Staphylococcus aureus suşlarında koagulaz testi için uygun sıcaklığın araştırılması

Amaç: Mikrobiyoloji laboratuvarında etüvün ısısıönemlidir. Bakterilerin üretilmesinde ve antimikrobiyalduyarlılığının saptanmasında genellikle önerilen etüvısısı 35±2 OC'dir. Bununla birlikte Staphylococcusaureus suşlarında doğru bir şekilde metisilindirencinin saptanmasında 35 OC'nin üzerinde etüvısısının uygun olmadığı, 35 OC'de metisilin direncinindoğru saptanamayacağı bilinmektedir. S. aureus'untanımlanmasında kullanılan tüp koagulaz testininyapılmasında önerilen etüv ısısı farklı kaynaklarda35 OC, 37 OC ve 35 OC - 37 OC olarak belirtilmiştir.Bu çalışmada S. aureus suşlarında tüp koagulaz testiiçin en uygun etüv ısısı araştırılması amaçlanmıştır.Yöntemler: Bu çalışma hastanemiz EnfeksiyonHastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji Laboratuvarındayapılmıştır. Bakterilerin tanımlanmasında VITEK 2otomatize sistem kullanılmıştır. Çeşitli klinik örneklerdenizole edilen 110 S. aureus suşu çalışmaya dahil edilmiştir.Tüp koagülaz testi için tavşan plazması kullanılmış, testüretici firma önerileri doğrultusunda yapılmıştır. Herbakteri için iki ayrı koagulaz tüpü hazırlanmış, tüpler ayrıayrı 35 OC ve 37 OC'ye ayarlanmış iki farklı etüvde inkübeedilmiştir. Birinci, ikinci, üçüncü, dördüncü ve 24. saatinsonunda tüpler pıhtı oluşumu için değerlendirilmiştir.Sonuçlar üç grupta değerlendirilmiştir.Grup 1: Pıhtı oluşumu gözlenmeyenGrup 2: Zayıf pıhtı oluşumu gözlenenGrup 3: Güçlü pıhtı oluşumu gözlenenVerilerin analizi için SPSS 15.0 programı vegrupların karşılaştırılması için de McNemar Bowker testikullanılmıştır.Bulgular: Suşların hepsi her iki etüv derecesinde detest süresince pıhtı oluşturmuştur. Bakterilerin zamanagöre 35 OC ve 37 OC'de pıhtı oluşturma durumlarıdeğerlendirilmiştir. Sonuçların karşılaştırılmasıamacıyla yapılan istatistiksel değerlendirmedeinkubasyon sıcaklıkları ve gruplar arasında anlamlı farksaptanmamıştır.Sonuç: Çalışmanın sonuçlarına dayanarak hem35 OC ve hem de 37 OC'nin S. aureus suşlarında koagulazsaptanmasında uygun olduğu bulunmuştur.

Investigation of optimum temperature for coagulase test in Stahylococcus aureus strains

Objective: Temperature of the incubator is important in microbiology laboratories. The recommended temperature is generally 35±2 OC for the detection of growing and antimicrobial susceptibility of bacteria. Nevertheless it is known that temperature over 35 OC is inappropriate for detecting methicillin resistance in Staphylococcus aureus. In different references, the optimum temperature for tube coagulase test used for differentiating S. aureus from other staphylococci is recommended as 35 OC, 37 OC, and 35 OC - 37 OC. In this study it was aimed to investigate the most appropriate incubator temperature for tube coagulase test in S. aureus strains.Methods: The study was conducted in Infectious Diseases Laboratory of our hospital. VITEK 2 automated system was used for identification of bacteria. Totally 110 S. aureus strains isolated from various clinical samples were included in the study. Rabbit plasma was used for tube coagulase test and the test was performed according to the manufacturer's instructions. Two identical sets of tubes were prepared for each strain and each tube was incubated at 35 OC and 37 OC in different incubators. All the tubes were read at the end of first, second, third, fourth and 24th hour for clot formation. Results were evaluated in three groups.Group 1: No clot formationGroup 2: Weak clot formation Group 3: Strong clot formation SPSS 15.0 program was used for data analysis and McNemar Bowker test was used for comparing groupsResults: All of the strains had clot formation atboth of the incubator temperatures during test period.The clot formation degree of strains were examinedat 35 OC and 37 OC according to time. The statisticalanalysis showed no significant differences betweenincubation temperatures and groups.Conclusion: According to the results obtained inthis study, both 35 OC and 37 OC was found appropriatefor determining coagulase positivity in S. aureus.

PDF

___

1. Coagulase test. National Standart Method, Standards Unit, Department for Evaluations, Standards and Training, 2010; 6-11.
2. Kateete DP, Kimani CN, Katabazi FA, Okeng A, Okee MS, Nanteza A, et al. Identification of Staphylococcus aureus: DNase and Mannitol salt agar improve the efficiency of the tube coagulase test. Ann Clin Microbiol Antimicrob, 2010; 9(1): 23-30.
3. Kloos WE, Bannerman TL. Staphylococcus and Micrococcus. In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH eds. Manual of Clinical Microbiology. 7th edition. Washington, ASM press, 2005: 264-82.
4. Forbes BA, Sahm DF, Weissfeld AS. Bailey and Scott's Diagnostic Microbiology. Twelfth edition. St. Louis: Mosby Elsevier, 2007.
5. Bilgehan H. Klinik Mikrobiyolojik Tanı. 5. Baskı. İzmir: Barış Yayınları Tıp Fakülteleri Kitabevi, 2009.
6. Thornsberry C, Caruthers JQ, Baker CN. Effect of tempereture on the in vitro susceptibility of Staphylococcus aureus to penicillinase-resistant penicillins. Antimicrob Agents Chemother, 1973; 4 (3): 263-9.
7. Clinical Laboratory Standards Institute. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Third Informational Supplement. M100-S23, CLSI, Wayne, PA, (2013).
8. Rubin JE, Bayly MK, Chirino-Trejo M. Comparison of dog and rabbit plasmas in the tube coagulase test for Staphylococcus aureus. J Vet Diagn Invest, 2010; 22(5): 770-1.
9. Carretto E, Bardaro, Russello G, Mirra M, Zuelli C, Barbarini D. Comparison of the Staphylococcus Quick FISH BC Test with the Tube Coagulase Test Performed on Positive Blood Cultures for Evaluation and Application in a Clinical Routine Setting. J Clin Microbiol, 2013; 51(1): 131-5.
10. Cooke RPD, Jenkins CT. Comparison of commercial slide agglutination kits with a tube coagulase test for the rapid identification of Staphylococcus aureus from blood culture. J Clin Pathol, 1997; 50(2): 164-6.
11. Güldaş N, Bayrakal V, Bahar İ. H. Gentamisin Etkisi Altındaki Staphylococcus aureus Suşlarının Biyofilm ve Koagülaz Yanıtları ile Mikroçevre İlişkisinin Değerlendirilmesi. Mikrobiyol Bul, 2013; 47(1): 19-26.
12. Roberts J, Gaston MA. Protein A and coagulase expression in epidemic and non-epidemic Staphylococcus aureus. J Clin Pathol, 1987; 40(8): 837-40.
13. Dickson JI, Marples RR. Coagulase production by strains of Staphylococcus aureus of differing resistance characters: a comparison of two traditional methods with a latex agglutination system detecting both clumping factor and protein A. J Clin Pathol, 1986; 39(4): 371-5.