Haluk TESTERECİ, Hakkı İbrahim YÖRÜK, TAHİR KAHRAMAN, Suat EKİN, Hülya SAĞMANGİL

Fluoremetric determination of ampicillin in milk with precolumn derivatization by high performance liquid chromatography

Kolon öncesi derivatizasyonla sütle ampisilinin lluorometrik tayini yapıldı. Fluorometric ampisilinin separasyonu, C18 kolonu kullanılarak yüksek performanslı sıvı kromalografisi yardmuyle gerçekleştirildi. Mobil faz olarak iyi bir separasyon veren HClO4 + Metanol (55:45, v/v) seçildi. Deteksiyonlar eksitasyon 346 nnı ve emisyon 422 ran de yapıldı. Standart ampisilin ve ampisilin eklenmiş süt numuneleri %7 fonnaldchid'de çözündürülen 0.4 M sitrik asit solüsyonuyla derivatize edildi. Basit ekstraksiyon basamağı daha ileri temizlik gerektirmeden süt numunesinde başarıldı. Başka kirlilikler gözlenmedi. Derivatize ampisilinin fluorejenik özelliği UV detektör limitlerinden daha iyi olarak, en az 10 ng/ml yi ölçmeye izin verdi.Ampisilin ilave edilen sütten ampisilinin geri alınma oram % 98.5-112 bulundu. Bu metod basil ve süt numunelerinde ampisilin kalıntısını ölçmek için çok daha duyarlıdır.

Anahtar Kelimeler:

penisilinler, HPLC, ilaç kalıntıları, kalıntı, farmakoloji, ampisilin, süt, floresan

Yüksek performanslı sıvı kromatografisi ile sütte ampisilinin kolon öncesi derivatizasyonla fluorometrik tayini

Fluoremetric determination of ampicillin in milk with precolumn derivilization has been achieved . Separation of fluorometric ampicillin has been accomplished by means of High Performance Liquid Chromatography (HPLC)-using C18 column. Mobile phase has chosen as HClO4+ Methanol (55:45, v/v) which gave good separation. Detection was made at excitation as 346 ran and emissions as 422 ran. Standard ampicillin and milk samples added with ampicillin have been derivatized with 0.4 M citric acid solution that dissolved in 7% formaldehyde solution. Simple extraction step without further clean up has been accomplished with milk sample. No other interferences observed. Fluoregenic properties of derivatize ampicillin allowed to measure as low as 10 ng /ml that is much better than UV detection limit. Recovery of ampicillin from ampicillin added milk has been found as 98.5-112%. This method is simple and much more sensitive to measure ampicillin residue in milk sample.

Keywords: