oranları kontrol ve CaniPlus Freeze grubunda sırasıyla %45 ve %50 olarakbelirlenmiştir (P>0.05). Anormal spermatozoon oranı ise kontrol grubunda %18.8 iken CaniPlusFreeze grubunda %16.4 olarak tespit edilmiştir (P>0.05). Sonuç olarak araştırmacıların yanı sıraözellikle klinisyen veteriner hekimlerin köpeklerde ticari sulandırıcıları kullanmasının spermasaklama çalışmalarında pratik fayda sağlayacağı kanısına varılmıştır.

Cryopreservation of Kangal Dog Semen in Commercial Extender (CaniPlus Freeze)

Various solutions are used as sperm extenders in order to keep dog spermatozoa for a short time or for freezing for a long time. In our study, it was aimed to determine the effect of commercial diluent on freezing-thawing spermatological parameters in freezing of Kangal dog sperm. For this purpose, a total of 32 ejaculates were taken from two Kangal dogs by massage method. After freezing, the semen was divided into two equal portions and the first portion was diluted with Tris solution and the second portion was diluted with CaniPlus Freeze diluent. spermatozoa were placed in the refrigerator (+4 ⁰ C) and left for 1.5 hours. At the end of the equilibration period, the straws were frozen for 20 minutes at a height of 4 cm (-120 ⁰ C) from the level of liquid nitrogen and stored therein by immersion into liquid nitrogen. After freezing, the semens were thawed at 38 ⁰ C for 30 seconds and subjected to spermatological examination. In the study, the resulting motility ratios were 45% and 50%, respectively in the control and CaniPlus Freeze groups (P>0.05). Abnormal spermatozoon ratio was found to be 18.8% in control group and 16.4% in CaniPlus Freeze group (P>0.05). As a result, in addition to researchers, we are particularly considering that the use of commercial diluents by clinician veterinarians in dogs will be of practical benefit in semen storage studies.

PDF

___

Mamak N. Sivas Yöresindeki Kangal Köpeği Üretim Çiftliklerinde Bulunan Köpeklerde Bazı Enfeksiyöz ve Paraziter Hastalıkların (Leptospirozis, Listeriozis, Dirofilariazis, Barsak Parazitleri) Araştırılması ve Sağaltımı. Doktora Tezi, Ankara: Ankara Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, 2002.
Hiemstra SJ. “Guidelines for the constiution of national cryopreservation programmes for farm animals”. http://www.agris.fao.org/ 05.01.2018.
Stockner PK. Status of the canine frozen semen industry. Modern Veterinary Practice 1985; 66: 98-100.
Concannon PW, Battista M. Current Veterinary Therapy. 1st Edition, Philadelphia: WB Saunders, 1989.
Tekin N. Hayvan yetiştiriciliğinde reprodüktif biyotekniklerin önemi ve yeri. Veteriner Hekimliği Dergisi 2007; 78: 15-17.
Hunter FRH. Physiology and Technology of Reproduction in Female Domestic Animals. 1st Edition, Edinburgh: Academic Press, 1980.
Linde-Forsberg C. Artificial insemination with fresh, chilled extended, and frozen-thawed semen in the dog. Seminars in veterinary medicine and surgery (small animal). 1995; 10: 48-58.
England GC. Cryopreservation of dog semen: A review. J Reprod Fertil Supp 1992; 47: 243-255.
Uysal O, Varish O, Tosun H, Yavas I, Gurcan I. Cryopreservation of canine semen at different freezing and thawing programmes. Indian Vet J 2007; 84: 57-59.
Watson PF. Artificial insemination and the preservation of semen. Marshall’s Physiology of Reproduction 1990; 2: 747-869.
Linde-Forsberg C, Forsberg M. Fertility in dogs in relation to semen quality and the time and site of insemination with fresh and frozen semen. J Reprod Fertil 1989; 299-310.
Silva LDM, Verstegen JP. Comparisons between three different extenders for canine intrauterine insemination with frozen-thawed spermatozoa. Theriogenology 1995; 44: 571-579.
Gungor S, Bucak MN. Basal medium eagle solution may improve the post-thaw parameters of Kangal dog semen. Eurasian Journal of Veterinary Sciences 2016; 32: 193- 199.
Tekin N, İzgür H, Özyurt M. Köpeklerde penis masajı yöntemiyle sperma alma ve başlıca spermatolojik özellikler üzerinde araştırmalar. Selçuk Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 1987; 1: 83-95.
Tekin N. Spermanın muayenesi ve değerlendirilmesi. In: Alaçam E. (Editor). Evcil Hayvanlarda Reprodüksiyon, Sun’i Tohumlama, Doğum ve İnfertilite. 1st Baskı, Konya: Dizgievi, 1994: 69-70.
Watson PF. Recent developments and concepts in the cryopreservation of spermatozoa and the assessment of their post-thawing function. Reprod Fertil Dev 1995; 7: 871-891.
Watson PF. The causes of reduced fertility with cryopreserved semen. Anim Reprod Sci 2000; 60: 481- 492.
Holt WT. Fundemental aspects of sperm cryobiology: The importance of species and individual differences. Theriogenology 2000; 53: 47-58.
Hermansson U, Forsberg CL. Freezing of stored, chilled dog spermatozoa Theriogenology 2006; 65: 584-593.
Smith FO. Cryopreservation of canine semen. Tecnique and performance. Diss Abstr Int B-Sci 1985; 11: 3441.
Blesbois E, Caffin JP. Serum like’ albumin of fowl seminal plasma and effects of albumin on fowl spermatozoa stored at 4 ⁰ C. Brh Poult Sci 1992; 33: 663-670.
Yu I. Canine sperm cryopreservation using glucose in glycerol-free tris. CryoLetters 2014; 35: 101-107.
Akçay E, Tekin N. Andrological examinations of Kangal sheepdogs (Karabash). Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences 2002; 26: 965-973.
Brito MM, Lúcio CF. Angrimani DS, et al. Comparison of cryopreservation protocols (Single and Two-steps) and thawing (Fast and Slow) for canine sperm. Anim Biotechnol 2017; 28: 67-73.
Baran A. Köpek Spermasının Farklı Oranlarda Gliserol İçeren Sulandırıcılarda Dondurulması. Doktora Tezi, İstanbul: İstanbul Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, 1997.