Kalsiyum klorür metodu kullanılarak hazırlanmış olan Escherichia coli JM109'un transformasyon verimliliğini artıran bir metod geliştirildi. Transformasyon denemelerinde, vektör olarak, M13mpl8'den türetilmiş 8571 baz çifti uzunluğunda M13crpRF DNA kullanıldı. Hücreler farklı pH'lardaki 100mM kalsiyum klorür ile muamele edilerek hazırlandı. Kompetent hücrelerin transformasyon verimliliği, $CaCl_2$ solüsyonunun pH'sının düşürülmesiyle, $mu$ g vektör DNA'sı başına düşen plak sayısının artmasıyla arttı. Ayrıca, +4°C'de 24 saat muhafaza sonrasında, $CO_2$ - ile doyurulmuş $CaO_2$ kullanılarak hazırlanan kompetent hücreler, doyurulmamış $CaCl_2$ kullanılarak hazırlanan hücrelerinkinden % 50 daha fazla transformasyon verimliliğine sahipti, buna rağmen, genel anlamda bu muhafaza şeklinin transformasyon verimliliğini azalttığı gözlendi. Böylece pH'sı 4.6 olan $CO_2$ - ile doyurulmuş $CaCl_2$ , genellikle E. coli hücrelerinin transformasyon verimliliğini 6.3 kat daha artırmaktadır.

A strategy to optimize the efficiency of the transformation of Esherichia coli JM109 cells made competent using the calcium-chloride method was developed. 8571 bp M13crp RF DNA, derived from M13mp18, was used as a vector in the transformation experiments. The cells were treated with 100 mM calcium chloride at different pH values. The transformation efficiency of the competent cells was improved by decreasing the pH of the $CaCl_2$ solution and increasing the formation of plaques per ug vector. Moreover, after 24 h storage at +4°C, competent cells prepared with $CO_2$ -saturated $CaCl_2$ had a 50% greater transformation efficiency compared with cells prepared using non-saturated $CaCl_2$ , although, in absolute terms, this storage decreased the transformation efficiency overall. Thus, the use of $C0_2$ -saturated $CaCl_2$ at pH 4.6 generally increases the transformation efficiency of E. coli cells by a factor of up to 6.3.