İrfan PEKSOY, Betül ARICA, Tayan Meral ERCAN, H. Süheyla KAŞ, Mürvet TUNCEL, Burçin ŞENER, Ayşe AŞANSÜ, Işıl S. ÜNSAL, Ali Kemal OĞUZ

4826

Fagositik aktivasyon yoluyla lökosit işaretlemede Tc-99m poli (l-laktik) asit mikrokürelerinin kullanımı

Amaç: Bu çalışmanın amacı Tc-99m poli (l-laktik) asit (PLA) mikrokürelerini lökositleri fagositik yolla işaretleyebilmek için hazırlamak ve gerekli optimum şartları belirlemektir. Yöntem: PLA polimerlerinden (MA:52.000 D) çözücü buharlaştırma yöntemi ile PLA mikroküreleri (1-5 µm) hazırlandı. Daha sonra pH 3’te kalay klorürle Tc-99m ile işaretlendi, işaretleme verimi % 95’in ve stabilitesi ise 24 saat içinde % 70’in üzerinde bulundu. 50 ml heparinli kan gönüllü sağlıklı erişkin insanlardan alınarak oda sıcaklığında sedimantasyona bırakıldı ve lökositten zengin plazma elde edildi. 1 mL’de hazırlanan 50 mCi Tc-99m-PLA mikroküresi lökosit çökeleğine ilave edilip rotator bir mekanik sallayıcıda 37oC’de 1. saat inkubasyona bırakıldı. Tc-99m PLA ile işaretlenen lökositler santrifüj ile süspansiyondan ayrıldı, yıkandı ve trombositten fakir plazma ile süspansiyon yapıldı. Bulgular: Lökositlerin işaretlenme verimi yaklaşık % 70 bulundu. Monositlerin PLA mikrokürelerini fagosite ettiği elektron mikroskobunda gösterildi. Lökositlerin kemotaktik indeksi 2’nin üzerinde bulundu. Lökositlerin canlılığı Tripan mavisi ile değerlendirildi ve % 90’ın üzerinde bulundu. Sonuç: Tc-99m-PLA mikroküreleri ile lökosit işaretlemenin potansiyel değeri olduğu görülmektedir. Monositlerin daha belirgin işaretlenmesi nedeniyle özellikle kronik inflamasyonda kullanılabilir.
Anahtar Kelimeler:

Lökositler, Enflamasyon, Radyofarmasötikler, Fagositler

Phagocyting labeling of leukocytes with Tc-99m PLA (poly l-lactic acid) microspheres

Objective: The aim of this study was to prepare Tc-99m poly (l-lactic) acid (PLA) particles for phagocyting engulfment by leucocytes and determine optimization conditions. Methods: PLA microspheres (1-5 µm) were prepared from PLA polymeres (MW=52.000) by solvent evaporation from methylene chloride. Then, they were labeled with Tc-99m by stannous chloride reduction at pH 3 with an efficiency of >95% and a stability of >70% at 24 hours. 50 mL heparinized blood was obtained from normal adult volunteers. The precipitate was removed and the sediment was washed with 0.9 NaCl and then centrifuged at 600 rpm for 5 minutes. 50 mCi Tc-99m-PLA particles in 1 mL was added to precipitated leukocytes and rotated in mechanical shaker in incubation at 37oC for 1 hour. Tc-99m-PLA labeled leukocytes were separated by centrifugation, washed and suspended in platelet poor plasma. Results: Leukocytes were labeled with an efficiency of about 70%. The engulfment of PLA particles by monocytes and the integrity of cell membrane afterwards were demonstrated by electron microscopy. Chemotactic index was >2. The viability of leukocytes was >90%, determined with trypan blue. Conclusion: Our results indicated the potential value of leukocyte labeling with Tc-99m PLA microspheres. This may be especially useful in demonstrating chronic infection, because of the preference of monocytes in labeling.
Keywords:

Leukocytes, Inflammation, Radiopharmaceuticals, Phagocytes,

PDF

___

  • 1. Wilson MA, de da Pena R. Infection. In: Michael A. Wilson, Editör. Textbook of Nuclear Medicine. Philadelphia: Lippincott-Raven Publishers;1998. p.189-210.
  • 2. Goldsmith SJ, Palestro CJ, Vallabhajosula S. Infectious Diseases. In: Henry N. Wagner, Editor. Principles of Nuclear Medicine. Philadelphia, WB Saunders Company. p.728-45.
  • 3. Treves ST, Conolly LP, O’Tuama L, Stabin M, Larar GN, Swift P. Pediatrics. In: Henry N. Wagner, Editor. Principles of Nuclear Medicine. Philadelphia, WB Saunders Company. p.1137-70.
  • 4. Bozdag S, Calis S, Kas HS, Ercan MT, Peksoy İ, Hincal AA. In vitro evaluation and intra-articular administration of biodegradable microspheres containing naproxen sodium. J Microencapsul 2001;18:443-56.
  • 5. Tuncay M, Calis S, Kas HS, Ercan MT, Peksoy İ, Hincal AA. Diclofenac sodium incorporated PLGA (50:50) microspheres: Formulation considerations and in vitro/in vivo evaluation. Int J Pharm 2000;195:179-88.
  • 6. Mumper RJ, Mills BJ, Ryo UY, Jay M. Polymeric microspheres for radionuclide synovectomy containing neutron-activated holmium-166. J Nucl Med 1992:33:398- 402.
  • 7. Pişkin E. Polimer based drug delivery systems. In: Hıncal AA, Kas HS, editor. Biomedical science and technology. New York:Plenium Pres; 1998. p.1-16.
  • 8. Kitchell JP, Wise DL. Poly(lactic/glycolic acid) biodegradable drug-polymer matrix systems. Methods Enzymol 1985;112:436-48.
  • 9. Ercan MT. Rapid determination of hydrolised-reduced technetiun 99m in particulate radiopharmaceuticals. Appl Radiat Isot 1992:43;1175-7.
  • 10. Glauert AM. Practical Methods in Electron Microscopy. Amsterdam, Oxford;1975.
  • 11. Boyden S. The chemotactic effect of mixtures of antibody and antigen on polymorphonuclear leukocytes. J Exp Med 1962:115; 454-66.
  • 12. Zigmond SH, Hirs JG. Leukocytes locomotion and chemotaxis. New methods for evaluation and demonstration of a cell derived factor. J Exp Med 1973:137;387-410.
  • 13. Welling M, Feitsma HI, Blok D, Calame W, Ensing GJ, Goedemans W, et al. A new 99mTc labelling method for leucocytes: in vitro and in vivo comparison with 99mTc- HMPAO. Q J Nucl Med 1995:39:89-98.
  • 14. Daher AH, Fortenberry JD, Owens ML, Brown LA. Effects of exogenous nitric oxide on neutrophil oxidative function and viability. Am J Respir Cell Mol Biol. 1997;16:407-12.
  • 15. Hanna RW, Lomas FE. Identification of factors affecting technetium 99m leucocyte labelling by phagocytic engulfment and development of an optimal technique. Eur J Nucl Med 1986;12:159-62.
  • 16. Hanna R, Braun T, Levendel A, Lomas F. Radiochemistry and biostability of autologous leucocytes labelled with 99mTcstannous colloid in whole blood. Eur J Nucl Med 1984;9:216- 9.
  • 17. Hirsch JI, Tatum JL, Fratkin MJ, Apostolides DL, Quint RI. Preparation and evaluation of a 99mTc-SnF2 colloid kit for leukocyte labeling. J Nucl Med 1989;30:1257-63.
  • 18. Mock BH, English D. Leukocyte labeling with technetium- 99m tin colloids. J Nucl Med 1987;28:1471-7.
  • 19. Jain R, Shah NH, Malick AW, Rhodes CT. Controlled drug delivery by biodegradable poly(ester) devices: Different preparative approaches. Drug Dev Ind Pharm 1998;24:703-27.
  • 20. English D, Andeson BR. Labelling of phagocytes from human blood with Tc-99m Sulphur colloid. J Nucl Med 1975;16:5- 10.
Genel Tıp Dergisi-Cover
  • ISSN: 2602-3741
  • Yayın Aralığı: Yılda 6 Sayı
  • Başlangıç: 1997
  • Yayıncı: SELÇUK ÜNİVERSİTESİ > TIP FAKÜLTESİ
Arşiv
Sayıdaki Diğer Makaleler

Hormon replasman tedavisinin kardiyak fonksiyonlar üzerine etkisinin yeni parametrelerle değerlendirilmesi

M. Akif DÜZENLİ, Kurtuluş ÖZDEMİR, ABDULLAH SÖKMEN, ÇETİN ÇELİK, Ahmet SOYLU, KAZIM GEZGİNÇ, Mehmet YAZICI, B. Behlül ALTUNKESER, Hasan GÖK

Meme karsinomlarında S-100, vimentin, sitokeratin ve HMB-45 ekspresyonu

Sema HÜCÜMENOĞLU, Fatih Mehmet AVŞAR, M. Ertuğrul KAFALI, Evrim ÖZTÜRK, Gülben ERDEM, Şinasi YILMAZ, Şenay YALÇIN

Fagositik aktivasyon yoluyla lökosit işaretlemede Tc-99m poli (l-laktik) asit mikrokürelerinin kullanımı

İrfan PEKSOY, Betül ARICA, Tayan Meral ERCAN, H. Süheyla KAŞ, Mürvet TUNCEL, Burçin ŞENER, Ayşe AŞANSÜ, Işıl S. ÜNSAL, Ali Kemal OĞUZ

İntestinal endometriozis: Nadir bir olgu sunumu

Alanur GÜVEN, GÜRKAN KIRAN, Hakan KIRAN

Posterior girişimle hemivertebrektomi: Olgu sunumu

H. Mustafa ÖZDEMİR, ÖMER FARUK ERKOÇAK, Serkan TUNA, M. İ. Safa KAPICIOĞLU

Malign-nonmalign plevral efüzyon ayırıcı tanısında IGF ve IGFBP’lerin rolü

Yavuz T. GEDERET, BAHADIR ÖZTÜRK, Emrah KARAGÖZOĞLU, Mehmet GÖK, A. Muhtar TİFTİK