Kars Yöresi sığırlarından alınan süt ve vajinal sıvap örneklerinden Listeria türlerinin araştırılması

Bu çalışmada, Kars merkez ve Selim ilçesine bağlı köylerde atık yaptığı bilinen sığır sürülerinde bulunan 250 inekten alınan süt ve vajinal sıvap örnekleri olmak üzere toplam 500 örnek Listeria cinsi bakteriler yönünden kültürel olarak değerlendirildi. Amerikan Gıda ve İlaç İdaresi (FDA)’nın bildirdiği yöntem ile yapılan izolasyon çalışmasında, Listeria Enrichment Broth (LEB) ve Listeria Selective Agar (LSA) kullanılmış, süt örneklerinin 2’sinden (%0.8) L. monocytogenes izole edilirken, vajinal sıvap örneklerinin 14’ünden (%5.6) Listeria spp. izole edilmiştir. Vajinal sıvap örneklerinden izole edilen 14 Listeria izolatının 7’si (%2.8) L. monocytogenes, 3’ü (%1.2) L. welshimeri, 2’si (%0.8) L. seeligeri ve 2’si de (%0.8) L. innocua olarak identifiye edilmiştir. İzole edilen 10 (%10.4) Listeria izolatı, atık yaptığı bilinen 96 inekten elde edilmiştir. İzolatlara uygulanan iap genini hedefleyen PCR işleminde 16 izolattan 5 tanesinde pozitif sonuç elde edildi.

Anahtar Kelimeler:

Listeria welshimeri, Listeria seeligeri, Listeria monocytogenes, sığır, vajina, süt, listerioz, genler, gen ifadesi, epidemiyoloji, epidemiyolojik araştırmalar, hastalık tetkiki, hastalık yaygınlığı, teşhis, inek, bakteriyel hastalıklar, yavru atma, Türkiye, Kars

Investigation of Listeria species isolated from milk and vaginal swab samples of cows in the province of Kars, Turkey

In this study, a total of 500 samples of milk and vaginal swabs from 250 cows from herds with a recent history of abortion, from villages administered by the city of Kars and the town of Selim, were used for culture isolation of Listeria. The isolation was performed by the method described by Food and Drug Administration (FDA) method, using Listeria Enrichment Broth (LEB) and Listeria Selective Agar (LSA). Based on the results of isolation and identification, L. monocytogenes was present in only two of the milk samples (0.8%) while Listeria spp. were isolated from 14 (5.6%) of the vaginal swab samples. Among those 14 isolates, seven (2.8%), three (1.2%), two (0.8%) and two (0.8%) were identified as L. monocytogenes, L. welshimeri, L. seeligeri and L. innocua, respectively. Ten Listeria isolates were originated from 96 cattle with the history of abortion. Five out of 16 isolates were found to be positive by PCR for detecting iap gene.

Keywords:

Listeria welshimeri, Listeria seeligeri, Listeria monocytogenes, cattle, vagina, milk, listeriosis, genes, gene expression, epidemiology, epidemiological surveys, disease surveys, disease prevalence, diagnosis, cows, bacterial diseases, abortion, Turkey, Kars,

PDF

___

1. Arda G: Süt ve süt ürünlerinde Listeria varlığının araştırılması. Uzmanlık Tezi, Genelkurmay Başkanlığı, İstanbul, 1994.
2. Ekici K, İşleyici Ö, Sağun E: Süt ve süt ürünlerinde Listeria monocytogenes varlığı. YYÜ Vet Fak Derg, 15 (1-2): 97-101, 2004.
3. George SM, Lund BM, Brocklehurst TF: The effect of pH and temperature on initiation of growth of Listeria monocytogenes. Letters in Applied Microbiology, 6, 153-156, 1988.
4. Lovett J: Taxonomy and general characteristics of Listeria spp. In, Miller AJ, Smith JL, Somkuti GA (Eds): Foodborne Listeriosis. Society for Industrial Microbiology. Chapter: 3, pp. 9-12, Elsevier Science Pub, Newyork, 1990.
5. Schuchat A, Swaminathan B, Broome CV: Epidemiology of human listeriosis. Clin Microbiol Rev, 4 (2): 169-183, 1991.
6. Seeliger HPR, Jones D: Genus Listeria Pirie 1940. In, Sneath PAH, Mair NS, Sharpe ME, Holt JG (Eds): Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology. Vol 2., pp. 1235-1245, The Williams and Wilkins Co, Baltimore, 1986.
7. Doyle ME: Virulence Characteristics of Listeria monocytogenes. pp. 1-13, Food Research Institute, University of Wisconsin, Madison, 2001.
8. Doyle MP, Schoeni JL: Selective-Enrichment Procedure for isolation of Listeria monocytogenes from fecal and biologic specimens. Appl Environ Microbiol, 51 (5): 1127-1129, 1986.
9. Ertaş HB: Elazığ bölgesinde koyun ve keçi sütlerinden Listeria türlerinin izolasyonu. Doktora Tezi, Fırat Üniversitesi, Elazığ. 1997.
10. Hayes PS, Graves LM, Ajello GW, Swaminathan B, Weaver RE, Wenger JD, Schuchat A, Broome CV and Listeria Study Group: Comparison of Cold Enrichment and U.S. Department of Agriculture Methods for isolating Listeria monocytogenes from naturally contaminated food. Appl Environ Microbiol, 57 (8): 2109-2113, 1991.
11. Ayaz ND, Erol İ: Listeria monocytogenes’in önemi ve virülens faktörleri. http://www.kku.edu.tr. Erişim tarihi: 15.01.2008.
12. Gellin BG, Broome CV: Listeriosis. J Am Med Assoc, 261 (9): 1313-1320, 1989.
13. Gray ML: Epidemiological aspects of Listeriosis. Am J Public Health Nations Health, 53, 554-563, 1963.
14. Gray ML, Killinger AH: Listeria monocytogenes and listeric infections. Bacteriol Rev, 30, 309-382, 1966.
15. Picoux JB: Ovine listeriosis. Small Ruminant Research, 76, 12-20, 2008.
16. Seeliger HPR: Modern taxonomy of the Listeria group relationship to its pathogenicity. Clin Invest Med, 7 (4): 217-221, 1984.
17. Seeliger HPR: Listeriosis-History and Actual Developments. Infection, 16 (Suppl. 2): 80-84, 1988.
18. Kılınç B: Su ürünlerinde Listeria monocytogenes. EÜ Su Ürünleri Dergisi, 18 (3-4): 565-574, 2001.
19. Pini PN, Gilbert RJ: A comparison of two procedures for the isolation of Listeria monocytogenes from raw chickens and soft cheeses. Int J Food Microbiol, 7, 331-337, 1988.
20. Parihar VS, Barbuddhe SB, Danielsson-Tham ML, Tham W: Isolation and characterization of Listeria species from tropical seafoods. Food Control, 19, 566-569, 2008.
21. Gün H: İstanbul ve yöresindeki sağlıklı ineklerin sütlerinde Listeria türlerinin izolasyon, identifikasyon ve patojenitesi üzerine araştırmalar. Doktora Tezi, İstanbul Üniversitesi, İstanbul. 1994.
22. Gahan CGM, Hill C: Gastrointestinal phase of Listeria monocytogenes infection. J Appl Microbiol, 98, 1345-53, 2005.
23. Anonim: İsolation and identification of Listeria monocytogenes from red meat, poultry, egg, and environmental samples. Laboratory Guide-book Notice of Change, 2006. http://www.fsis.usda.gov/PDF/MLG_8_05.pdf. Accessed: 17.01.2008.
24. Anonim: İsolation and identification of Listeria monocytogenes from red meat, poultry, egg, and environmental samples. http://www.fsis.usda.gov/PDF/MLG_8_07.pdf. Laboratory Guidebook Notice of Change, 2009. Accessed: 28.10.2009.
25. Anonim: Listeria monocytogenes. http://www.mikrobiyoloji.org. Erişim tarihi: 16.01.2008.
26. Anonim: Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals, 5th ed., 2004. http://www.oie.int/eng/normes/mmanual. Accessed: 07.12.2007.
27. Aktepe OC: Ülkemizde Listeriozun insanlardaki durumu. I. Ulusal Zoonoz Kongresi, Erzurum, s. 61, 3-6 Aralık 2007.
28. Erol İ: Gıda Hijyeni ve Mikrobiyolojisi Kitabı. s. 126-134, Pozitif Matbaacılık, Ankara, 2007.
29. Lorber B: Listeriosis. Clin Infect Dis, 24, 1-11, 1997.
30. Anonim: Listeria monocytogenes and Listeriosis. Kenneth Todar University of Wisconsin-madison Department of Bacteriology. Todar’s Online Textbook of Bacteriology. 2008. http://www.textbookof bacteriology.net/Listeria.html. Accessed: 01.05.2008.
31. Erdoğan HM: An epidemiological study of listeriosis in dairy cattle. PhD Thesis, Bristol Universty, Bristol, UK. 1998.
32. Erdoğan HM, Gökçe G, Gökçe Hİ, Kırmızıgül AH, Güneş V, Sural E, Yılmaz K: Kars Yöresi’ndeki sığırlarda Listeria monocytogenes infeksiyonlarının ELISA yöntemi ile araştırılması. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 5 (1): 43-46, 1999.
33. Güven A: Elazığ ilinde tüketime sunulan et ve bazı et ürünlerinde Listeria türlerinin araştırılması. Doktora Tezi, Fırat Üniversitesi, Elazığ, 1994.
34. Hasöksüz M, Ilgaz A: Marmara Bölgesindeki sağlam koyunların kan serumlarında ELISA yöntemi ile Listeria monocytogenes’e karşı oluşan antikorların saptanması ve listeriosis üzerinde etiyolojik-epizootiolojik çalışmalar. İstanbul Üniv Vet Fak Derg, 26, 157-174, 2000.
35. İkiz S: Listeriozun Laboratuvar tanısı. I. Ulusal Zoonoz Kongresi, Erzurum, s. 62-64, 3-6 Aralık 2007.
36. Kennerman E, Erdoğan HM, Şentürk S, Gölcü E: Bursa bölgesindeki koyunlarda Listeriosisin ELISA ile serolojik tanısı. Vet Cerrahi Derg, 6 (3-4): 22-25, 2000.
37. Donnelly CW, Baigent GJ: Method for flow cytometric detection of Listeria monocytogenes in milk. Appl Environ Microbiol, 52 (4): 689-695, 1986.
38. Evanson DJ, Klatt MJ, Donlevy TP, Flowers RS: Agar-based 24-H Method for presumptive identification of Listeria monocytogenes. J Food Prot, 54 (5): 370-371, 1991.
39. Bubert A, Hein I, Rauch M, Lehner A, Yoon B, Goebel W, Wagner M: Detection and differentiation of Listeria spp. by a single reaction based on multiplex PCR. Appl Environ Microbiol, 65 (10): 4688-4692, 1999.
40. Bubert A, Köhler S, Goebel W: The homologous and heterologous regions within the iap gene allow genus and species-specific identification of Listeria spp. by polymerase chain reaction. Appl Environ Microbiol, 58 (8): 2625-2632, 1992.
41. Holko I, Urbanova J, Kantikova M, Pastorova K, Kmet V: PCR detection of Listeria monocytogenes in milk and milk products and differentiation of suspect isolates. Acta Vet Brno, 71, 125-131, 2002.
42. Anonim: Kars Tarım İl Müdürlüğü Hayvan Sağlığı Şube Müdürlüğü, 2009 yılı hayvan mevcutları verileri. http://www.karstarim.gov.tr/. Erişim tarihi: 01.10.2009.
43. Anonim: Türkiye İstatistik Kurumu (TÜİK): Büyükbaş hayvan sayıları. http://www.tuik.gov.tr/VeriBilgi.do?tb_id=46&ust_id=13. Erişim tarihi: 01.10.2009.
44. Post DE: Food-borne Pathogens. Monograph Number 2 (Listeria). pp. 3-25, Oxoid, Basingstoke, Hampshire, England, 1997.
45. Gorski L: Identification adn detection. Pheotypic identification. In, Liu D (Ed): Handbook of Listeria monocytogenes. pp. 139-168, CRC Press, Boca Raton, Florida, USA. 2008.
46. Warburton DW, Farber JM, Armstrong A, Caldeira R, Hunt T, Messier S, Plante R, Tiwari NP, Vinet J: A comparative study of the ‘FDA’ and ‘USDA’ methods for the detection of Listeria monocytogenes in foods. Int J Food Microbiol, 13, 105-118, 1991.
47. Sambrook J, Russell D: Molecular cloning: A laboratory manual. Third ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, America. 2001.
48. Kennerman E, Babür C, Kılıç S: Determination of seroprevalence of Listeria monocytogenes antibodies in cattle in Bursa province of Turkey. Uludağ Univ Vet Fak Derg, 24, 95-98, 2005.
49. Abay S, Aydın F: Sağlıklı sığırların dışkılarından Listeria spp. izolasyon ve identifikasyonu. Erciyes Üniversitesi Sağlık Bilimleri Dergisi, 14 (3): 191-197, 2005.
50. Şahin M, Beytut E: Abortions in sheep due to Listeria ivanovii in the Kars region. Turk J Vet Anim Sci, 30, 503-506, 2006.
51. Rawool DB, Malik SVS, Shakuntala I, Sahare AM, Barbuddhe SB: Detection of multiple virulence-associated genes in Listeria monocytogenes isolated from bovine mastitis cases. Int J Food Microbiol, 113, 201-207, 2007.
52. Kalorey DR, Warke SR, Kurkure NV, Rawool DB, Barbuddhe SB: Listeria species in bovine raw milk: A large survey of Central India. J Food Control, 19, 109-112, 2008.
53. Parihar VS, Barbuddhe SB, Chakurkar EB, Danielsson-Tham ML, Tham W: Isolation of Listeria species from farm bulk milk at the receiving dairy plant and cervico-vaginal swabs from dairy cows in Goa. Indian J Comp Microbiol Immunol Infect Dis, 28 (1): 1-5, 2007.
54. Eskiizmirliler SN: İzmir Bölgesi mastitisli inek sütlerinden Listeria spp. izolasyonu. Bornova Vet Kont Araşt Enst Derg, 21 (35): 43-53, 1996.
55. Ünlü GV, Ünlü M, Bakıcı MZ: Incidence of Listeria spp. from raw milk in Sivas. Türk J Med Sci, 28, 389-392, 1998.
56. Arda G, Özsoy MF, Koçak N, Çavuşlu Ş, Keskin K, Yenen OŞ: Süt ve süt ürünlerinde Listeria araştırılması. Klimik Derg, 9 (3): 152-155, 1996.
57. Uysal HK, Anğ Ö: Süt ve süt ürünlerinden izole edilen Listeria türleri. Türk Mikrobiyol Cem Derg, 33, 163-169, 2003.
58. Sancak YC, İşleyici Ö, Elibol C, Ekici K: Van’da tüketime sunulan kremalı pastalarda Listeria türlerinin varlığının belirlenmesi. YYÜ Vet Fak Derg, 13 (1-2): 8-11, 2002.
59. Hayes PS, Feeley JC, Graves LM, Ajello GW, Fleming DW: İsolation of Listeria monocytogenes from raw milk. Appl Environ Microbiol, 51 (2): 438-440, 1986.
60. Chaudhari SP, Malik SVS, Chatlod LR, Barbuddhe SB: Isolation of pathogenic Listeria monocytogenes and detection of antibodies against phosphatidylinositol-specific phospholipase C in buffaloes. Comp Immunol Microbiol Infect Dis, 27 (2): 141-148, 2004.