ÖZCAN ÖZKAN, ALPER KARAGÖZ, Nadir KOÇAK, MEHMET ERAY ALÇIĞIR

The First Molecular Detection and Genotyping of Encephalitozoon cuniculi in Rabbit’s Eye in Turkey

Encephalitozoon cuniculi was first recognized as the disease agent in rabbits in 1922. The genotype of E. cuniculi isolated from laboratory rabbits with the neurologic disease was described as genotype I. In the eye, this parasite causes damage to the lens, causing phacoclastic uveitis and cataracts. Intraocular infection often occurs in cases of transplacental transmission. There has been no report on the molecular diagnosis of the parasite in Turkey. The current study is the first report on the detection of E. cuniculi spores using the molecular method in Turkey. In our previous study, a rabbit breeding facility was determined seropositive for E. cuniculi infection monitored for five years in terms of clinical symptoms. An autopsy was performed for a definite diagnosis of the infection. Samples were stained according to the hematoxylin-eosin (H&E) staining after tissue processing procedure and histopathologic analysis was performed. In addition to, the samples for DNA extraction were also taken during the autopsy. ECUNF and ECUNR species-specific primer pairs were used for amplification and genotyping of E. cuniculi. The animals were observed no clinical symptoms except ocular lesion (n=9). Therefore, one of these rabbits was used in the autopsy to definite diagnosis and determination of the damage to the eye. As histopathological, the lesions in the eye were found in the initial or middle stage of progressive infection. The DNA sequence showed that E. cuniculi examined in the present study were genotype I. Possible cause of the visible white mass in the rabbit’s eye may be the parasite infection. Therefore, clinicians may consider E. cuniculi as one of the possible causes of ocular lesions in rabbits during daily inspection or ophthalmological examination.

Türkiye’de Tavşan Gözünde Encephalitozoon cuniculi’nin İlk Moleküler Tayini ve Genotiplemesi

Encephalitozoon cuniculi tavşanlarda hastalık ajanı olarak ilk kez 1922 yılında tanınmıştır. Nörolojik hastalıklı laboratuvar tavşanlarından izole edilen E. cuniculi genotipi, genotip I olarak tanımlanmıştır. Bu parazit, gözde lens hasarına, bu da fakoklastik üveite ve katarakta neden olur. Intraokuler enfeksiyon sıklıkla transplasental bulaşma vakalarında ortaya çıkar. Türkiye’de parazitin moleküler tanısı hakkında herhangi bir rapor bulunmamaktadır. Bu çalışma, Türkiye’de moleküler yöntem kullanılarak E. cuniculi sporlarının saptanmasıyla ilgili ilk rapordur. Önceki çalışmamızda E. cuniculi enfeksiyonu seropozitif belirlenen bir yetiştirme tesisindeki tavşanlar, klinik semptomlar açısından beş yıl boyunca izlenildi. Enfeksiyonun kesin tanısı için otopsi yapıldı. Doku işleme prosedüründen sonra, doku örnekleri hematoksilen-eozin (H & E) boyamasına göre boyandı ve histopatolojik analiz yapıldı. Bununla birlikte, DNA ekstraksiyonu için otopsi sırasında örnekler alındı. E. cuniculi’nin amplifikasyonu ve genotiplemesi için ECUNF ve ECUNR türe özgü primer çifti kullanıldı. Hayvanlarda oküler lezyon (n=9) dışında klinik semptom görülmedi. Bu nedenle, bu tavşanlardan biri, kesin tanı koymak ve göze verilen zararı belirlemek için otopside kullanıldı. Histopatolojik olarak, gözdeki lezyonlar enfeksiyonun ilerleyici ilk veya orta evresinde bulundu. Bu çalışmada sunulan E. cuniculi’nin DNA dizisi, genotip I olduğunu göstermiştir. Tavşan gözündeki görünür beyaz kitlenin olası bir nedeni parazit enfeksiyonu olabilir. Bu nedenle klinisyenler, E. cuniculi’yi, günlük muayenede veya oftalmolojik muayenede tavşanlardaki göz lezyonlarının olası nedenlerinden biri olarak görebilirler.

PDF

___

Jeklova E, Leva L, Kovarcik K, Matiasovic J, Kummer V, Maskova J, Skoric M, Faldyna M: Experimental oral and ocular Encephalitozoon cuniculi infection in rabbits. Parasitology, 137 (12): 1749-1757, 2010. DOI: 10.1017/S0031182010000648

Giordano C, Weigt A, Vercelli A, Grilli M, Giudice C: Immunohistochemical identification of Encephalitozoon cuniculi in phacoclastic uveitis in four rabbits. Vet Ophthalmol, 8, 271-275, 2005. DOI: 10.1111/ j.1463-5224.2005.00394.x

Williams D: Rabbit and rodent ophthalmology. EJCAP, 17 (3): 242-252, 2007.

11. Baneux PJR, Pognan F: In utero transmission of Encephalitozoon cuniculi strain type I in rabbits. Lab Anim, 37, 132-138, 2003. DOI: 10.1258/00236770360563778

Künzel F, Fisher PG: Clinical signs, diagnosis, and treatment of Encephalitozoon cuniculi infection in rabbits. Vet Clin North Am: Exot Anim Pract, 21 (1): 69-82, 2018. DOI: 10.1016/j.cvex.2017.08.002

Valencáková A, Bálent P, Novotný F, Cisláková L: Application of specific primers in the diagnosis of Encephalitozoon spp. Ann Agric Environ Med, 12 (2): 321-323, 2005.

Ozkan O, Ozkan AT, Karaer Z: Encephalitozoonosis in New Zealand rabbits and potential transmission risk. Vet Parasitol, 179 (1-3): 234-237, 2011. DOI: 10.1016/j.vetpar.2011.02.007

Eroksuz H, Eroksuz Y, Ozer H, Cevik A, Unver O: A survey of Encephalitozoon cuniculi infection in rabbit colonies in Elazıg, Turkey: pathomorphologic and serologic (Carbonimmunoassay test) studies. Isr J Vet Med, 54 (3): 73-77, 1999.

Eroksuz Y, Eroksuz H, Metin N, Ozer H: Morphologic examinations of cases of naturally acquired encephalitozoonosis in a rabbit colony. Turk J Vet Anim Sci, 23, 191-195, 1999.

Berkin S, Kahraman MM: Türkiye’de tavşanlarda Encephalitozoon (Nosema) cuniculi enfeksiyonu. Ankara Univ Vet Fak Derg, 30, 397-406, 1983. DOI: 10.1501/Vetfak_0000000181

Csokai J, Joachim A, Gruber A, Tichy A, Pakozdy A, Künzel F: Diagnostic markers for encephalitozoonosis in pet rabbits. Vet Parasitol, 163 (1-2): 18-26, 2009. DOI: 10.1016/j.vetpar.2009.03.057

Talabani H, Sarfati C, Pillebout E, Van Gool T, Derouin F, Menotti J: Disseminated infection with a new genovar of Encephalitozoon cuniculi in a renal transplant recipient. J Clin Microbiol, 48, 2651-2653, 2010. DOI: 10.1128/JCM.02539-09

Reetz J, Nöckler K, Reckinger S, Vargas MM, Weiske W, Broglia A: Identification of Encephalitozoon cuniculi genotype III and two novel genotypes of Enterocytozoon bieneusi in swine. Parasitol Int, 58 (3): 285- 292, 2009. DOI: 10.1016/j.parint.2009.03.002

Pelin A, Moteshareie H, Sak B, Selman M, Naor A, Eyahpaise MÈ, Farinelli L, Golshani A, Kvac M, Corradi N: The genome of an Encephalitozoon cuniculi type III strain reveals insights into the genetic diversity and mode of reproduction of a ubiquitous vertebrate pathogen. Heredity, 116 (5): 458-465, 2016. DOI: 10.1038/hdy.2016.4