Özden VEZİR, Barlas Naim AYTAÇOĞLU, Nehir SUCU, Savaş AKTAŞ, Lokman AYAZ

Lipoteikoik asitin ratlarda kronik bacak iskemisi üzerine etkisi

Amaç: Kronik arteryel iskemi tedavisinde cerrahi ve invazif girişimler yapılmaktayken bu yöntemlerin yetersiz kaldığı durumlarda tedavi seçeneklerinden biri terapötik anjiyogenezistir. Çalışmamızda, terapötik anjiyogeneziste yeni ve kontrollü bir süreç oluşturmak amacıyla, arka bacaklarında kronik arteryel iskemi oluşturulan ratlara, intramusküler lipoteikoik asit enjeksiyonu yapıldı ve anjiyogenezis süreci değerlendirildi. Yöntem: Gruplardaki rat sayısı istatistiksel yöntemle belirlenerekherbirinde onar rat bulunan toplam dört grup oluşturuldu. Kontrol grubuna herhangi bir işlem uygulanmadı, iskemi grubuna kronik iskemi modeli oluşturuldu, serum fizyolojik grubuna iskemi oluşturulduktan sonra serum fizyolojik enjeksiyonu yapıldı, lipoteikoik asit grubuna iskemi oluşturulmasını takiben intramusküler lipoteikoik asit enjeksiyonu yapıldı. Ratlar laboratuvar ortamında otuz gün boyunca vital bulgular ve enfeksiyon açısından takip edildikten sonra anestezi verilmesini takiben ekssanguinasyon yöntemiyle sakrifiye edildi, toraks ön duvarı açıldı, kalp içerisinden enjektör yardımıyla 5 cc kan alınarak biyokimyasal analizler yapıldı, toplanan kan örneklerinde proanjiyogenik faktörlerden vasküler endotel büyüme faktörü ve anjiopoietin-1, anti-anjiyogenik faktörlerden endostatin ve anjiostatinin serumdaki düzeyleri ölçüldü. Ratların arka bacaklarından gastroknemius kasları çıkarılarak histopatolojik analizler yapıldı, alınan kas dokusu örnekleri ışık ve elektron mikroskobisi ile değerlendirildi. Bulgular: Yapılan değerlendirmeler sonucunda, lipoteikoik asit grubunda diğer gruplara göre yeni oluşan kapillerite sayısı, anjiopoietin-1 düzeyi, endostatin ve anjiostatin bakımından anlamlı derecede artış tespit edildi (p<0.05). Sonuç: Bulgularımız, kronik iskemi modelinde lipoteikoik asitin anjiyogenezisi etkin bir biçimde sağladığını, aynı zamanda proanjiyogenik ve anti-anjiyogenik sitokinlerin her ikisinde birden artışa yol açarak anjiyogenezisin kontrollü bir süreçte geliştiğini telkin etmektedir.

Anahtar Kelimeler:

Anjiyogenezis, kronik iskemi, lipoteichoic acid

PDF

___

1. Sasaki K, Murohara T, Ikeda H, Sugaya T, Shimada T, Shintani S, Imaizumi T. Evidence for the importance of angiotensin II type 1 receptor in ischemia-induced angiogenesis. J Clin Invest 2002;109:603-611.
2. Sunderkotter C, Steinbrink K, Goebeler M, Bhardwaj R, Sorg C. Macrophages and angiogenesis. J Leukoc Biol 1994;55:410-422.
3. Alkan ML, Beachey EH. Excretion of lipoteichoic acid by group A streptococci. Influence of penicillin on excretion and loss of ability to adhere to human oral mucosal cells. J Clin Invest 1978;61(3):671–677.
4. Ginsburg I . Role of lipoteichoic acid in infection and inflammation. Lancet Infect Dis 2002;2:171–179.
5. Morath S, Wendel A, Hartung T. Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy. Identification of Lipoteichoic Acid as a Major Cytokine-Stimulatory Principle of Staphylococcus aureus. Abstr Intersci Conf Antimicrob Agents Chemother Intersci Conf Antimicrob Agents Chemother 1999;29(39):73.
6. Opitz B, Schroder NW, Spreitzer I, Michelsen KS, Kirschning CJ, Hallatschek W. Toll-like receptor-2 mediates Treponema glycolipid and lipoteichoic acid-induced NF-kappaB translocation. J Biol Chem 2001;276(25):22041-22047.
7. Keller R, Fischer W, Keist R, Bassetti S. Macrophage response to bacteria: induction of marked secretory and cellular activities by lipoteichoic acids. Infect Immun 1992;60:3664-3672.
8. Schwandner R, Dziarski R, Wesche H, Rothe M, Kirschning CJ. Peptidoglycan and Lipoteichoic Acid induced Cell Activation Is Mediated by Toll-like Receptor 2. J Biol Chem 1999;274(25):17406-17409.
9. Auguet M, Lonchampt MO, Delaflotte S, Goulin-Schulz J, Chabrier PE, Braquet P. Induction of nitric oxide synthase by lipoteichoic acid from Staphylococcus aureus in vascular smooth muscle cells. FEBS Lett 1992;297:183–185.
10. Lın CH, Sheu SY, Lee HM, Ho YS, Lee WS, Ko WC, Sheu JR. Involvement of protein kinase C-γ in IL-1β-induced cyclooxygenase-2 expression in human pulmonary epithelial cells. Mol Pharmacol 2000;57:36–43.
11. Cooke JP. NO and angiogenesis. Atheroscler Suppl 2003;4(4):53-60.
12. Yang Z, von Ballmoos MW, Diehm N, Baumgartner I, Kalka C, Di Santo S. Call for a reference model of chronic hind limb ischemia to investigate therapeutic angiogenesis. Vascul Pharmacol 2009;51(4):268-274.
13. Kim MS, Lee CS, Hur J, Cho HJ, Jun SI, Kim TY, Lee SW, Suh JW, Park KW, Lee HY, Kang HJ, Lee DS, Koh GY, Nakagami H, Morishita R, Park YB, Kim HS. Priming with angiopoietin-1 augments the vasculogenic potential of the peripheral blood stem cells mobilized with granulocyte colony-stimulating factor through a novel Tie2/Ets-1 pathway. Circulation 2009;120(22):2240-2250.
14. Shyu KG, Manor O, Magner M, Yancopoulos GD, Isner JM. Direct Intramuscular Injection of plasmid DNA encoding angiopoietin-1 but not angiopoietin-2 augments revascularization in the rabbit ischemic hindlimb. Circulation 1998;98: 2081-2087.
15. Nykänen AI, Krebs R, Saaristo A, Turunen P, Alitalo K, Ylä-Herttuala S, Koskinen PK, Lemström KB. Angiopoietin-1 protects against the development of cardiac allograft arteriosclerosis. Circulation 2003;107:1308-1314.
16. Liekens S, De Clercq E, Neyts J. Angiogenesis: regulators and clinical applications. Biochem Pharmacol 2001;61:253-270.
17. Jakeman LB, Winer J, Bennet GL, Altar CA, Ferrera N. Binding sites for vascular endothelial growth factor are localized on endothelial cells in adult rat tissues. J Clin Invest 1992;89:244-253.
18. Sato T, El-Assal ON, Ono T, Yamanoi A, Dhar DK, Nagasue N. Sinusoidal endothelial cell proliferation and expression of angiopoietin/Tie family in regenerating rat liver. J Hepatol 2001;34:690-698.
19. Merino G, Fujino Y, Hanashiro RK. Lipoteichoic acid as an inducer of acute uveitis in the rat. IOVS 1998;39(7):1251-1256.