Bovine Ephemeral Fever Virüsün Rekombinant G Proteininin İmmunoperoksidaz Metodu ile Belirlenmesi

Bu çalışmanın amacı, bovine ephemeral fever virusun (BEFV) rekombinant glikoproteini (G) ile transfekte hücrelerin immunoperoksidaz (IP) yöntemi ile belirlenmesidir. Bu amaçla, BEFV G genini bulunduran rekombinantpcDNA4/HisMax(pcDNA4-G) vektörü Vero hücrelerine transfekte edilmiştir. Daha sonra, BEFV için spesifik monoklonal antikorlar kullanılarak gerçekleştirilen IP yöntemi ile G proteininin açıklatılmasının hücresel lokalizasyonu belirlenmiştir. Çalışmanın sonuçları IP yönteminin transfeksiyonun ve açıklatılmanın görüntülenmesi için ucuz, hızlı ve uygun bir yöntem olduğunu gösterdi.

Detection of Recombinant G Proteins ofBovine Ephemeral Fever Virus by Immunoperoxidase Method

The aim of this study was detection of the cells that transfected with recombinant glycoproteins (G) of bovine ephemeral fever virus (BEFV) by immunoperoxidase (IP) method. For this aim, the recombinant vector pcDNA4/HisMax (pcDNA4-G) including BEFV G gene was transfected into Vero cells. Immunoperoxidase (IP) method was used to investigate the intracellular localization of G protein expression using the spesific monoclonal antibody for BEFV G protein. According to our results, the IP method is affordable, rapid and suitable detection method for screening of transfections and expression

___

  • Nandi S, Negi BS. Bovine ephemeral fever: A review. Comp Immunol Microb 1999; 22: 81-91.
  • Walker PJ, Byrne KA, Cybinski DH, Doolan DL, Wang YH. Proteins of bovine ephemeral fever virus. J Gen Virol 1991; 72: 67-74.
  • Walker PJ, Wang Y, Cowley JA, McWilliam SM, Prehaud CJ. Structural and antigenic analysis of the nucleoprotein of bovine ephemeral fever rhabdovirus. J Gen Virol 1994; 75: 1889-1899.
  • Girgin H, Yonguç AD, Akçora A, Aksak A. Türkiye'de ilk bovine ephemeral fever salgını. Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Enstitüsü Dergisi 1986; 5: 5-14.
  • Tonbak Ş, Berber E, Çabalar M. Türkiye'nin bazı bölgelerinde 2008 yılında görülen bovine ephemeral fever virüs enfeksiyonlarının polimeraz zincir reaksiyonuyla belirlenmesi. FÜ Sağ Bil Vet Derg 2013; 27: 35-37.
  • Tonbak S, Berber E, Yoruk MD, et al. A large-scale outbreak of bovine ephemeral fever in Turkey, 2012. J Vet Med Sci 2013; 75: 1511-4.
  • Oğuzoğlu TC, Ertürk A, Cizmeci SG, Koç BT, Akça Y. A report on bovine ephemeral fever virus in Turkey: Antigenic variations of different strains of EFV in the 1985 and 2012 outbreaks using partial glycoprotein gene sequences. Transbound Emerg Dis 2015; 62, e66-70.
  • Aziz-Boaron O, Klausner Z, Hasoksuz M, et al. Circulation of bovine ephemeral fever in the Middle East--strong evidence for transmission by winds and animal transport. Vet Microbiol 2012; 158: 300-307.
  • Kato T, Aizawa M, Takayoshi K, et al. Phylogenetic relationships of the G gene sequence of bovine ephemeral fever virus isolated in Japan, Taiwan and Australia. Vet Microbiol 2009; 137: 217-223.
  • Hertig C, Pye AD, Hyatt AD, et al. Vaccinia virus-expressed bovine ephemeral fever virus G but not G (NS) glycoprotein induces neutralizing antibodies and protects against experimental infection. J Gen Virol 1996; 77: 631-640.
  • Özdarendeli A, Tonbak Ş, Azkur AK, ve ark. Sığır vebası virusu rbok aşı suşu nükleoprotein ve matriks geninin invitro transkripsiyonu. FÜ Sağ Bil Vet Derg 2003; 17: 77- 80.
  • Bulut H, Bolat Y, Özdarendeli A, Doymaz MZ, Gürhan SI. Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) virus antijenlerinin lokalizasyonunun ımmunoperoksidaz boyama ile gösterimi. Tr J Vet Anim Sic 1998; 22: 267-271.
  • Zheng FY, Lin GZ, Qiu CQ, et al. Serological detection of bovine ephemeral fever virus using an indirect ELISA based on antigenic site G1 expressed in Pichia pastoris. Vet J 2010; 185: 211-215.
  • Zheng FY, Lin GZ, Qiu CQ, et al. Development and application of G1-ELISA for detection of antibodies against bovine ephemeral fever virus. Res Vet Sci 2009; 87: 211- 212.
  • Uren MF, Walker PJ, Zakrzewski H, St George TD, Byrne KA. Effective vaccination of cattle using the virion G protein of bovine ephemeral fever virus as an antigen. Vaccine 1994; 12: 845-850.
  • Green MR, Sambrook J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. 4nd Edition, New York: Cold Spring Harbor, 2012.
  • Patten CL, Glick BR, Pasternak J. Molecular Biotechnology: Principles and Applications of Recombinant DNA. Washington, D.C: ASM Press, 2009.
  • Brown T. Gene Cloning and DNA analysis: An introduction. Cambridge, MA: Blackwell Pub, 2006.
  • Chang MH, Chen CJ, Lai MS, et al. Universal hepatitis B vaccination in Taiwan and the incidence of hepatocellular carcinoma in children. Taiwan childhood hepatoma study group. The New England Journal of Medicine 1997; 336: 1855-1859.
  • Pironcheva GL, Russev G. Immunofluorescent study after transient transfection of myoblast cells with the plasmid PSV40-beta-globin. Cytobios 1996; 86: 243-6.
  • Christiane R, Christian P, Bianca T, et al. Development of a recombinant cell-based indirect immunofluorescence assay for the determination of autoantibodies against soluble liver antigen in autoimmune hepatitis. Clin Dev Immunol 2013; 24: 7-12.
Fırat Üniversitesi Sağlık Bilimleri Veteriner Dergisi-Cover
  • ISSN: 1308-9323
  • Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
  • Yayıncı: Prof.Dr. Mesut AKSAKAL
Sayıdaki Diğer Makaleler

Protective Effect of Ginkgo Biloba Extract 761 on Di-(2-ethylhexyl) Phthalate-Induced Testicular Toxicity in Prepubertal Rats

Mine YAMAN, Tuba PARLAK AK

Diyabet Oluşturulan Ratlarda Serum Apelin ve Chemerin Düzeyleri

Gonca OZAN, Hakan UFAT, Penbe Sema TEMİZER OZAN

Bovine Ephemeral Fever Virüsün Rekombinant G Proteininin İmmunoperoksidaz Metodu ile Belirlenmesi

Hasan ABAYLI, Şükrü TONBAK

Aseel Irkı Horoz ve Tavuklarda Larynx, Trachea ve Syrinx'inAnatomik ve Histolojik Yapısı

İlker ARICAN, Bestami YILMAZ, İsmail DEMİRCİOĞLU, Rahşan YILMAZ

Beç Tavuğu (Numida meleagridis) ve Hindi (Meleagridis gallapova) Splanchnocranium'u Üzerinde Karşılaştırmalı Makro-Anatomik ve Morfometrik İncelemeler

Ramazan İLGÜN

Vaşaklarda (Lynx lynx) Columna Vertebralis'i Oluşturan Omurların Makro-Anatomik Olarak İncelenmesi

Zaid Ender ÖZKAN, Sadık YILMAZ, Meryem KARAN, Saime Betül BAYGELDİ

2,3,7,8-Tetraklorodibenzo-p-dioksin ile Rat Beyin ve Kalp Dokusunda Oluşturulan Toksisite Üzerine Melatoninin Etkileri

Songül ÇERİBAŞI, Dilek ATEŞŞAHİN, Ahmet ATEŞŞAHİN

Yeme İlave Edilen Vitamin A, Beta karoten ve Astaksantinin Kerevit (Astacus leptodactylus, Esch. 1823)'lerin Kabuk Değiştirme Döneminde Etkileri

Özden BARIM ÖZ, Mustafa KARATEPE

Fasciola hepatica'nın Morfometrik ve Moleküler Analizi

Harun KAYA KESİK, Selin GELEN, Sami ŞİMŞEK

Fibrinli Pnömonili Oğlaklarda Mycoplasma Arginini ve Mannheimia Haemolytica Enfeksiyonu

Ömer KIZIL, Abdullah GAZİOĞLU, Hayati YÜKSEL