Gram negatif bakterilerde GSBL üretiminin üç farklı yöntemle araştırılması ve antibiyotik direnç oranları

Amaç: Çalışmada genişlemiş spektrumlu betalaktamaz (GSBL) üreten bakterilerin doğru ve hızlı tanımlanması için kromojenik agarın etkinliğini test etmek ve GSBL ürettiği tespit edilen 105 bakteride antibiyotik direnç oranlarının tespit edilmesi amaçlanmıştır. Yöntemler: Kombine disk yöntemi, E test yöntemi ve kromojenik agar ile GSBL üretimi tespit edilmiştir. Ayrıca bu şuşların 21 antibiyotiğe karşı duyarlılıkları CLSI (Clinical Laboratory Standards Institute) kriterlerine göre çalışılmıştır. Duyarlı kabul edilen zon çapları değerlendirilmiş, orta duyarlı suşlar dirençli kabul edilmiştir. İstatistiksel değerlendirme Fisher's ki-kare testiyle yapılmıştır.Bulgular: Kombine disk yöntemi ile 105 (81 tanesi Escherichia coli ve 24 tanesi Klebsiella spp.), E test ile 96 ve kromojenik agar ile 99 suşun GSBL ürettiği tespit edilmiştir. Kromojenik agar yöntemi ile GSBL tespitinin duyarlılığı %94,8. GSBL üreten suşların dirençli kabul edildiği sefuroksim, sefazolin ve sefotaksim'e tüm suşların dirençli olduğu görülmüştür. Beta-laktam/beta-laktamaz inhibitörü kombinasyonları içerisinde ampisilin-sulbaktam direncinin (%75,2) yüksek olduğu bu grupta en az dirençli antibiyotiklerin piperasilintazobaktam (%31,4) ve sefoperazon -sulbaktam (%32,4) olduğu tespit edilmiştir. Karbapenemlere (imipenem, meropenem ve ertapenem) dirençli toplam 8 (%7,6) suş tespit edilmiş olup en düşük direnç oranı karbapenem grubu antibiyotiklerde saptanmıştır. Beta-laktam/betalaktamaz inhibitörü kombinasyonları, aminoglikozidler, trimetoprim - sülfametoksazol ve kloramfenikole Klebsiella spp. suşlarının E. coli'den daha dirençli olduğu fakat kinolonlara E. coli suşlarının daha dirençli olduğu tespit edilmiştir (p< 0.05). Sonuç: GSBL tespitinde kromojenik agar kullanımının bir avantaj sağlamadığı, GSBL üreten suşlarda en düşük direnç oranına sahip antibiyotiklerin karbapenemler olduğu, GSBL üreten bakterilerin türlerinin direnç oranlarını belirlemede ve tedavide kullanılacak antibiyotiğin seçiminde önemli olduğu görülmüştür.

Investigation of three different methods for detection of ESBL production and antibiotic resistance percentage of ESBL producing Gram negative bacteria

Objective: In this study, it was aimed to evaluate the efficacy of chromogenic agar for rapid and accurate identification of bacteria producing extended spectrum beta-lactamase (ESBL) and to investigate the antibiotic resistance rates of 105 bacteria that were determined to produce ESBL.Methods: ESBL production was investigated using combined disc method, E-test and chromogenic agar. Additionally, susceptibility patterns of these strains to 21 antibiotics were studied according to the criteria of CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute). Zone diameters categorized as susceptible were evaluated, and strains showing intermediate susceptibility were considered as resistant. Fisher's chi-square test was used in statistical analysis.Results: A hundred and five strains (81 Escherichia coli, 24 Klebsiella spp.) were found to produce ESBL by combined disc method, while 96 strains were found to produce ESBL by E-test and 99 strains by chromogenic agar. The sensitivity and positive predictive value of chromogenic agar for ESBL production was 94.8% and 91.9%, respectively. All strains were found to be resistant to cefuroxime, cefazolin and cefotaxime, the antibiotics that ESBL producing strains are considered to be resistant to. Among beta-lactam/beta-lactamase inhibitor combinations, the highest resistance was meropenem ve ertapenem) dirençli toplam 8 (%7,6) suş tespit edilmiş olup en düşük direnç oranı karbapenem grubu antibiyotiklerde saptanmıştır. Beta-laktam/betalaktamaz inhibitörü kombinasyonları, aminoglikozidler, trimetoprim - sülfametoksazol ve kloramfenikole Klebsiella spp. suşlarının E. coli'den daha dirençli olduğu fakat kinolonlara E. coli suşlarının daha dirençli olduğu tespit edilmiştir (p< 0.05). Sonuç: GSBL tespitinde kromojenik agar kullanımının bir avantaj sağlamadığı, GSBL üreten suşlarda en düşük direnç oranına sahip antibiyotiklerin karbapenemler olduğu, GSBL üreten bakterilerin türlerinin direnç oranlarını belirlemede ve tedavide kullanılacak antibiyotiğin seçiminde önemli olduğu görülmüştür.Conclusion: It was observed that the use of chromogenic agar has no advantage in detecting ESBL enzymes, the lowest resistance rate in ESBL producing strains was to carbapenems, and the species of ESBL producing bacteria was important in determining the resistance rates and selection of the appropriate antibiotic for treatment.

PDF

___

1. Paterson DL, Bonomo RA. Extended-spectrum betalactamases: a clinical update. Clin Microbiol Rev, 2005; 18(4): 657-86.
2. Sercan U, Hakan L, Dilek A. Önemli ve sorunlu gram negatif bakteri infeksiyonları. Bilimsel Tıp Yayınevi, 2004; 85-94.
3. Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. 24th Informational Supplement. Document M100-S24, 2014. CLSI, Wayne, Pa.
4. Michael H, Brice Mouttet and Guido VB. Consequences of revised CLSI and EUCAST guidelines for antibiotic susceptibility patterns of ESBL- and AmpC b-lactamase-producing clinical Enterobacteriaceae isolates. J Antimicrob Chemother, 2013; 68: 2092-2098.
5. Seniha SA, Asuman I, Simin C, Ayse NO, Naz C, Seyfi CO, Sebahat A. Gram-negative bacilli causing infections in an intensive care unit of a tertiary care hospital in Istanbul, Turkey J Infect Dev Ctries, 2014; 8(5): 597-604.
6. Kaiser DM, Castanheira M, Jones RN, Tenover F, Lynfi R. Trends in Klebsiella pneumoniae carbapenemasepositive K. pneumoniae in US hospitals: report from the 2007-2009 SENTRY Antimicrobial Surveillance Program. Diagn Microbiol Infect Dis, 2013; 76(3): 356-60.
7. Özgen KE, Hatice AU, Alper E, Barış B, Burçin Ş, Gülşen H. İnvazif enfeksiyonlara neden olan GSBL pozitif Enterobacteriaceae İzolatlarında Karbapenem Direnci. Mikrobiyol Bul, 2014; 48(1): 59-69.
8. Réglier-Poupet H, Naas T, Carrer A, Cady A, Adam JM, Fortineau N, Poyart C, Nordmann P. Performance of chromID ESBL, a chromogenic medium for detection of Enterobacteriaceae producing extended-spectrum beta-lactamases. J Med Microbiol, 2008; 57(3): 310-5.