Serkan İKİZ, Seyyal AK, Ali A ABDELKAREEM

Trakya Yöresinde Yetiştirilen Sığırların Sütlerinde Brucella Türlerinin Varlığının Bakteriyolojik ve Moleküler Yöntemlerle Karşılaştırılmalı Olarak Araştırılması

Trakya yöresinde Brucella etkenlerinin varlığının araştırıldığı bu çalışmada, farklı ilçe, köy ve işletmelerde yetiştirilen Brucella aşısı uygulanmamış, sütleri kullanımda olan 75 ineğe ait süt örnekleri tesadüfi olarak toplandı. Örneklerde, Brucella türleri ve Brucella spesifik DNA’ sı araştırıldı. İzolasyon için süt örneklerinden Brucella selektif besiyerlerine ekimler yapıldı. Sütte spesifik DNA’nın saptanması için PCR kullanıldı. Bakteriyolojik çalışmaların sonucunda, 75 süt örneğinin üç (%4)’ ünde Brucella spp. izole edildi. İzolatların biri B. melitensis diğer ikisi B. abortus olarak identifiye edildi. PCR incelemelerinin sonucunda toplam 75 örneğin 17 (%22,66)’ sinde Brucella spesifik DNA’sı saptandı. İzole edilen üç örneğin PCR’ da da pozitif olduğu belirlendi.

Comparative Investigation On The Presence Of Brucella Spp. In Milk Of Cattle Raised In Trakya Districh By Bacteriological And Molecular Methods

In this study, presence of Brucella spp. in Trakya district was investigated. For this purpose, milk samples of 75 unvaccineted cattle raised in various districts, villages and farms, were randomly collected. The collected samples were used for bacterial isolation and detection of Brucella specific DNA. For isolation, the milk samples were inoculated onto Brucella selective media. PCR technique was applied for determination of the specific DNA in the milk samples. As a result of bacteriological studies, Brucella spp. were isolated from three (4%) of total 75 milk samples. One of the isolates was identified as B. melitensis, while the others were B. abortus. Brucella specifical DNA was amplified in 17 (22.66 %) of 75 samples by PCR. The culture positive milk samples were also found to be positive by PCR.

PDF

___

Abdussalam. M., Fein, D.A., 1976. Brucellosis as aworld problem. Developments in Biological Standardization 31, 9–23.
Abela, 1999. B. Epidemiology and control of Brucellosis in ruminant from 1986–1996 in Malta. Revue Scientique et Technique 18, 648– 59.
Aiello, S.E., Mays, A., 1998. Brucellosis “ in the Merck Veterinary Manul ” 8th ed. White House Station, N J: Merck and CO. pp. 991–1034.
Alton, G.G., Jones, L.M., Angus, R.D., Verger, J.M., 1988. Techniques for the Brucellosis labaratory. Institut National De La Recherche Agronomique 147, rue de 1’ Universite, 75007; Paris, France.
Anderson, T.D., Cheville, N.F., Meador, V.P., 1986. Pahtogenesis of placentitis in the goat inoculated with Brucella abortus. II. Ultrastructural studies. Veterinary Pathology 23, 227–239.
Arda, M. ve ark., 1999. Özel Mikrobiyoloji. Ankara: Medisan yayın evi
Bilgihan, H., 2004. Klinik mikrobiyolojik tanı. İzmir, Türkiye: Fakülteler kitapevi, Barış yayın
Aydın, N., Arda, M., Akay, Ö., İzgür, M., Ayhan, H., Esendal, Ö., Aydın, F., 1990. Atık fetuslardan izole edilen Brucella suşlarının Koaglütinasyon testi ile identifikasyonu. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 37, 348–358.
Bricher, B.J., 2002. PCR as a diagnostic tool for Brucellosis. Journal of Veterinary Microbiology 90, 435–446.
Bricker, B.J., Halling, S.M., 1994. Differention of Brucella abortus bv. 1,2 and Brucella melitensis, Brucella ovis and Brucella suis bv. 1 by PCR. Journal of Clinical Microbiology and Infection 32, 2660–2666.
Corbel, M.J., 1997 Brucellosis in overview. 1.st Internation Conference on Emerging Zoonoz Jarussalem. Emerging Infectious Diseases 3, 213–221.
Cortez, A., Scarcelli, E., Soares, R.M., Heinemann, M.B., Sakamoto, S.M., Genovez, M.E., Ferrira, F., Richtzenhain, İ.J., 2001. Detection of Brucella DNA from aborted bovine fetuses by PCR. Australian Veterinary Journal 79, 500–501.
Demirözü, K., Çelik, M., İyisan, S., Özdemir, Ü., Erdenliğ, S., 1996. Trakya bölgesindeki Brucellosis’in sero-epidemiyolojisi. Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi 27, 79–100.
Erdoğan, İ., Gürel, A., Tekin, C., Uyanık, F., Bitgel A., 1993. Trakya bölgesinde koyun, keçi ve sığırlarda bakteryel abortların tesbiti ve dağılımı. Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi 24, 23–35.
Evangelista, T.B.R., Santos, H.O., Navarro, A.F.L., Basulto, G.E.M, Nielsen, K., Francisco, M., Gomez, M., Roseles, J.F.M., Manriquez, L.C.P., 2005. Evaluation of polymerase chain reaction test (PCR) for the diagnosis of bovine Brucellosis. Tecnica Pecuaria en Mexico 43, 117–126.
FAO, 2000. Bovine Brucellosis. Animal Health Diseas Cards. Erişim http://www.fao.org /bovine Brucellosi.
Fekete, A., Bantle, J.A., Halling, S.M., Sanborn, M.R., 1990. Preliminary development of diagnostic test for Brucella using PCR. Journal of Applied Bacteriology 69, 216–227.
Fekete, A., Bantle, J.A., Halling, S.M., 1992. Detection of brucella by PCR in bovine fetal and maternal tissue. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation 4, 79–83.
Hamdy, M.E., Amin, A.S., 2002. Detection of Brucella species in the milk of infected cattle, sheep, goats and camels by PCR. American Journal of Veterinary Research 163, 299–303.
Herman, L., De Ridder, H., 1992. İndentification of Brucella spp. by using the PCR. Applied and Environmental Microbioly 58, 2099–2101.
Holt, J.G., Krieg, N.R., Sneath, P.H.A., Staley, T.T., Williams ST., 1994. Bergey’s manuel of determinative bacteriology. 9th. Edi. Baltimore, USA.
Gallien, P., Dorn, C., Ablan, G., Staak, C. Protz, D., 1998. Detection of Brucella spp. in organs of naturally infected cattle by PCR. Veterinary Record 142, 512–514.
Güler, L., Gündüz, K., Ok, U., 2003. Comparison of PCR and bacteriological culture for diagnosis of sheep Brucellosis using aborted fetus samples. Veterinary Microbiology 93, 53–61.
İlhan, Z., Keskin, O., Sareyyüpoğlu, B., Kökçü, L., Akan, M., 1999. Bir sığırcılık işletmesinde Brucella abortus Epidemisi. Ankara Ünversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 46, 257–262.
İlhan, Z., Aksakal, A., Ekin, H., Gülhan, T., Solmaz, H., Erdemli, S., 2008. Coparison of culture and PCR for detection of Brucella melitensis in blood and lymhpoid tissues of serologically positive and negative slaughtered sheep. Jornal Compilation. The Soceity for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology 46, 301–306.
İyisan, A.S., Akmaz, Ö., Gökçen Düzgün, S., ark., 2000. Türkiyede sığır ve koyunlarda Brusellosizin sero epidemiyolojisi. Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi 31, 21–75.
İzgür, M., Akay, Ö., Arda, M., Erdeğer, J., 1992. Sığır Brucellosizin teşhisinda EDTA ve 56˚ C de aglutinasyon testlerinin kullanılması. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 39, 191–200.
Kanani, A.N., 2007. Serological, Cultural and Molecular Detection of Brucella infection in Breeding Bulls. A thesis submitted to A. A. U. Anand
Leal-Klevezas, D.S., Martinez, V.I.O., Lopez, M.A., Garcica, C.J., Martinez, S.J.P., 2000. Use of PCR to detect Br. abortus biovar 1 in infected goats. Journal of Veterinary Microbiology 75, 91–97.
Leal-Klevezas, D.S., Martinez, V.I.O., Lopez, M.A., Martinez, S.J.P., 1995. Single-step PCR for detection of Brucella spp. from blood and milk of infected animals. Journal of Clinical Microbioly 3, 3087–3090.
Leary, S.O., Sheahan, M., Sweeney, T., 2006. Brucella abortus detection by PCR assay in blood, milk and lymph tissue of serologically positive cows. Research in Veterinary Science 81, 170–176.
Noviello, S., Gallo, R., Kelly, M., Limberger, R.J., Deangils, K., Cain, L., Wallance, B., Dumans, N., 2004. Laboratuary acquired Brucellosis. J. Emerg. İnfec. Dis.; 10: 1 OIE 2004 Caprine and ovine Brucellosis. Manual of standerds for diagnostic test and vaccines, OIE Technical Report Series. 5th edition Paris; Chapter 2.4.2.848–1850
OIE Manual., 2004. Bovine brucellosis in : "Manual of diagnostic test and vaccines for terrestrial animal". OIE World Organisition For Animal Health part 2 chapter 2.3.1.
Quinn, P.I., Carter, M.E., Markey, B.K., Carter, G.R., 1999. Clinical veterinary microbiology. Mosby press, London pp.261–267.
Radostitis, O.M., Blood, D.C., Gay, C.C., 1994. Veterinary Medicine 8th edition, Bailliene Tindall Ltd. London pp: 787–813.
Refai, M., 2002. Incidence and control of Brucellosis in the near east region. Veterinary Microbioly 90, 81–110.
Rijpens, N.P., James, G., Van Asbroeck, M., Rossau, R., Herman, L.M.F., 1996. Direct detection of Brucella spp. İn raw milk by PCR and reverse hybridization with 16 S–23 S rRNA spacer probes. Applied and Environtal Microbioly 62, 1683–1688.
Romero, G., Pardo, M., Grillo, M.J., Diaz, R., Blasco, J.M., Lopez-Gon, İ., 1995. Evaluation of PCR and İndirect ELİSA on milk samples for the diagnosis of Brucellosis in diary cattle. Journal of Clinical Microbioly and Infection 33, 3198–3200.
SANCO, 2001. European commiission scientific comitee on animal health and animal welfare, Brucellosis in sheep and goat. C2/AH/R23/2001
Şehin, T., Yıldız, A., 2006. Hatay yöresinde koyun ve keçilerde Brusellozisin seroprevalansının araştırılması. Fırat Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 20, 331–335.
Taleski, V., Kantardjiev, T., Cretnic Z, 2002. An overview of the epidemiology and epizootology of Brucellosis in selected countries of Central and South East Europe. Veterinary Microbioly 90, 147–155.
Taşıçı, F., 2004. Gıda kaynaklı Brucellosis ve önemi. Uludağ Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 23, 137-142.
Türütoğlu, H., Mutluer , B., Uysal Y., 2003. Burdur yöresinde toplanan sütlerin Brucella infeksiyonu yönünden araştırılması. Turkish Journal of Veterinary and Animal Sciences 27, 1003–1009.
Unver, A., Erdoğan, H., Atabay, H., Şahin, M., Güneş, V., Çitil, M., Gökçe, H., 2006. Sığır atıklarından izole edilen Brucella türlerinin RAPD-PCR ile genotiplendirmesi. Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 12, 121-127.
VHO, İzmir, 2007, www.izmirvho. org7default.asp?sayfa=119.Brucella aşısı.(Erişim tarihi 20.08.2007)
WHO , 2006. Brucellosis in human and animal World Health Organization, World Organisation for Animal Health and FAO. Geneva
XiaoAn, C., ChangGing, Q., JiZhang, Z., Chunhua Y, Shuangdi, G., Shumin, C., 2005. Laboratory evaluation on PCR diagnostic kit for detecting Brucellosis in dairy cow. Chinese Journal of Veterinary Science and Technology 35, 712–717