Flov Sitometre ile Boğa Spermlerinde Cinsiyetin Belirlenmesi

Cinsiyeti belirlenmiş sperma, X ve Y kromozomu taşıyan sperm popülasyonlarına göre yüksekderecede saflaştırılmış spermadır. Bu derlemede, boğa spermlerinde uygulanmakta olan cinsiyetinbelirlenmesi çalışmalarında elde edilen son gelişmelerin güncelleştirilmesi amaçlanmıştır.Flov sitometre kullanarak memeli hayvan spermlerinde cinsiyetin belirlenmesi veya hücrelerinayrılması boğalarda yeterince başarılmıştır. Geçerli tekniklerden birisi yüksek derecedeki birsaflıkta sperm cinsiyetini ayırmak için kullanılan flov sitometre cihazı, erkek ve dişi spermlerin DNAmuhteviyatı arasındaki %3-4'lük bir farkı ortaya çıkarmak ve onları %90'dan daha fazla saflıklaayırmak için kullanılır.Sonuç olarak saniyede toplam 20.000 sperm cihazdan geçer ve her bir cinsiyetten saniyede takriben4.000 canlı sperm eşzamanlı olarak ayrılabilir. Bugün geçerli sistem %85-95 doğruluk oranı ileyaklaşık olarak her bir cinsiyet için saatte 10-13x106 canlı sperm üretebilir. Cinsiyeti belirlenmişsperma kullanılarak, yaklaşık 7.000 güncel buzağılama sonuçlarına göre elde edilen dişibuzağıların cinsiyet oranı %89 olarak gerçekleşmiştir.

Flow Cytometric Sexing of Bull Sperm

Sexed semen is highly purified sperm which are sex sorted into X bearing chromosome and Ybearing chromosome population. The objective of this review is to update the current status of spermsexing in cattle.Flow cytometric sexing of mammalian sperm or cell sorting have been sufficiently accomplished incattle. One of the current techniques to sex sort sperm at a high level of purity uses a device calleda flow-cytometer to detect a 3 to 4% difference in DNA content between male and female spermand sort them with upwards of 90% purity.Thus, at an event rate of 20,000 total sperm/sec, nearly 4,000 live sperm/sec of each sex can besorted simultaneously. The current system can produce approximately 10 to 13x106live sperm/h ofeach sex with 85-95% accuracy. According to nearly 7,000 calvings after using sexed semen, 89%the calves were females.

PDF

___

1. Gledhill BL, Lake S, Steinmetz LL, et al. Flow microfluorometric analysis of sperm DNA content: Effect of cell shape on the fluorescence distribution. J Cell Physiol 1976; 87: 367-376.
2. Van Dilla MA, Gledhill BL, Lake S, et al. Measurement of mammalian sperm deoxyribonucleic acid by flow cytometry problems and approaches. J Histochem Cytochem 1977; 25: 763-772.
3. Pinkel D, Lake S, Gledhill BL, et al. High resolution DNA content measurements of mammalian sperm. Cytometry 1982; 3: 1-9.
4. Otto FJ, Hacker U, Zante J, et al. Flow cytometry of human sperm. Histochemistry 1979; 62: 249-254.
5. Garner DL, Gledhill BL, Pinkel D, et al. Quantification of the X- and Y-chromosome-bearing spermatozoa of domestic animals by flow cytometry. Biol Reprod 1983; 28: 312-321.
6. Johnson LA, Flook JP, Look MV. Flow cytometry of X- and Ychromosome-bearing sperm for DNA using an improved preparation method and staining with Hoechst 33342.Gamete Res1987; 17: 203-212.
7. Johnson LA. Sexing mammalian sperm for production of offspring: The state of the art. Anim Reprod Sci 2000; 60- 61: 93-107.
8. Maxwell WMC, Evans G, Hollinshead FK, et al. Integration of sperm sexing technology into the art toolbox. Anim Reprod Sci 2004; 82-83: 79-85.
9. Johnson LA. Gender preselection in domestic animals using flow cytometrically sorted sperm. J Anim Sci 1992; 70: 8- 18.
10. Bearden HJ, Fuquay JW, Willard ST. Applied Animal Reprod. 6th Edition, New Jersey: Upper Saddle River, 2004.
11. Thomas HS. "Sexed Semen Is Now A Reality For Cattle Breeders". http://www.cattletoday.com/archive/2008/ February/CT1428.shtml/04.06.2014.
12. Garner DL. Flow cytometric sexing of mammalian sperm. Theriogenology 2006; 65: 943-957.