Bu araştırmada alabalık serumlarında VHS ve IPN'e karşı oluşan antikorları belirlemek için kompetitif enzim linked immunoassay (ELISA) geiştirilmeye çalışıldı. Mikroplaklar tavşan anti viral hemorajik septisemi virusu (VHSV) immunoglobulin G (Ig G) veya tavşan anti infesziyoz pankreatik nekrozis virusu (IPNV) Ig G ile kaplandı. Sonra doku kültürü ürünü VHSV veya IPNV antijeni ile inkube edildi. Değişik dilusyonlardaki pozitif balık serumlanyla inkubasyondan sonra alkalin fosfataz (AP) ile işaretlenmiş tavşan anti virus Ig G ilave edildi. Substrat (p-nitrofenil fosfat) ilavesinden sonra oluşan renk 405 nm dalga boyunda okundu. Kompetitif ELISA denemelerinde, test titrasyonu için balık serumu yerine üç farklı konsantrasyonda (0.1, 1, 10 ug/ml) tavşan anti virus Ig G kullanıldı. Yeterli bir inhibisyon elde edildi. Fakat pozitif balık serumları ile başarı elde edilemedi. Olası neden olarak, balık serumu ile tavşan Ig G'leri arasındaki avidite veya affinite farklılıkları düşünüldü.

The problem in detecting serum infectious pancreatic necrosis (IPN) and viral haemorrhagic septicaemia (VHS) antibodies of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792) by competitive ELISA. An attempt was made to develop a competitive enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of serum antibody levels against VHS and IPN in rainbow trout. The tests were carried out by coating the microplates by rabbit anti viral haemorrhagic septicaemia virus (VHSV) immunoglobulin G (Ig G) or infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) Ig G. The coated microplate were incubated with tissue culture harvest of VHSV or IPNV as antigen. After the incubation of different dilutions of positive fish sera, alkaline phosphatase (AP) labeled rabbit antivirus Ig G was added. Developed colour was red after the addition of substrate (p-nitrophenyl phosphate) at 405 nm wave lenght. Three different concentration of (0.1, 1 and 10 ug/ml) rabbit anti viruses Ig G were used for checkerboard titration instead of positive fish sera, for to setup the competitive ELISA. Enough inhibition were obtained with rabbit anti VHSV and IPNV Ig G's to setup the ELISA. However the result of the tests with positive fish sera was failed, Possible reason was thought to be affinity or arvidity problems between fish sera and rabbit Ig G's.