Effects of Different Fixative Solutions on Kidney Volume [1] [2]
Bu çalışma ile tespit öncesi ve farklı tespit solüsyonları kullanılarak fikse edilmiş 40 adet koyunun (sağ böbrek ve sol böbrek olmak üzere toplam 80 böbrek) böbreğindeki hacimsel değişikliklerin stereolojik bir yöntem kullanılarak ortaya konması amaç edinilmiştir. Çalışmada fakültemiz mezbahasından temin edilen 80 adet koyun böbreği kullanılmıştır. Böbrekler 20'şer (10 sağ ve 10 sol böbrek) olmak üzere 4 gruba ayrılmıştır. Koyun kesimi sırasında böbrekler hayvanın karın boşluğundan hızlı bir şekilde çıkartılmış ve 0.5 cm kalınlığında kesitlere ayrılan fresh böbreklerin Cavalieri prensibi ile hacimleri hesaplanmıştır. Otolizden korumak için bu işlem süresinin 30 dakikayı geçmemesine dikkat edilmiştir. Ardından 20'şerli gruplar halinde böbrekler Formalin, Etil alkol, Zenker ve Bouin solüsyonlarının içerisine konarak belirlenmiş sürelerde tespit edilmesi sağlanmıştır. Tespit olmuş böbrek kesitlerinin üzerinde Cavalieri prensibine göre tekrar hacim hesaplamaları yapılmıştır. Kesişen nokta sayıları ve diğer parametreler programa girilmiş ve hacim değerleri ortaya çıkarılmıştır. Tespit öncesi ve tespit sonrası böbrek hacimlerinde meydana gelen değişiklikler değerlendirilmiş ve istatistiki hesaplamalar yapılmıştır. Çalışmada kullanılan tespit solüsyonlarının böbrek hacmi üzerinde belirli oranlarda küçülme yarattığı gözlenmekle birlikte bu solüsyonların küçülme üzerine etkisinin istatistiki olarak önem taşımadığı belirlenmiştir. Hacim değişimi üzerine interaksiyonlar değerlendirildiğinde ise solüsyon, yön ve solüsyon x yön'ün böbrek hacmi üzerinde etkisinin de önemsiz olduğu gözlenmiştir (P>0.05). Yapılacak olan anatomik ve histolojik çalışmalarda fikse edilmiş materyaller kullanıldığında bu çalışmadan çıkarılacak olan verilerin referans olarak kullanılabileceğini düşünmekteyiz.
Farklı Tespit Solüsyonlarının Böbrek Hacmi Üzerine Etkileri
With this study, it is aimed to determine the volumetric changes at kidneys of 40 sheep (left and right kidneys, in total 80 kidneys) before and after treated with different fixation solutions by using a stereological method. In the study, 80 sheep kidneys provided from our faculty slaughterhouse were used. Kidneys were divided into four groups of 20 kidneys in each group (10 left and 10 right kidneys). During slaughtering of the sheeps, kidneys were rapidly taken out from abdominal cavity of the animal and fresh kidneys volumes which sectioned to 0.5 cm thickness were determined by Cavalieri Principle. It was noticed that this process did not exceed 30 min in order to prevent autolysis. Afterwards, groups of kidneys each including 20 were put into Formalin, Ethyl alcohol, Zenker and Bouin solutions and fixed upon determinated fixing durations. Volume redeterminations by using Cavalier Method were also performed on fixed kidney cross sections. Number of intersected points and other parameters were entered to the macro program (Microsoft Excel XP) and volumes were determined. Volumetric changes occured on kidneys before and after fixation were evaluated, and statistical calculations were performed. It was observed that all of the fixing solutions used in this study have different rate of diminish effect on kidney volume. However this effect were not statistically significant. The evaluation of interaction on volume changes; solution, direction and solution x direction were also not significant (P>0.05). We think that data gathered at anatomical and histological research using fixed materials may be used as references.
___
- Firidin S: Histolojik çalışmalar için doku örnekleri alma ve işleme projesi. Yunus Araştırma Bülteni, 4, 15-17, 2004.
- Lee G, Luna HT: Manual of Histologic Staining Methods of the Armed Forces Institute of Pathology. Third ed., 1-10, New York, McGraw-Hill Book Company, 1960.
- Demir R: Histolojik Boyama Teknikleri Başvuru Kitabı. Palme Yayıncılık, Ankara, 2001.
- Pabuççuoğlu U: Patoloji Laboratuvarını Kurduk: (Daha) İyi bir kesit ve yayma için ne yapmalıyız Kursu. 8-9 Mayıs 2010, Ege Patoloji Derneği Etkinlikleri, İzmir, 2010.
- Gezer İnce N, Pazvant G, Oto Ç, Kahvecioğlu KO: Stereological measurement of testicular volume in Kivircik rams. Kafkas Univ Vet Fak Derg, 18, 379-384, 2012. DOI: 10.9775/kvfd.2011.5401
- Bertram JF: Counting in the kidney. Kidney Int, 59, 792-796, 2001. DOI: 1046/j.1523-1755.2001.059002792
- Pazvant G, Şahin B, Kahvecioğlu KO, Güneş H, Gezer Ince N, Bacınoğlu D: The volume fraction method for evaluation of kidney: A stereological study. Ankara Univ Vet Fak Derg, 56, 233-239, 2009. DOI: 1501/Vetfak_0000002288
- Sahin B, Alper T, Kökçü A, Malatyalioglu E, Kosif R: Estimation of the amniotic fluid volume using the Cavalieri method on ultrasound images. Int J Gynecol Obstet, 82, 25-30, 2003a. DOI: 10.1016/S0020-7292(03)00122-X
- Sahin B, Aslan H, Unal B, Canan S, Bilgic S, Kaplan S, Tumkaya L: Brain volume of the lamb, rat and bird do not show hemispheric asymmetry: A stereological study. Image Anal Stereol, 20, 9-13, 2001. DOI: 5566/ias.v20.p9-13
- Sahin B, Emirzeoglu M, Uzun A, Incesu L, Bek Y, Bilgic S, Kaplan S: Unbiased estimation of the liver volume by the Cavaliere principle using magnetic resonance images. Eur J Radiol, 47, 164-167, 2003b. DOI: 1016/S0720-048X(02)00152-3
- Bertram JF: Analyzing renal glomeruli with the new stereology. Int Rev Cytol, 161, 111-172, 1995. DOI: 10.1016/S0074-7696(08)62497-3
- Pakkenberg B: Stereological Quantitation of human brains from normal and schizophrenic individuals. Acta Neurol Scand, 137, 20-33, DOI: 10.1111/j.1600-0404.1992.tb05034.x
- Fox CH, Johnson FB, Whitig J, Roller PP: Formaldehyde fixation. J Histochem Cytochem, 33, 845-853, 1985. DOI: 10.1177/33.8.3894502
- Bolat D, Bahar S, Selcuk ML, Tipirdamaz S: Morphometric investigations of fresh and fixed rabbit kidney. Eurasian J Vet Sci, 27, 149- , 2011.
- Malas MA, Sulak O, Üngör B, Çetin E, Albay S: Determination of the volume of renal morphological structure by stereological method. SDU Tıp Fak Derg, 9, 1-5, 2002.
- Warui CN, King AS: Stereological observations on the kidney of the domestic fowl. J Anat, 142, 129-139, 1985.
- Gundersen HJG, Jensen EB: The efficiency of systematic sampling in stereology and ıts prediction. J. Microsc, 147, 229-263, 1987. DOI: 10.1111/ j.1365-2818.1987.tb02837.x
- Usanmaz SE, Akarsu ES, Vural N: Neurotoxic effect of acute and subacute formaldehyde exposures in mice. Envir Toxicol Pharmacol, 11, 100, 2002. DOI: 10.1016/S1382-6689(01)00109-0
- Özen OA, Akpolat N, Songur A, Kuş İ, Zararsız İ, Özaçmak VH, Sarsılmaz M: Effects of formaldehyde inhalation on Hsp70 in seminiferous tubules of rat testes: An immunohistochemical study. Toxicol Ind Health, , 249-254, 2005. DOI: 10.1191/0748233705th235oa
- Pabst R: Exposure to formaldehyde in anatomy: An occupational health hazard? Anat Rec, 219, 109-112, 2005. DOI: 10.1002/ar.
- Werner M, Chot A, Fabiano A, Battifora H: Effect of formalin tissue fixation and processing on immunohistochemistry. Am J Surg Pathol, 24, 1019, 2000.
- Yıldız B, İkiz İ: Kadavra yapımında ve korunmasında yaygın olarak kullanılan tespit sıvıları. Uludağ Univ Vet Fak Derg, 1, 129-135, 1993.