Deri lezyonlarından ayrılan bir Crypococcus neoformans kökeni: Laboratuar tanımı, deney farelerinde infeksiyon oluşturulması ve NCCLS M27-A makrodilüsyon yöntemi ile yedi antifungale duyarlılığının belirlenmesi

Cryptococcus neoformans; seyrek olarak tamamen sağlıklı bireylerde infeksiyon oluşturabilirse de; sıklıkla bağışıklığı baskılanmış hastalarda solunumla alınıp sonra kan yoluyla merkez sinir sistemine, kemik ve eklemlere, göze, prostata ve diğer vücut bölgelerine yayılarak kriptokokkoza sebep olan kapsüllü bir patojen mantardır. Bu araştırmada, trombotik trombositopenik purpuralı bir hastanın kutanöz lezyonlarından, idrar ve kanından alınan örnekler mikolojik olarak incelenmiş ve ayrılan kökene NCCLS M27-A referans makrodilüsyon yöntemiyle antifungallere duyarlılık deneyleri yapılmıştır. Örneklerden ayrılan mantar Cryptococcus neoformans olarak tanımlanmış ve bu köken ile deney farelerinde infeksiyon geliştirilmiştir. Köken in vitro flukonazol, itrakonazol, ketokonazol, mikonazole duyarlı, flusitozine dirençli bulunmuş; amfoterisin B ve terbinafin karşısında MIC değerleri sırasıyla 1 µg/ml ve 4 µg/ml olarak saptanmıştır. Bu çalışma bu mantarın Türkiye'de insandan hastalık etkeni olarak seyrek ayrılması, kutanöz bir lezyonda bulunması ve yurdumuzda antifungallere in vitro duyarlılığı araştırılmış ilk klinik köken olması sebebiyle sunulmuştur.

A Cryptococcus neoformans strain isolated from skin lesions: Laboratory diagnosis, experimental infection, susceptibilities against seven antifungal agents by NCCLS M27-A macrobroth method.

Background and Design: Cryptococcus neoformans is an encapsulated pathogen fungus that can cause cryptococcosis rarely in completely healty individuals and commonly in immunosuppressed patients by inhalation into the lungs and than spreading hematogenously to the central nervous system, bone and joint, eye, prostate and other body sites. In this survey, specimens from cutaneous lesions, urine and blood from a patient previously diagnosed Trombotic Trombocytopenic Purpura were mycologycally examined and antifungal susceptibility tests of the isolated strain were carried on according to NCCLS M27-A macrobroth method along with the experimental infection in mices. Results: The fungus strain isolated from specimens was identified as Cryptococcus neoformans. The strain was found susceptible to fluconazole, itraconazole, ketoconazole and miconazole and resistant to flucytosin. MIC values obtained against Amphotericin B and terbinafine were respectively 1 µg/ml, and 4 µg/ml. Conclusion: This study was presented in view of limited number of isolations of C. neoformans in Turkey, isolated from cutaneous lesions and the first clinical isolate in vitro susceptibility against seven conventional antifungal agents was carried on according to NCCLS reference M27-A macrobroth method.

PDF

___

1. Yücel A. Cryptococcus neoformansõn Mikolojisi. Ed. Tümbay E. Cryptococcus neoformans ve Kriptokokkozda. Türk Mikrobiyoloji Cemiyeti Yayõnõ No.12. İzmir: Bilgehan Basõmevi 1988: 9-21.
2. Yücel A. Kriptokok ve Diğer Maya formundaki mantarlar. İnfeksiyon Hastalõklarnda. 2nci baskõ. Ed.Wilke A, Söyletir G, Doğanay M. 2001 (Baskõda).
3. Mitchell TG, Perfect JR. Cryptococcosis in the era of AIDS-100 years after the discovery of Cryptococcus neoformans. Clin Microbiol Rev 1995; 8: 515-548.
4. Cox GM, Perfect JR. Cryptococcus neoformans var.neoformans and gattii and Trichosporon species. In: Coklier L, Balows A, Sussman M. Topley and Wilsons Microbiology and Microbial Infections. 9th ed. vol 4 Ajello L, Hay RJ vol eds.Medical Mycology 2000: 461-486.
5. Kwon Chung KJ, Bennett JE. Medical Mycology. Philadelphia; Lea and Fabinger, 1992.
6. Warren N, Kevin CH. Candida, Cryptococcus and other yeasts of medical impotrance. In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH (eds). Manual of Clinical Microbiology. Washington DC: ASM Press, 1995: 723-737.
7. Hasenclever HF, Mitchell WO. Virulence and growth rates of Cryptococcus neoformans in mice. Annals of the New York Academy of Sciences 1960; 89: 156-162.
8. National Committee for Laboratory Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing for Yeasts. Approved Standard; Document M27-A National Committee for Laboratory Standards.Villanova, 1997.
9. Gatti M, Di Silverio A, Cespa M, Mosca M. Primary unusual cutaneous cryptococcosis in an HIV former drug-abuser patient. Mycoses 1997; 40: 101-102.
10. Kõnacõgil RT. Bir Blastomycosis purulenta profunda (Typus Busse-Buschke) vakasõ. Dirim 1953; 28: 20.
11. Soysal SS, Unat EK, Tahsinoğlu M. Bir cryptococcosis vakasõ. Türk Tõp Encm Arş 1953; 4:115.
12. Unat EK, Pars B, Koysak J. Bir kolon cryptococcosis i vakasõ. İstanbul Tõp Fak Mec 1959;22: 1318.
13. Tahsinoğlu M, Özkan E, Bayraktar A. Habis lenfogranülomatozla birlikte görülen bir cryptococcosis vakasõ. Yeni Tõp Alemi 1962; 11:231.
14. Koçak N, Yenerman M, Ergun I, Özdoğan E. Karaciğer sirozu vakasõ üzerine eklenmiş cryptococcosis vakasõ. Türk Tõp Cem Mec 1967; 33: 651.
15. Anğ Ö, Tümbay E, Bügel E, Güvener Z. Balgamdan izole edilen Cryptococcus neoformans suşu. İstanbul Tõp Fak Mec 1973; 36: 850.
16. Öktem K, Cevahirci F, Amato E. 238 bronkoskopik aspirasyon sõvõsõ ve çeşitli materyalin fungus yönünden incelenmesi. Diyarbakõr Üniv Tõp Fak Mec 1974; 3: 431.
17. Tümbay E, Seeliger HPR. Observations in the laboratory diagnosis of Cryptococcus neofor- mans (Observation of 11 cases). Castellania 1974; 2: 4-8.
18. Vural T, Özbek H, Anğ Ö. Septisemi ile seyreden jeneralize bir kriptokokkoz vakasõ. 18.Türk Mikrobiyoloji Kongresi (24-26 Ekim 1978, İstanbul) nde bildirilmiştir.
19. Baykal M, Zileli T, Akalõn E. A case of Crypto- coccus neoformans meningitis. Mikrobiyol Bul 1985; 19: 158-160.
20. Söyletir G, Bayõk M, Ener B, Göral M. Hairy cell lösemili bir hastada Cryptococcus neofor- mans meninjiti. İnfeks Derg 1988; 3-291-295.
21. Aktan G, Kasõmoğlu Ö, Güven Ö, Şengül M. Bir menenjit olgusundan izole edilen Crypto- coccus neoformans suşu. Türk Tõp Derneği Dergisi 1990; 9-12: 344-347.
22. Leblebicioğlu H, Saniç A, Günaydõn M, Emirler N, Özdemir Ş. Bir Cryptococcus neoformans menenjiti olgusu. Mikrobiyol Bült 1995; 29: 203-207.
23. Leblebicioğlu H, Sünbül M, Esen Ş, İncesu L, Günaydõn M. A case of cryptococcal meningitis with acquired immunodeficiency syndrome. İnfeksiyon Derg 1996; 10:389-391.
24. Unat EK, Yücel A. Konak dõşõnda C. neoformans ve H.capsulatum araştõrmalarõ. İstanbul Tõp Fak Mec 1965; 28: 47-51.
25. Tümbay E. İzmir yöresinde ve Cryptococcus neoformans kriptokkoz. I.Kõsõm: Cryptococcus neoformansõn doğal kaynaklarõndan izolasyonu. TÜBİTAK VI. Bilim Kongresi Tõp Araştõrmalarõ Grubu Tebliğleri (17-21 Ekim 1977, Ankara): 839-866.
26. Karaman A, Tümbay E, Demir O. Bursada güvercin ve çeşitli kuş dõşkõsõ örneklerinde Cryptococcus neoformans aranmasõ. Türk Mikrobiyol Cem Derg 1980; 10: 31.
27. Yõlmaz A, Göral G, Helvacõ S, Kõlõçturgay K, Gökõrmak F, Töre O, Gedikoğlu S. Distribution of Cryptococcus neoformans in pigeon feces. Mikrobiyol Bul 1989; 23: 121-126.
28. Sivrel A, Tümbay E. İzmirde güvercin dõşkõsõndan izole edilen Cryptococcus neoformans suşlarõ ve bunlarõn amfoterisin Bye in vitro duyarlõlõklarõ. İnfeksiyon Derg 1993; 7: 107-113.
29. Aygün G. İstanbulda Cryptococcus neoforman- sõn doğal kaynaklarda varlõğõnõn araştõrõlmasõ. Cer Tõp Derg 1998; 29: 18-22.
30. Yõldõran ST, Saraclõ MA, Gönlüm A, Gün H. Isolation of Cryptococcus neoformans var. neo- formans from pigeon droppings collected throughout Turkey. Med Mycol 1998; 391-394.
31. Yücel A, Kantarcõoğlu AS. Doğadan ayrõlan dört Cryptococcus neoformans kökeni ve bu mantarõn ekolojisinde bitkinin yeri. İnfeksiyon Derg 2001; 2: 205-213.
32. Rex JH, Walsh TJ, Sobel JD, Filler SG, Pappas PG, Dismukes WE, Edwards JE. Practise guideliness for the treatment of candidiasis. Infectious diseases society of America. Clin Infect Dis 2000; 30: 662-678.
33. Espinel-Ingroff A, Barchiesi F, Hazen KC, Martinez-Suarez V, Scalise G. Standardization of antifungal susceptibility testing and clinical relevance. Med Mycol 1998; 36 (Suppl 1): 68-78.
34. Yücel A. Mikozlarõn tedavisi: Antifungal ila- çlar. Yücel A, Tabak F, Öztürk R, Mert A. (ed). Günümüzde Antimikrobik Tedavide. İstanbul Bulaşõcõ Hastalõklarla Savaş Derneği Yayõn no: 12. İstanbul, 1998: 117-142.
35. Pérez A. Terbinafine: broad new spectrum of indications in several subcutaneous and systemic mycoses and parasitic diseases. Abstracts of 5th Congress of the European Confederation of Medical Mycology (3-6 June 1999, Dresden, Germany). Mycoses 1999; 42: 150-151.
36. Ryder NS. Activity of terbinafine against serious fungal pathogens. Mycoses 1999; 42 (Suppl 2): 115-119.
37. Baro T, Alia C, Torres-Rodriguez JM, Morera I, Lopez O, Méndez R, Ribas E, Jiménez T and Experimental Mycology Group. Antifungal susceptibility testing from clinical isolates of Cryptococcus neoformans in Spain. 4th International Conference on Cryptococcus and Cryptococcosis (September 12th-16th 1999, London). Abstracts, London: Royal Society 1999: 171.
38. Melhem MSC, Pappalardo MMCS, Gradin PEG, Sant Anna JV, Paschoal RC, Longo JC. Antifungal susceptibilities of serial C. neoformans isolates of HIV-associated neurocryptococcosis. 4th International Conference on Cryptococcus and Cryptococcosis (September 12th-16th 1999, London). Abstracts, London: Royal Society 1999: 174.
39. Hoban DJ, Zhanel GG, Karlowsky JA. In vitro susceptibilities of Candida and Cryptococcus neoformans isolates from blood cultures of neutropenic patients. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 1463-1464.
40. Pfaller MA, Zhang J, Messer SA, Brandt ME, Hajjeh RA, Jessup CJ, Tumberland M, Mbidde EK, Ghannoum MA. In vitro activities of voriconazole, fluconazole, and itraconazole against 566 clinical isolates of Cryptococcus neoformans from the United States and Africa. Antimicrob Agents Chemother 1999; 43: 169-171.
41. Andrews A, Pfeiffer T, Bell J, Ellis D. In vitro activity of terbinafine and fluconazole against 205 clinical and environmental isolates of Cryptococcus neoformans. 4th International Conference on Cryptococcus and Cryptococcosis (September 12th-16th 1999, London). Abstracts, London: Royal Society 1999: 197.
42. Jessup CJ, Pfaller MA, Messer SA, Zhang J, Tumberland M, Mbidde EK, Ghannoum MA. Fluconazole susceptibility testing of Cryptococ- cus neoformans: comparison of two broth microdilution methods and clinical correlates among isolates from Ugandan AIDS patients. J Clin Microbiol 1998; 36: 2874-2876.