Deniz ERDOĞAN, Gülnur TAKE, Celal ILGAZ, Aykut GÜREL

Menstrüel siklusta tuba uterinada epidermal büyüme faktör reseptörlerinin dağılımlarının immünohistokimyasal olarak gösterilmesi

Amaç: Bu çalışmada sıçan tuba uterinalarında östrus döngüsünün farklı evrelerinde, EGF reseptörlerinin dağılımının immünohistokimyasal yöntemlerle ışık mikroskobu düzeyinde belirlenmesi amaçlandı. Yöntem: Çalışmada deneklerden menstruel döngünün uygun evrelerinde alınan doku örnekleri alışılmış ışık mikroskop izlenme yöntemlerinden geçirilerek parafin bloklar oluşturuldu. İmmünohistokimyasal çalışma için EGF-R primer antikoru ile indirekt immünohistokimyasal yöntem uygulandı. Elde edilen preparatlar Olympus BH2 fotoışık mikroskopta değerlendirildi. Bulgular: Tuba uterina'da östrus döngüsünün hiçbir evresinde kas katmanı ile damar duvarında EGF-R immünoreaktivitesi izlenmezken, diğer yapılardaki tutulumun evrelere göre değişiklik gösterdiği saptandı. Proöstus evresinde EGF-R tutulumunun epitel hücre sitoplazmasmda tekdüze olarak yayıldığı, apikal hücre zarında tutulumun daha yoğun olduğu, seroza katmanında mezotel hücrelerinin üst yüz hücre zarlarında zayıf tutulum, bağ dokuda bazı hücrelerde zayıftan kuvvetliye değişen EGF-R tutulumu belirlendi. Östrus evresinde, mukozal katlantılarm üst yüzeyindeki silyalı hücrelerde EGF-R immünreaktivitesi apikal sitoplazmada yoğun iken, bu bölgedeki lamina propriya'da zayıf olarak izlendi. Serozaya ait bağ dokusu içindeki damar duvarına yakın bazı hücrelerde reaktivite belirgin iken, mezotel hücrelerinde immünoreaktivite kuvvetliydi. Metaöstrus evresinde mukoza katlantılarındaki silli epitel hücrelerinin apikal sitoplazma ve hücre zarı ile lamina propriyadaki bazı hücrelerde kuvvetli tutulum gözlendi. Bu grupta tunika serozada boyanma izlenmedi. Diöstrus evresinde epitel katmamndaki tutulum apikal sitoplazma ve hücre zarında yoğundu. Tunika serozada tutulum zayıftı. Sonuç: Sonuç olarak, tuba uterinada kan östrojen düzeyine bağlı olarak EGF-R ekspresyonun değişiklik gösterdiği, artan kan östrojen düzeyine koşut sentezin arttığı belirlendi.

Immunohistochemical analysis of the distribution of epidermal growth factor receptors in the uterine tubes during the menstrual cycle

Purpose: To analyze the distribution of EGF receptors (EGF-R) in the uterine tubes of rats at various phases of the estrous cycle immunohistochemically. Methods: Rat uterine tube tissue samples from certain phases of the menstrual cycle were processed for paraffin embedding. Indirect immunohistochemical and EGF-R primary antibody analyses were performed on the slides. Afterwards, they were examined by Olympus BH2 photo-light microscope. Results: In uterine tubes, EGF-R expression was not detected in the tuba uterine muscle layer or vessel wall iti any estrous phase, but in the other parts its level varied in these phases. At proestrous, EGF-R was homogeneous in the epithelial cell cytoplasm, denser in the apical cell membrane, low in serosa layer mesothelial cells' external cell surface and ranged from low to denser in connective tissues. At estrous, however, EGF-R expression was higher in the apical cytoplasm of cilial cells on the upper surface of mucous folding, but low in the lamina propria. Expression was detectable in some cells near the vessel wall within connective tissue of serosa, but was denser in the mesothelia. At metaestrous, beside higher expression in both the apical cytoplasm and cell membrane of epithelia and some cells in lamina propria, no immunohistochemical staining was observed in serosa. At diestrous, expression in the epithelia layer and in the cell membrane was denser and low in serosa. Conclusion: Blood estrogen level dependent EGF-R expression was determined in the tuba uterine, and, in accordance with increased blood estrogen levels, EGF-R expression was stimulated.

PDF

___

1. Hirata Y., Orth D.N.; Epidermal Growth Factor (Urogastrone) in Human Tissues, J.Clin.Endocr.Metab., 48: 667-672.
2. Hollis D.E., Frith P.A., Vaughan J.D., Chapman R.E., Nancarrow CD.; Ultrastructural Changes in The Oviductal Epithelium of Merino Ewes During The Estrous Cycle, Am. J. Anat., 171: 441-456.
3. Kaye P.L., Harvey M.B.; The Role of Growth Factors in Preimplantation Development, Prog. Growth Factor Res., 6: 1-24.
4. Konishi I.; Development of Ciliated Cells in The Human Fetal Oviduct: An Ultrastructural Study, The Anatomical Record., 219: 60- 68.
5. Savage C.R., Ingani T., Cohen, S.; The Primary Structure of EGF, J Biol Chem, 274: 7612-7621.
6. Savage A.P., Chatterjee V.K., Cregory L.L.; Epidermal Growth Factor in Blood, Regulatory Peptides,16: 199-200.
7. İnan V.S., Vatansever H.S., Özbilgin M.K., Yurtseven M., Tuncel M.; İnsan Tuba Uterina Epitelinin Morfometrik Ve Ultrastrüktürel Olarak Değerlendirilmesi, Türkiye Klinikleri J Med Sci, 20(6): 347- 355. ' •
8. Wollenhaupt K., Ketler A., Brussow Kp., Schneider F., Kanitz W., Einspanier R., Regulation of the Expression and Bioactivation of the Epidermal Growth Factor Receptor System by Estradiol in Pig Oviduct and Endometrium, Reprod Fertil Dev,13(2-3): 167-176.
9. Adachi K., Kurachi H., Adachi H., Imai T, Sakata M., Homma H., Higashiguchi O., Yamamoto T., Miyake A.; Menstrual Cycle Specific Expression of Epidermal Growth Factor Receptors in Human Fallopian Tube Epithelium,j.Endocrinol,147(3): 553-563.
10. Adachi K., Kurachi H., Homma H., Adachi H., Imai T, Saka T., Higashiguchi O., Yamaguchi "M., Morishige.K., Sakoyama Y, Miyake A.; Estrogen Induces Epidermal Growth Factor (EGF) Receptor and Its Ligands in Human Fallopian Tube: Involvement of EGF butnot Transforming Growth Factor-alpha in Estrogen-Induced Tubal Growth in Vitro, Endocrinology, 136 (5): 2110-2119.
11. Morishige K.I., Kurachi H., Amemiya K., Adachi H., Adachi K., SakoyamaY., Miyake A., Tanizawa O.; Menstrual Stage Specific Expression of Epidermal Growth Factor and Transforming Growth Factor-Alpha in Human Oviduct Epithelium and Their Role in Early Embryogenesis, Endocrinology, 133: 199-207.
12. Wollenhaupt K., Tiemann U., Eispanier R., Schneider F., Kanits W., Brussow Kp.; Characterization of the Epidermal Growth Factor Receptor in Pig Oviduct and Endometrium, J. Reprod. Fertil, 111(2): 173-181.
13. Swanchara K.W., Henricks D.M., Birrenkott A.B., Bodine A.B., Richardson M.E.; Expression of Epidermal Growth Factor (EGF) and the Receptor in the Porcine Oviduct, Biol of Rep, 53: 911-922.
14. Wollenhaupt K., Einspanier R., Gabler C, Schneider F., Kanitz W., Brussow K.P.; Identification of the EGF/EGF-R System in the Oviduct and Endometrium of Pigs in Early Stages of Pregnancy and Early Conceptus, Exp.Clin.Endocrinol.Diabetes,107(8): 530-538.
15. Steffi M., Schweiger M., Amselgruber W.M.; Estrous Cycle Specific Immunolocalization of Different Domains of the Epidermal Growth Factor Receptor in the Porcine Oviduct, Endocrine, 27(3): 289-294.
16. Danasouri I., Frances A., Westphal L.M.; Immunocytochemical localization of Transforming Growth Factor -Alpha and Epidermal Growth Factor Receptor in Human Fallopian Tubes and Cumulus Cells, Am. J. Reprod. Immunol, 30(2-3): 82-87.
17. Smotrich D.B., Stillman R.J., Widra E.A., Gindoff P.R., Kaplan,P., Graubert M., Johnson K.E.; Immunocytochemical Localization of Growth Factors and Their Receptors in Human Pre-Embryos and Fallopian Tubes, Hum. Reprod,ll(l): 184-190. 32 Gürel