Ersin BORAZAN, Çiğdem GÜNGÖRMEZ, Hatice GUMUSHAN AKTAS

Expression of miR-143, miR-145, miR-192, Tumor Suppressor miRNAs using qPCR in Colon Cancer stage II

Amaç: Bu çalışmada Stage II kolorektal kanserli hastalardan alınmış tümörlü ve normal kolon/rektum dokularında Tümör süpressör mikroRNA (miRNA) olan miR-143, miR-145 ve miR-192'in ekspresyon seviyelerinin qRT-PCR ile tespit edilmesi ve elde edilen verilerin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Materyal ve Metod: Bu çalışma Gaziantep Üniversitesi Tıp Fakültesi Araştırma ve Uygulama Hastanesi Genel Cerrahi Anabilim Dalı'nda laboratuar ve patalojik bulgular ile klinik değerlendirme sonucunda kolorektal kanser tanısı konmuş 9 hastanın tümörlü ve normal (kontrol-temiz cerrahi sınırları) kolon/rektum dokuları ile gerçekleştirilmiştir. qRTPCR uygulaması için miRNeasy mini kit ile izole edilen miRNA'lar kullanıldı. İzole edilen miRNA'lar miScript RT-PCR ticari kit ile cDNA'ya dönüştürüldü. Doku örneklerindeki miRNA ekspresyon seviyeleri RT- SYBR Green qPCR kiti kullanılarak Rotor Gene Q sistemi ile belirlendi. Bulgular: Kolorektal kanser teşhisi konulmuş 9 hastanın ortalama miRNA-143 ekspresyon seviyesi normal doku ve tümörlü doku karşılaştırıldığında 0.096 kat azaldığı, miR-145'in ise 1.52 kat azaldığı tespit edilmiştir. Bu artış istatiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p?0,05). miR-192 onkogenik miRNA olmasına rağmen ekpresyon miktarının normal ve tümör dokusu fold chance değerleri karşılaştırıldığında 3.25 kat arttığı tespit edilip istatiksel olarak anlamlı bulunmamıştır (p?0,05). Sonuç: Çalışmamızdan elde ettiğimiz bulgulara göre kolorektal kanserde tümör süpressör miRNA olan miR-143 ve miR-145'in hastaların tümörlü kolon dokularında ekspresyon seviyeleri azalmıştır. miRNA'lar, kanser gelişimi ve ilerlemesindeki moleküler yollarda önemli etkiler etmektedir. miRNA'lar hücresel birçok işleve ek olarak, kanser tanı ve tedavisinde biyobelirteç olarak kullanılabileceği düşünülmektedir.

Stage II Kolon Kanserinde Tümör Süpressör miRNA olan miR-143, miR-145 ve miR-192’nin Ekspresyonu

Background: In this study, it was aimed to determinethe expression levels of tumor suppressor microRNAs(miRNA) including miR-143, miR-145 and miR-192in tumor and normal colon / rectum tissues of Stage IIcolorectal cancer (CRC) patients by using qPCR and tocompare the obtained data.Materials and Methods: This study was performed ontumor or normal (control-clean surgical margin) colon/ rectum tissues of 9 patients diagnosed with colorectalcancer as a result of clinical evaluation with laboratoryand pathological findings in Gaziantep UniversityMedical Faculty Research and Practice HospitalGeneral Surgery Department. miRNAs isolated withmiRNeasy mini kit were used for qPCR. IsolatedmiRNAs were converted into cDNA by miScript RTPCRcommercial kit. The miRNA expression levels oftissue samples were determined by using RT- SYBRGreen qPCR kit in Rotor Gene Q.Result: The mean level of miRNA-143 expression in9 patients diagnosed with colorectal cancer appears tohave decreased 0.096 fold compared to normal tissueand tumor tissue, while miR-145, 1.52 fold. Thisdecrease was considered as statistically significant (p0.05).Conclusion: According to the findings obtained in ourstudy, the expression levels of tumor supressor miRNAmiR-143 and miR-145 in tumor colon tissues ofpatients with colorectal cancer have decreased.miRNAs have attracted major interest as a means toanalyze the molecular pathways involved in cancerdevelopment and progression. In addition to theirimportant cellular functions, it is possible that secretedmiRNAs may be diagnostic biomarkers for cancerdetection.

PDF

___

) Atkin W.S, Edwards R, Kralj-Hans I, Wooldrage K, Hart AR, et al. ) Once-only flexible sigmoidoscopy screening in prevention of colorectal cancer: a multicentre randomised controlled trial. Lancet 2010; 375: 1624–1633.
) Bretthauer M. Evidence for colorectal cancer screening. Best Pract Res Clin Gastroenterol 2010; 24: 417–425
) Ogata-Kawata H, Izumiya M, Kurioka D, et al. Circulating Exosomal microRNAs as Biomarkers of Colon Cancer . PLoS ONE 2014; 9(4): e92921.
) Lee R.C, Feinbaum R.L, Ambros V. The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. Cell 1993; 75(5):843 54.
) Pancione M, Remo A, Colantuoni V. Genetic and epigenetic events generate multiple pathways in colorectal cancer progression. Patholog Res Int 2012; pp: 1-11.
) Corte H, Manceau G, Blons H, Laurent-Puig P. MicroRNA and colorectal cancer. Dig Liver Dis 2012; 44: 195-200.
) Lin S, Gregory R.I. MicroRNA biogenesis pathways in cancer. Nat Rev Cancer 2015; 15: 321-333.
) Ren A, Dong Y, Tsoi H, Yu J. Detection of miRNA as non-invasive biomarkers of colorectal cancer. Int J Mol Sci 2015; 16: 2810-2823.
) Chang K, Mestdagh P, Vandesompele J, Kerin J.M et al. MicroRNA expression profiling to identify and validate reference genes for relative quantification in colorectal cancer. BMC Cancer 2010; 10:173.
) Aaron J. Schetter, Hirokazu Okayama, and Curtis C. Harris. The rol of microRNAs in Colorectal Cancer. Cancer J. 2012 ; 18(3): 244–252.
) Zhang J.X, Song W, Chen Z.H, et al. Prognostic and predictive value of a microRNA signature in stage II colon cancer: a microRNA expression analysis. Lancet Oncol 2013; 14:1295-306.
) Michael M.Z, O'Connor S.M, Nicholas G. Reduced Accumulation of Specific MicroRNAs in Colorectal Neoplasia. Mol Cancer Res 2003; 1: 882-891.
) Hayes J, Peruzzi P.P and Lawler S. microRNAs in cancer: biomarkers, functions and therapy. Trends in Molecular Medicine 2014; 20(8).
) Mazeh H, Mizrahi I, Ilyayev N, Halle D, Brücher B, et al. The Diagnostic and Prognostic Role of microRNA in Colorectal Cancer-a Comprehensive review. J Cancer 2013; 4: 281-295.
) Shen J, Stass SA, Jiang F. MicroRNAs as potential biomarkers in human solid tumors. Cancer Lett 2013; 329: 125-136
) Wang J.C, Zhou Z.G, Wang L, et al. Clinicopathological significance of microRNA-31, -143 and -145 expression in colorectal cancer. Disease Markers. 2009; 26(1):27–34.
) Slaby O, Svoboda M, Fabian P, et al. Altered expression of miR-21, miR-31, miR-143 and miR-145 is related to clinicopathologic features of colorectal cancer. Oncology. 2008; 72(5-6):397–402.
) Di Leva G, Garofalo M, Croce CM. MicroRNAs in cancer. Annu Rev Pathol 2014; 9: 287-314.
) Hayes J, Peruzzi P.P, Lawler S (2014) MicroRNAs in cancer: biomarkers, functions and therapy. Trends Mol Med 2014; 20: 460-469.
) Hamfjord J, Stangeland A.M, Hughes T, Skrede M.L, Tveit K.M, et al. Differential expression of miRNAs in colorectal cancer: comparison of paired tumor tissue and adjacent normal mucosa using high-throughput sequencing. PloS one 2012; 7: e34150
) Ye J.J, Cao J. MicroRNAs in colorectal cancer as markers and targets: Recent advances. World J Gastroenterol 2014; 20: 4288-4299.
) Volinia S, et al. A microRNA expression signature of human solid tumors defines cancer gene targets. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006; 103(7):2257–2261.
) Siegel R.L, Miller K.B, Jemal A. Cncer Statistic, 2017. Cancer Journal for Clinicians 2017; 67: 7-30

Harran Üniversitesi Tıp Fakültesi Dergisi-Cover

ISSN: 1304-9623
Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
Başlangıç: 2004
Yayıncı: Harran Üniversitesi Tıp Fakültesi Dekanlığı

Arşiv

Sayıdaki Diğer Makaleler

Şanlıurfa'daki Prostat Kanseri Hastalarında VGSC'lerin İmmünohistokimyasal Olarak İncelenmesi

Ulaş ALABALIK, Cemal CAVUS, Hatice GUMUSHAN AKTAS

Hipertermi ve Plazma membranı Ca ATPaz: HT'nin PMCA Üzerinde Herhangi Bir Etkisi Var mı?

Armağan CANER, Müge Gülcihan ÖNAL

Expression of miR-143, miR-145, miR-192, Tumor Suppressor miRNAs using qPCR in Colon Cancer stage II

Ersin BORAZAN, Çiğdem GÜNGÖRMEZ, Hatice GUMUSHAN AKTAS

Stage II Kolon kanseri dokularında Onkogenik microRNA olan miR-92, miR- 21, miR-155'in qRT-PCR'da Ekspresyonu

Ersin BORAZAN, Çiğdem GÜNGÖRMEZ, Hatice GUMUSHAN AKTAS