Effect of progesterone hormon on cell viability and stem cell activation in dental pulp cells

Amaç: Diş pulpa dişin merkezinde olan konnektif doku ve odontoblast hücrelerden oluşan yapıdır. Diş sağlam veya yaralanmışken dentin yapısının canlılığına hücre sinyal aktivitelerine bağlıdır. Bu yapı yoğun kök hücre aktivitesine sahiptir. Diş pulpa kök hücreleri multipotent yapıdadır ve birçok hücreye farklanır. Birçok yayın kök hücrelerin farklanmadan bölünme (self renewal) kapasitesi ile ilgili Nanog, Sox2, Oct¾, SSEA4, CD13, Stro1 gibi transkripsiyonel faktörlerinin önemini ortaya koymaktadır. Progesteron adet döngüsü ve hamilelikte önemli bir hormondur. Halk arasında hamileliklerin diş kaybına neden olduğu yönünde yaygın bir inanış vardır. Yöntem: Progesterone hücre kültüründeki diş pulpa hücrelerine uygulandı. "Trypan blue" ile 24 saat sonrası hücre yaşaması ile ilgili deney yapıldı. RNA izolasyonu, c-DNA sentezi ve Real Time PCR analizi ile kök hücrelerin köklülük özelliklerini gösteren transkripsiyon faktörleri [Nanog, ve Oct¾ (POU5F1) genleri] çalışıldı. Gen ekspresyon analizi sonuçları hücre yaşaması ile ilgili deney sonuçları ile karşılaştırıldı. Bulgular: Hücre canlılık oranını gösteren tripan blue testinde; kontrol hücrelerinde %80, 7 µl Progesteron uygulanan grupta %82, 14 µl Progesteron uygulanan grupta %81 ve 21 µl Progesteron eklenen grupta ise %83 oranında canlı hücre saptandı. Bu sonuçlara göre, farklı konsantrasyonlarda progesteron diş pulpa hücrelerinin canlılık oranlarını değiştirmemektedir. Gen ekspresyon analizlerinde ilk sonuçlar yüksek doz progesteronun diş dokusunda köklülük ile ilgili genlerin (Nanog ve Oct¾) gen ekspresyonlarını arttırdığı, dental pulpa hücrelerini etkilediklerini ortaya koydu. Sonuç: Bu sonuçlara göre Progesteron yüksek konsantrasyonlarda hücre canlılık oranını değiştirmemektedir. Biz progesteronun diş pulpa hücrelerinde apopitotik yolakları etkilemediğini düşünüyoruz. Diğer taraftan Nanog ve Oct4 gen ekspresyonunun yüksek Progesteron konsantrasyonlarında artmış olması kök hücreleri de içeren dental pulpa hücrelerinin devamlılığında progesteron varlığının önemini ortaya koymaktadır.

Progesteron hormonunun diş pulpa hücrelerinde hücre yaşamına ve kök hücre aktivasyonuna etkileri

Objective: The dental pulp is the part in the center of a tooth made up of living connective tissue and cells called odontoblasts. The vitality of the dentin structure, both during health and after injury, depends on pulp cell activity and the signaling processes that regulate the cell's behavior. Dental pulp tissue has condensed stem cell activity. Dental pulp stem cells are multipotent stem cells that have the potential to differentiate into a variety of cell types. Several publications hav e stressed the importance of the expression of pluripotentiality associated markers: the transcription factors Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA4, CD13, Stro1 are indispensable for the stem cells to divide indefinitely without affecting their differentiation poten tial (self renewal) capacity. Progesterone is a steroid hormone leading to menstrual cycle and gestation. There is a widespread rumor among people that pregnancy causes toothy loss . Method: So, progesterone was applied in different concentrations on human dental pulp cells in cell culture. Cell viability assay was applied 24th hour later with trypan blue. RNA isolation, cDNA synthesis and Real Time PCR analysis were applied on selected transcription factors (Nanog and Oct4 (POU5F1) genes) which have role on steamness of stem cells. Gene expression analyses results were correlated with the cell viability assay results. Results: Cell viability assay results were 80% viable in control, 82% viable in 7 ml progesterone application, 81% viable in 14 ml progesterone application, 83% viable in 21 ml progesterone application. Due to our findings, progesterone in different concentrations did not chance the cell viability in dental pulpa cells. On gene expression analyses, preliminary results supported that high concentrations of progesterone enhance the gene expressions of steamness genes (Nanog, and Oct4) in dental pulp cells. Conclusions: So, progesterone did not change cell viability in high concentrations. We assume that progesterone did not affect apopitotic pathways on dental pulp cells. On the other hand, high gene expressions of Nanog, and Oct4 in high doses of progesterone represent the importance of progesterone hormone in dental pulp cells including stem cells maintenance.

___

  • Potdar PD, Jethmalani YD. Hu- man dental pulp stem cells: Ap- plications in future regenerative medicine. World J Stem Cells 2015; 7: 839-51.
  • Kerkis I, Kerkis A, Dozortsev D, Stukart-Parsons GC, Massironi G, Maria S, Lygia VP, Arnold IC, Humberto FC. Isolation and Characterization of a Population of Immature Dental Pulp Stem Cells Expressing OCT-4 and Other Embryonic Stem Cell Markers. Cells Tissues Organs 2006; 184: 105-16.
  • Tekoa L. King; Mary C. Brucker. Pharmacology Health. Jones & Bartlett Publish- ers. 2010; pp. 372-3. Women's
  • Kastner P, Krust A, Turcotte B, Stropp U, Tora L, Gronemeyer H, Chambon P. Two distinct es- trogen-regulated promoters gen- erate transcripts encoding the two functionally different human progesterone receptor forms A and B. EMBO J 1990; 9: 1603- 14
  • http://www.1800dentist.com/stud y-reveals-link-between- pregnan- cy-and-tooth-loss/
  • Köksal G. Östrojen ve proges- teronun endometrium hücrel- erinde mitojen ile active olan protein kinazlar üzerine etkisi. TC. İstanbul Bilim Ün. Sağlık Bilimleri Enst. Histoloji ve Em- briyoloji AD. Yüksel Lisans Te- zi, 2009.
  • Coco-Martin JM, Oberink JW, van der Velden-de Groot TA, Beuvery EC. Viability measure- ments of hybridoma cells in sus- pension cultures. Cytotechnolo- gy. 1992; 8: 57-64.
  • Pegg DE. Viability assays for preserved cells, tissues, and or- gans. Cryobiology 1989: 26: 212-31.
  • Strober W. Trypan blue exclu- sion test of cell viability. Curr Protoc Immunol. 2001; Appen- dix 3: Appendix 3B.
  • Huang CE, Hu FW, Yu CH, Tsai LL, Lee TH, Chou MY, Yu CC. Concurrent expression of Oct4 and Nanog maintains mesen- chymal stem-like property of human dental pulp cells. Int J Mol Sci 2014; 15: 18623-39. 11. Kregel S, Szmulewitz RZ, Vander Griend DJ. The pluripo- tency factor Nanog is directly up- regulated by the androgen recep- tor in prostate cancer cells. Pros- tate 2014; 74: 1530-43.
  • Shen SW, Song HY. Progester- one promotes propagation and viability of mouse embryonic stem cells. Sheng Li Xue Bao 2009; 61: 431-8.
Cumhuriyet Tıp Dergisi (ELEKTRONİK)-Cover
  • Yayın Aralığı: Yılda 4 Sayı
  • Yayıncı: Cumhuriyet Üniversitesi Tıp Fakültesi
Sayıdaki Diğer Makaleler

Insulin autoimmune syndrome associated with the use of thiocolchicoside: A Case report

Meryem TİMUÇİN, Fettah ACIBUCU, Duygu OĞUZ ACIBUCU

Lyme disease in the differential diagnosis of rheumatoid arthritis

Emrullah HAYTA, Ahmet KARADAĞ, Sevil Ceyhan DOĞAN, Müjde KARADAĞ

Sick sinus syndrome secondary to primary hyperparathyroidism

Osman BETON, Ömer AKYÜREK, Timuçin ALTIN, Çetin EROL

Hypovitaminosis D according to psychiatric diagnosis groups: A study with control group

Derya Güliz MERT

Effect of progesterone hormon on cell viability and stem cell activation in dental pulp cells

Şefik GÜRAN, Segah ALTUNTAŞ, Deniz Selin AKSOY, Zehra Dilşad ÇOBAN, Muhammed Ali KARA

A diagnose not to miss: Rotatory Atlantoaxial subluxation in emergency service

Umut OCAK, Pınar ESER OCAK

Lumbosacral spina bifida in a case with Pallister-Killian syndrome

Esra Şükran ÇAKAR, Eyüp EKİCİ, Nuri DANIŞMAN, Vehap TOPCU, Abdullatif BAKIR

HbsAg and antiHCV seroprevalence in an Eastern province of Turkey

Hasan ŞAHİN, Ebru KORMAZ, Fatma HAKİM, Funda UYSAL, Özlem DEMİRPENÇE, Alper GÜMÜŞ

Psychological factors and temperament effects on the treatment in psoriasis patients Psoriasis psikolojik faktörlerin ve mizacın etkileri

Özge KAYA, Melih AKYOL, Sedat ÖZÇELİK, Sibel HAYTA BERKSOY

The importance of catheter insertion point during percutaneous endoscopic gastrostomy

İlhan BALİ, Fatin R. POLAT, Ergün YILDIZ, Seyfi EMİR, Ufuk COŞKUNKAN, Mouiad ALKHATİB