C.Elif ÖZTÜRK, A. Demet KAYA, Muhterem YÜCEL, EMEL ÇALIŞKAN, Mustafa BEHÇET, HANDAN ANKARALI

Genişlemiş spektrımlu beta-laktamaz tespitinde kullanılan bazı fenotipik testlerin karşılaştırılması

Genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz (GSBL) enzimi bazı Gram negatif bakterilerde sefalosporinlere, geniş spektrumlu penisilinlere ve monobaktamlara karşı direnç sorununa neden olmaktadır. Tedavi başarısını arttırmak için bu enzimlerin varlığı çeşitli yöntemlerle araştırılmaktadır. Çalışmamızda Düzce Üniversitesi Araştırma ve Uygulama Hastanesi Klinik Mikrobiyoloji Laboratuvarında üretilen Escherichia coli ve Klebsiella suşlarında GSBL saptanmasında kullanılan fenotipik testlerin [disk difüzyon tarama testi (DDTT), çift disk sinerji testi (ÇDST), E-test] etkinliği karşılaştırılmıştır. Klebsiella spp. ve K.pneumoniae suşlarında, tarama testi ve E-test benzer sonuçlar vermiş iken ÇDST diğer testlerin saptayabildiği GSBL’lerin hepsini saptayamamıştır. Bu testin etkinliği, E-test ile karşılaştırıldığında Klebsiella spp. için p=0.002 ve K.pneumoniae için p=0.041 düzeyinde ve tarama testi ile karşılaştırıldığında Klebsiella spp. için p=0.001 ve K.pneumoniae için p=0.041 düzeyinde, anlamlı olarak düşük bulunmuştur. E.coli suşlarında ise farklı olarak; ÇDST ile E-test sonuçları benzer iken (p=0.187), tarama testi ÇDST’ne göre anlamlı derecede daha etkin bulunmuştur (p

Comparison of various phenotypic methods in detection of extended-spectrum beta-lactamases

Extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) enzymes of some gram-negative bacteria cause resistance to cephalosporins, broad-spectrum penicillins and monobactams. The presence of these enzymes must be investigated by various methods for the success of the treatment. In this study, the effectiveness of various phenotypic methods for detection of extended-spectrum beta-lactamases [disk diffusion screening test (DDTT), double-disk synergy test (DDST), and E-test] in Escherichia coli and Klebsiella strains isolated in Clinical Microbiology Laboratory of Duzce University, Medical Faculty were compared. Similar results were obtained with screening test and E-test, whereas DDST was found insufficient in detecting ESBL’s that were determined by other methods. The effectivity of this test was found significantly low, when compared with E-test, with results for Klebsiella spp. (p=0.002) and K.pneumoniae (p=0.041) and screening test, with results for the Klebsiella spp. (p=0.001) and K.pneumoniae (p=0.041). For E.coli strains, results obtained with DDST and E-test (p=0.187) were found similar but, screening test was significantly effective than DDST (p<0.05). As a result, for the decision of the choice of antibiotics in the treatment of Gram-negative bacterial infections, DDST should not be used alone. Use of DDTT is very important and E-test should be used for verification.

PDF

___

1. Akçam FZ, Gönen İ, Kaya O, Yaylı G: Hastane infeksiyonu etkeni çeşitli Gram-negatif bakterilerde genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz yapımının iki yöntemle araştırılması, Klimik Derg 2004;17(1):47-9.
2. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) (Çeviri editörü D Gür): Antimikrobik Duyarlılık Testleri İçin Uygulama Standartları, Onsekizinci Bilgi Eki, M100-S18, Bilimsel Tıp Yayınevi, Ankara (2008).
3. Fincancı M, Ulutürk R, Eren G ve ark: Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca ve Escherichia coli kökenlerinde genişletilmiş spektrumlu beta-laktamazların araştırılmasında kullanılan çeşitli yöntemlerin karşılaştırılması, İnfeksiyon Derg 2003;17(1):55-60. .
4. Güdücüoğlu H, Baykal S, İzci H, Berktaş M: Genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz (GSBL) üreten Escherichia coli ve Klebsiella pneumoniae suşlarının antibiyotiklere direnci, ANKEM Derg 2007;21(3):155-60.
5. Gülay Z, Abacıoğlu H, Yuluğ N: Çift disk sinerji yönteminde diskler arası uzaklığın sonuca etkisi, İnfeksiyon Derg 1995;9(1-2):89-92.
6. Gülay Z: Antimikrobiyal ilaçlara direnç, “Ustaçelebi Ş (ed): Temel ve Klinik Mikrobiyoloji” kitabında s. 91-108, Güneş Kitabevi, Ankara (1999).
7. Gülay Z: Antibiyotik duyarlılık testlerinin yorumu, Türk Toraks Derg 2002;3(1):75-88.
8. Heffelfinger JD, Dowell SF, Jorgensen JH et al: Management of community acquired pneumonia in the era of pneumococcal resistance; a report from the Drug Resistant Streptococcus pneumoniae Therapeutic Working Group, Arch Intern Med 2000;160:1399-408.
9. Işık F, Arslan U, Tuncer İ: Kan kültürlerinden izole edilen Klebsiella pneumoniae suşlarında genişlemiş spektrumlu beta-laktamazların belirlenmesinde üç yöntemin karşılaştırılması, ANKEM Derg 2007;21(3):165-70.
10. Kaçmaz B, Özenç ÇF, Aksoy A: Hastane kaynaklı infeksiyonlardan izole edilen Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae ve Klebsiella oxytoca türlerinde genişletilmiş spektrumlu beta-laktamaz saptanması, ANKEM Derg 2005;19(3):125-9.
11. Kang CI, Kim SH, Park WB et al: Bloodstream infections due to extended-spectrum beta-lactamase-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae: Risk factors for mortality and treatment outcome, with special emphasis on antimicrobial therapy, Antimicrob Agents Chemother 2004;48(12):4574-81.
12. Livermore DM: Beta-lactamases: Quantity and resistance, Clin Microbiol Infect 1997;3(4):S10-9.
13. National Committee for Clinical Laboratory Standards: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. Eighth Informational Supplement, Approved Standard M2-A6 (M100-S8), NCCLS, Wayne, PA (1998).
14. National Committee for Clinical Laboratory Standards: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. Ninth Informational Supplement, Approved Standards M2-A6 and M7-A4 (M100-S9), NCCLS, Wayne, PA (1999).
15. National Committee for Clinical Laboratory Standards: Performance Standard for Antimic-robial Disk Susceptibility Testing; Ninth Infor-mational Supplement M100-S9, NCCLS, Wayne, PA (2002).
16. Palasubramaniam S, Parasakthi N: Comparison of three different methods for the presumptive detection of ESBL production in ceftazidim-resistant strains of Klebsiella pneumoniae, Malays J Pathol 2001;23(2):73-8.
17. Paterson DL, Bonomo RA: Extended spectrum beta-lactamases: A clinical update, Clin Microbial Rev 2005;18(4):657-86.
18. Queenan AM, Foleno B, Gownley C, Wira E, Bush K: Effects of inoculum and beta-lactamase activity in AmpC- and extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae clinical isolates tested by using NCCLS ESBL methodology, J Clin Microbiol 2004;42(1):269-75.
19. Sanders CC, Thomson KS, Bradford PA: Problems with detection of beta-lactam resistance among non-fastidious gram-negative bacilli, Infect Dis Clin North Am 1993;7(2):411-23.
20. Tzelepi E, Magana CH, Platsouka E et al: Extended-spectrum beta-lactamase types in Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli in two Grek hospitals, Int J Antimicrob Agents 2003;21(3):285-8.
21. Vercauteren E, Descheemaeker P, Ieven M, Sanders CC, Goossens H: Comparison of screening methods for detection of extended-spectrum beta-lactamases and their prevalence among blood isolates of Escherichia coli and Klebsiella spp. in a Belgian teaching hospital, J Clin Microbiol 1997;35(9):2191-7.
22. Yurtman AN, Hoşgör-Limoncu M, Ermertcan Ş, Eraç B: Genişlemiş spektrumlu beta-laktamazların saptanmasında fenotipik yöntemlerin karşılaştırılması, İnfeksiyon Derg 2009;23(1):5-8.
23. Yavuzdemir Ş, Aysev AD, Güriz H: Hastane kökenli GSBL yapan 50 Klebsiella pneumoniae suşunun bazı antibiyotiklere direnç oranları ve GSBL belirlenmesinde diskler arası mesafenin önemi, Flora 2001;6(3):196-200.
24. Yavuz MT, Ersan G, Süvarierel M: Enterobacteriaceae kökenlerinde genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz üretiminin iki farklı yöntemle araştırılması, Düzce Tıp Fak Derg 2005;(2):10-3.
25. Zarakolu P, Metan G, Hasçelik G, Akova M: Pseudomonas aeruginosa ve Acinetobacter baumannii suşlarında genişlemiş spektrumlu beta-laktamaz varlığının saptanmasında farklı fenotipik yöntemlerin karşılaştırılması, Mikrobiyol Bült 2005;39(3):265-72.