Sezon Dışı Pırlak Koç Sperma Sulandırıcısına İlave Edilen Lipoik Asid ve Trolox’un Dondurma ve Çözdürme Sonrası Spermatolojik Parametreler, Oksidatif Stres ve DNA Hasarı Üzerine

Bu çalışmanın amacı sezon dışı dönemde Pırlak koç sperma sulandırıcısına ilave edilen trolox ve alfa lipoik asitin (ALA) çözüm sonu spermatolojik parametreler, oksidatif stres ve DNA hasarı üzerine etkileri araştırıldı. Çalışmada sperma örnekleri 5 sağlıklı Pırlak koçtan (2-3 yaş) elde edildi ve her koçtan 6 ejakulat toplanarak karıştırıldı. Ejakulatlar ml’de 150x106 spermatozoon olacak şekilde antioksidan içermeyen (kontrol) ve antioksidan içeren 1 mM ALA ve 1 mM trolox sulandırıcılar ile sulandırıldı. Sulandırılan örnekler 0,25 ml’lik payetlerde 5 0C’de 3 saat ekilibrasyona tabi tutularak  sıvı azot buharında donduruldu,37 oC'de çözdürülerek spermatolojik parametreler, DNA hasarı, oksidatif stres açısından değerlendirildi. ALA grubunda kontrol grubuna göre spermatozoa motilitesi, akrozom ve DNA bütünlüğü  istatistiki (p<0.05) olarak daha yüksek bulundu. Trolox grubunda kontrol grubuna göre daha yüksek akrozom ve membran bütünlüğü ile  daha az DNA hasarı tespit edildi.  (p<0.05) . Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, ALA ve trolox gruplarındaki oksidatif stres parametrelerindeki azalmalar istatistikî olarak önemli (P<0.05) bulundu. Bu çalışmanın sonuçlarına göre üreme mevsimi dışında Pırlak koç sperma sulandırıcısına ilave edilen ALA ve troloxun çözüm sonu spermatolojik parametreleri, oksidatif stresi ve DNA hasarına karşı koruyucu bir etki gösterdiği kanaatine varıldı.

Influence of Trolox and Alpha-Lipoic Acid on Post-Thawed Pırlak Ram Sperm Parameters, Oxidative Stress and DNA Damage in Non-Breeding Season

The present study was conducted to examine the protective roles of trolox and alpha-lipoic on post-thawed Pirlak ram sperm parameters, oxidative stress and DNA damage in non-breeding season. Semen samples from 5 healty Pırlak rams (2-3 years of age) were used in the study. Six ejaculates for each rams were collected and pooled. Ejaculates were split into three aliquots and diluted to a final concentration of 150x106 spermatozoa/ml with the base extender containing 1 mM alpha lipoic acid, 1 mM trolox and no additive (control) were cooled to 5 °C and equilibrated for 3 h then frozen in 0.25 ml French straws. Samples were thawed in 37 oC and evaluated in terms of spermatological parameters, DNA damage, oxidative stress. Sperm motility was increased, acrosome rate and DNA damage were decreased significantly (p<0.05) in ALA, head abnormal sperm rate and membrane integrity were increased, acrosome rate and DNA damege were decreased significantly (P < 0.05) in trolox when compared to the control group. Compared with the control group, reductions in spermatozoon MDA and GSH levels were statistically significant (P <0.05) in lipoic acid and trolox groups. Results of this study suggest that alpha-lipoic acid and trolox improve sperm parmeters, oxidative stress and DNA damage in non-breeding season.

___

  • Agarwal A, Saleh RA, Bedaiwy MA. Role of reactive oxygen species in the pathophysiology of human reproduction. Fertil Steril. 2003; 79: 829–843.
  • Akiyama M. In vivo scavenging effects of ethylcysteine on reactive oxygen species in human semen. Nippon Hinyokika Gakkai Zasshi. 1999; 90: 421–428.
  • Akman O. Swiss Albino Irkı Farelerde Sperma Kalitesinin Belirlenmesi Amacıyla Hos Testi Sonuçları ve Diğer Spermatolojik Parametreler Arasındaki İlişkinin Araştırılması. Doktora Tezi Selçuk Ü. Sağ. Bil. Enst. 2007.
  • Andreea A, Stela, Z. Role of antioxidant additives in the protection of the cryopreserved semen against free radicals. Romanian Biotechnological Letters. 2010; 15 (3): 33-41.
  • Anghel A, Zamfırescu S, Coprean D, Sogorescu E. The effects of cysteın, bovıne serum albumın and vıtamın e on the calıtatıve parameters of frozen-thawed ram semen. Annals of RSCB. 2010; 16 (2): 26-32.
  • Bailey JL, Bılodeau JF. Cormeir Semen Cryopereservation in domestic animals: A Damaging and Capacitating Phenomenon J. of And. 2000; 21 (1): 1-7.
  • Başpınar N, Çoyan K, Bucak MN, Ömür AD, Ataman MB, Akalın PP, Güngör Ş, Öztürk C. Koç spermasının ekilibrasyon ve dondurma-çözdürme sonrası spermatolojik ve biyokimyasal parametreleri üzerine lipoik asitin etkisi. Eurasian J. Vet. Sci. 2011; 27 (2): 87-92.
  • Bılodeau JF, Blanchette S, Gagnon C, Sırard MA. Thiols prevent H2O2-mediated loss of sperm motility in cryopreserved bull semen. Theriogenology. 2001; 56 (2): 275–286.
  • Carreau JP. Biosynthesis of lipoic acid via unsaturated fatty acids. Methods Enzymol. 1979; 62: 152-158.
  • Chen Y, Foote RH, Brockett CC. Effect of Sucrose, Trehalose, Hypotaurine, Taurine and Blood Serum on Survival of Frozen Bull Sperm. Crybiology. 1993; 30: 423-431.
  • Deıchsel K, Palm F, Koblıschke P, Budık S, Aurıch C. Effect of a dietary antioxidant supplementation on semen quality in pony stallions. Theriogenology. 2008; 69: 940–945.
  • Demirci E. Evcil hayvanlarda reprodüksiyon, sun’i tohumlama ve androloji ders notları (1nd ed). F.Ü.Vet.Fak., Ders Teksiri No:53 Elazığ. 2002.
  • Draper HH, Hadley M. Malondialdehyde determination as index of lipid peroxidation. Methods Enzymol. 1990; 186: 421−430.
  • Gündoğan M, Avdatek F, Yeni D. Effect of extenders on motility, morphology and osmotic resistance parameters of ram sperm during liquid storage. Revue Méd. Vét. 2011; 162 (11): 546-551.
  • Gündoğan M, Yeni D, Avdatek F, Fidan AF. Influence of sperm concentration on the motility, morphology, membrane and DNA integrity along with oxidative stress parameters of ram sperm during liquid storage. Anim. Reprod. Sci. 2010; 122: 200-207.
  • Hughes CM, Mckelvey-Martın VJ, Lewıs SEM. Human sperm DNA integrity assessed by the Comet and ELISA assays. Mutagenesis 1999; 14 (1): 71–75.
  • Ibrahım SF, Osman K, Das S, Othman AM, Majıd NA, Rahman MPA. A study of the antioxidant effect of alpha lipoic acids on sperm quality. Clinics. 2008; 63: 545-50.
  • O’Flaherty CM., Beconi MT., Beorlegui NB., Effect of natural antioxidants, superoxide dismutase and hydrogen peroxide on capacitation of frozen-thawed bull spermatozoa. Andrologia. 1997; 29: 269-275.
  • Özden S, Catalgol B, Gezcinci S, Arda P, Bolkent S, Alpertunga B. Methiocarb-induced oxidative damage following subacute exposure and the protective effects of vitamin E and taurine in rats. Food and Chemical Toxicology. 2009; 47: 1676-1684.
  • Packer L, Wıtt EH, Trıtschler HJ. Alpha-lipoic acid as a biological antioxidant. Free Radic. Biol. Med.1995; 19: 227-250.
  • Rıce D, Kennedy S. Vitamin E: function and effects of deficiency. Br. Vet. J. (1988; 144: 482-492.
  • Schafer S, Holzmann A. The use of transmigration and Spermac TM stain to evaluate epididymal cat spermatozoa. Anim. Reprod. Sci. 2000; 59: 201-211.
  • Sedlak J, Lındsay RHC. Estimation of total, protein bound and nonprotein sulfhydryl groups in tissue with Ellmann’s reagent. Anal. Biochem. 1968; 25: 192–205.
  • Selvakumar E, Prahalathan C, Mythılı Y, Varalakshmı P. Beneficial effects of Dl-α-lipoic acid on cyclophosphamide-induced oxidative stress in mitochondrial fractions of rat testis. Chemico-Biological Interactions. 2005; 152: 59–66.
  • Shıva SRN, Jagan M, Atreja SK. Effect of adding taurine and trehalose to a tris-based egg yolk extender on buffalo (Bubalus bubalis) sperm following cryopreservation. Anim. Reprod. Sci. 2010; 119: 183-190.
  • Sıcherle CC, Maıa MS, Bıcudo SD, Rodello L, Azevedo HC. Lipit peroxidation and generation of hydrogen peroxide in frozen-thawed ram semen supplemented with catalase or Trolox. Small Rum. Res. 2011; 95: 144–149.
  • Sılva MS, Bıcudo SD, Sıcherle CC, Rodello L, Gallego IC. Lipit peroxidation and generation of hydrogen peroxidein frozen-thawed ram semen cryopreserved in extenders with antioxidants. Anim. Reprod. Sci. 2010; 122: 118-123
  • Sıngh NP, Muller CH, Berger RE. Effects of age on DNA double-strand breaks and apoptosis in human sperm. Fertil. Steril. 2003; 80 (6): 1420-1430.
  • Sınha MP, Sınha AK, Prasad RL The effect of glutathione on motility, enzyme leakage and fertilility of frozen goat semen. Anim. Reprod. Sci. 1996; 41: 237-243.
  • Suzukı YJ, Tsuchıya M, Packer L. Thioctic acid and dihydrolipoic acid are novel antioxidants which interact with reactive oxygen species. Free. Rad. Res. Commun. 1991; 15: 255-263.
  • Trounson AO. Cryopresrevation. Brit. Med. Bull. 1990; 147: 427-433.
Kocatepe Veteriner Dergisi-Cover
  • ISSN: 1308-1594
  • Yayın Aralığı: Yılda 4 Sayı
  • Başlangıç: 2008
  • Yayıncı: Afyon Kocatepe Üniversitesi
Sayıdaki Diğer Makaleler

Sığır Yağ Dokusundan İzole Edilen Mezenkimal Kök Hücrelerden Farklılaştırılan Nörosferlerde Sox2, ß-III Tubulin ve Nestin Ekspresyonlarının İmmunfloresan Boyama Yöntemi ile İncelenmesi

Özlem ÖZDEN AKKAYA, Tayfun DİKMEN, Shah NAWAZ

Farklı Üreme Yaşındaki Keçilerde Dondurulmuş Sperma ile Servikal Tohumlama

Koray TEKİN

Günlük Yaşamda Gıda Takviyesi Olarak Kullanılan Zencefil, Zerdeçal ve Karanfilin Sitotoksik Etkilerinin Araştırılması

Özgür ALBUZ

Sütçü İneklerde Beslenme Seviyesinin Belirlenmesinde, Sütte Üre Azotu (MUN) ile Bazı Parametreler Arasındaki Etkileşimin Araştırılması

Mehmet TAYTAK, İsmail BAYRAM

Bazı Deniz Alg Türlerinin Etanol ve Metanol Ekstraktlarının Antibakteriyel Aktivitelerinin Yersinia ruckeri Üzerinde Araştırılması

Jale KORUN, Emine Şükran OKUDAN, Remziye Eda YARDIMCI, Gülşen TİMUR, Aycan ULUTAŞ, Mehmet GÖKOĞLU, Yağmur Saadet ÇELİK, Beytullah Ahmet BALCI

Giardia Duodenalis ile Doğal Enfekte Köpeklerde Klinoptilolit ile Antiparaziter Kür Sağlanabilir Mi?

Adnan AYAN, Songül ERDOĞAN

Afyonkarahisar Damızlık Süt Sığırı İşletmelerinde Buzağı Bakımı ve Yaşama Gücünün Değerlendirilmesi

Kemal YILDIRIM, Serdar KOÇAK

Afyonkarahisar İlinde Satışa Sunulan Tost Peynirlerinin Bazı Fizikokimyasal ve Mikrobiyolojik Kalite Kriterlerinin İncelenmesi

Gökhan AKARCA, Oktay TOMAR

Farelerde NMDA Reseptör Antagonisti Mk-801 ile Böbrek ve Karaciğerde Oluşan Patolojik Değişikliklere Karşı N-Asetilsisteinin Koruyucu Etkisi

Murat Sırrı AKOSMAN, Hasan Hüseyin DEMİREL, Ruhi TÜRKMEN

Holstein-Friesian İneklerde Prepartal Vitamin ve İz Element Takviyelerinin Postpartum 14. Günde Toplam Antioksidan ve Oksidan Durumları ve Meme Sağlığı Parametreleri Üzerine Etkileri

Serdal KURT, Seçkin SALAR, Şükrü KÜPLÜLÜ, Ayhan BAŞTAN