Topraktan İzole Edilen Bacillus Türlerinden α-Amilazın İzolasyonu ve Karakterizasyonu

Toprak mikroflorasının önemli bir kısmı Bacillus cinsi bakterilerden oluşur. Bu bakterilerden elde edilen amilazların daha fazla stabilite, yüksek verimlilik ve düşük üretim maliyetine sahip olma gibi özellikleri vardı. Bundan dolayı topraktan izole edilen Bacillus cereus WYS01, Bacillus thuringiensis VITLW1, Bacillus thuringiensis ES2I3P, Bacillus cereus TG16 mikroorganizmalardan α-amilazın izolasyonu ve karakterizasyonunu gerçekleştirilmiştir. Yapılan araştırmada bütün bakterilerin maksimum enzim üretiminin 36. saatte, pH 7.0 ve 40 ºC’de olduğu tespit edildi. Mikroorganizmalar arasında spesifik aktivitesi en yüksek olan Bacillus cereus WYS01’tur. Enzim aktivitesine sıcaklık ve pH gibi önemli etkisi olan parametrelere bakıldı. Bacillus thuringiensis VITLW1, Bacillus thuringiensis ES2I3P ve Bacillus cereus TG16 bakterilerinin 40 ºC de, Bacillus cereus WYS01’in ise 60 ºC de maksimum aktiviteyi gösterdiği tespit edildi. Bütün mikroorganizmalar en fazla pH7.0 da α-amilaz aktivitesini gerçekleştirdi. Bu çalışmada endüstriyel ve biyoteknolojik yönden önemi olan amilazın bakteriler tarafından elde edildiği belirlendi.

Isolation and Characterization of α-Amylase from Bacillus Species Isolated from Soil

An important part of the soil microflora is made up of Bacillus bacteria. Amylases obtained from these bacteria are known to have greater stability, higher productivity and lower production costs. Therefore, isolation and characterization of α-amylase from Bacillus cereus WYS01, Bacillus thuringiensis VITLW1, Bacillus thuringiensis ES2I3P, Bacillus cereus TG16 microorganisms isolated from soil was carried out. Inthestudy, the maximum enzyme production of all bacteria was determined to be at pH7.0and 40 ºC at the 36th hour. Bacilluscereus WYS01 had the highest specific activity among microorganisms. The parameters which have important effects on the enzyme activity such as temperature and pH were investigated. It was seen that Bacillus thuringiensis VITLW1, Bacillus thuringiensis ES2I3P and Bacillus cereus TG16 bacteria showed maximum activity at 40 ºC while this was 60 ºC for Bacillus cereus WYS01. All microorganisms carried out α-amylase activity at pH7.0. In this study, it was determined that amylase, which is important for industrial and biotechnological aspects, was obtained by bacteria.

___

  • Aguloglu Fincan, S., Enez, B. 2014. Production, purification, and characterization of thermostable α-amylase from thermophilic Geobacillus stearothermophilus. Starch/Stärke, 66: 182-189.
  • Asgher, M., Asad, M.J., Rahman, S.U., Legge, R.L. 2007. A thermostable α-amylase from a moderately thermophilic Bacillus subtilis strain for starch processing. Journal Food Engineering, 79: 950-955.
  • Gupta, R., Gigras, P., Mohapatra, H., Goswami, V.K., Chauhan, B. 2003. Microbial - amylases: a biotechnological perspective. Process Biochemistry, 38: 1599-616.
  • Hamilton, L.M., Kelly, C.T., Fogarty, W.M. 1999. Production and properties of the raw starch digesting -amylase of Bacillus sp. IMD 435. Process Biochemistry, 35: 27-31.
  • Hmidet, N.,Bayoudh, A., Berrin, J.G., Kanoun, S., Juge, N., Nasri, M. 2008. Purification and biochemical characterization of a novel α-amylase from Bacillus licheniformis NH1 Cloning, nucleotide sequence and expression of amyN gene in Escherichia coli. Process Biochemistry, 43: 499-510.
  • John, R.J.D., Elangovan, N. 2013. Molecular identification of amylase producing Bacillus subtilis and detection of optimal conditions. Journal of Pharmacy Research, 6: 426-30.
  • Kikani, B.A., Singh, S.P. 2012. The stability and thermo dynamic parameters of a very thermostable and calcium-independent α–amylase from a newly isolated bacterium, Anoxybacillus beppuensis TSSC-1. Process Biochemistry, 47: 1791-1798.
  • Liu, X. D., Xu, Y. 2008. A novel raw starch digesting α-amylase from a newly isolated Bacillus sp. YX-1: Purification and characterization. Bioresource Technology, 99: 4315-4320.
  • Lowry, O. H., Roserbrough, N.J., Farr, A.L., Randall, R. 1951. Protein measure ment with folin phenol reagent. Journal of Biological Chemistry, 193: 265-275.
  • Miller, G.L. 1959. Use of dinitro salicylic acid reagent for determination of reducing sugars. Analytical Chemistry, 31: 426-428.
  • Najafi, M. F., Deobagkar. D., Deobagkar, D. 2005. Purification and characterization of an extracellular α-amylase from Bacillus subtilis AX20. Protein Expression and Purification, 41: 349-354.
  • Ortakaya, V., Aguloglu Fincan, S., Enez, B. 2017. α-Amylase from Bacillus simplex production, characterization and partial purification. Fresenius Environmental Bulletin. 26(7): 4446-4455.
  • Ozdemir, S, Aguloglu Fincan, S., Karakaya, A., Enez, B. 2018. A novel raw starch hydrolyzing thermostable α-amylase produced by newly isolated Bacillus mojavensis SO-10: Purification, characterization and usage in starch industries. Brazilian Archives of Biology and Technology, 61: e18160399.
  • Pandey, A., Nigam, P., Soccol, C.R., Soccol, V.T., Singh, D., Mohan, R. 2000. Advances in microbial amylases. Biotechnology and Applied Biochemistry, 31: 135-52.
  • Pranay, K., Padmadeo, S. R., Jha, V., Prasad, B. 2019. Screening and identification of amylase producing strains of Bacillus. Journal of Applied Biology Biotechnology, 1-6 DOI: 10.7324/JABB.2019.70103.
  • Saxena, R.K.,Dutt, K., Agarwal, L., Nayyar, P. 2007. A highly thermostable and alkaline amylase from a Bacillus sp. PN5. Bioresource Technology, 98: 260-265.
  • Shafiei, M.,Ziaee, A.A., Amoozegar, M.A. 2010. Purification and biochemical characterization of a novel SDS and surfactant stable, raw starch digesting and halophilic α- amylase from a moderately halophilicbacterium Nesterenkonia sp strain F. Process Biochemistry, 45: 694-699.
  • Souza, P.M., Magalhaes, P.O. 2010. Applications of microbial α-amylase in industry-a review. Brazilian Journal of Microbiology, 41: 850-61.
  • Topçal, F., Dığrak, M., Gündoğan, R. 2014. Identification of Bacillus Species Isolated from Soil and Determination of Bacteriocin Production. Adıyaman University Journal of Science, 4(2): 57-67.
Türk Tarım ve Doğa Bilimleri Dergisi-Cover
  • ISSN: 2148-3647
  • Yayın Aralığı: Yılda 4 Sayı
  • Başlangıç: 2014
  • Yayıncı: Prof. Dr. Mevlüt AKÇURA
Sayıdaki Diğer Makaleler

Antep Fıstığı (Pistacia vera) Tohumundan Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin Belirlenmesi¥

Duygu MERCAN ÜLKÜ, MÜGE GİDİŞ, METİN BÜLBÜL

Ekmeklik Buğday Genotiplerinde Verim ve Verim Öğelerinin Korelasyon ve Path Analizi ile İncelen

Kerem BORU, Semra YILDIRIM, ESRA AYDOĞAN ÇİFCİ

Topraktan İzole Edilen Bacillus Türlerinden α-Amilazın İzolasyonu ve Karakterizasyonu

SEDAT KAYA, BARIŞ ENEZ

Çay Üretiminde Üretici Geliri ve Verimi Artırmaya Yönelik Bir Araştırma: Artvin İli Örneği

AHMET SEMİH UZUNDUMLU, Simge KARAYAR, SEVAL KURTOĞLU, Nur ERTEK

Arazi Toplulaştırma Projelerinde Parsel Şekillerinin Değişimi: Şanlıurfa Bozca Köyü Örneği

HASAN DEĞİRMENCİ, Fırat ARSLAN, Mualla KETEN

Aspir (Carthamus tinctorius L.) Çeşitlerinin Farklı Yağış Koşullarında Verim ve Yağ Oranı Bakımından Değerlendirilmesi

Hasan KOÇ

Ekmek İsraf Etme Durumunun ve İsrafta Etkili Olan Faktörlerin Belirlenmesi: Kahramanmaraş Kent Merkezi Örneği

EMİNE İKİKAT TÜMER, YEŞİM AYTOP, Kubilay Burak YAVUZ

Kadmiyum (Cd) Uygulamasının Tane Sorgumda (Sorghum bicolor L.) Bazı Morfolojik Özellikler Üzerine Etkisinin Belirlenmesi

Hava Şeyma YILMAZ, Kağan KÖKTEN

Malatya İlindeki Etlik Piliç İşletmelerinin Teknik ve Yapısal Özellikleri¥

TURGAY ŞENGÜL, Ömer Faruk BOYRAZ

Olgunlaşma Dönemlerinin Sirken (Chenopodium album) Otunun Kimyasal Kompozisyonuna, Besleme Değerine ve Metan Üretimine Etkisi

ALİ İHSAN ATALAY, ADEM KAMALAK