İki boyutlu AgNOR ölçümüne dayanan çalışmalarda yüz yerine elli hücre değerlendirilmesi arasında bir fark var mıdır?

Ribozomal gen bölgeleri olan çekirdekçik organize edici bölge (NOR), akrosentrik kromozomların ikincil boğumlarında yer alır ve aktif olduklarında gümüşle boyanırlar. Bu bölgeler ile ilgili 100 hücrenin değerlendirilmesine dayanan birçok çalışma yapılmıştır. Bu çalışmanın amacı 100 hücre yerine 50 hücre değerlendirildiğinde elde edilen sonuçların 100 hücre ölçüldüğünde elde edilen sonuçlardan bir farkının olup olmadığını belirlemektir. Bu çalışmaya tiroidinden ince iğne aspirasyon biyopsisi (İİAB) yapılmış olan 6 nodüler guatr’lı (yaş aralığı 24–76) ve 10 kistik nodüler guatr’lı (yaş aralığı 26–69) birey dahil edildi. Bu biyopsi materyalleri AgNOR ların değerlendirilebilmesi için spesifik bir protokole göre boyandı. Her bir birey için önce ilk 50 çekirdek, daha sonrada ilk 100 çekirdek değerlendirildi ve her bir hücrenin AgNOR sayısı (herbir kişide toplam AgNOR sayısı/incelenen çekirdek sayısı oranı) ve “Toplam AgNOR alanı/çekirdek alanı” ( TNA / ÇA) oranı her bir grup için tespit edildi. İlk 50 çekirdek değerlendirildiğinde elde edilen ortalama AgNOR sayısı (2.256 ± 0.552) ile ilk 100 çekirdek değerlendirildiğinde elde edilen ortalama AgNOR sayısı (2.243 ± 0.535) arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark olmadığı saptanmıştır (p = 0.600). Yine ilk 50 çekirdek değerlendirildiğinde elde edilen ortalama ‘‘TNA / ÇA’’ oranının (5.802 ± 1.524) ilk 100 çekirdek değerlendirildiğinde elde edilen ortalama ‘‘TNA / ÇA’’ (5.799 ± 1.525) oranından istatistiksel olarak farklı olmadığı görülmüştür (p = 0.940). AgNOR sayısına ve AgNOR alan oranı artışına dayanan çalışmalarda 100 çekirdek yerine, 50 çekirdeğin değerlendirilmesinin, metodun spesifitesini ve sensitivitesini etkilemediği, aksine daha az zaman gerektirdiğinden avantaj sağladığı kanısına varılmıştır.
Anahtar Kelimeler:

NOR, AgNORs, guatr, tiroid

Is there any difference between evaluations of fifty cells instead of one hundred cells in studies based on two-dimensional AgNOR measurement?

The NOR, sites of the ribosomal genes, are located on the secondary constrictions of five pairs of acrocentric chromosomes and are stained by silver if they are active. Many studies have been conducted about those regions based on the evaluation of 100 cells. The aim of the study was to detect if there is any difference between the results obtained by evaluation of 50 cells instead of 100 cells. In the current study, six patients with nodular goitre (age range 24-76 years) and ten individuals with cystic nodular goitre (age range 26-69 years), fine needle aspiration biopsy (FNAB) was performed from whose thyroide, were included. Then the biopsy materials were stained for AgNOR evaluation using a specific protocol. At first 50, and then 100 nuclei per individual have been evaluated, and AgNOR count and “Total AgNOR area / Nuclear area” (TNA / NA) values of individual cells were detected for each group. There was no difference between mean AgNOR number obtained from evaluation of first 50 cells (2.256 ± 0.552) and 100 cells (2.243 ± 0.535) (p = 0.600). Moreover, mean ‘‘TNA / NA’’ obtained from evaluation of first 50 cells (5.802 ± 1.524) was not statistically different from the mean values of first 100 cells (5.799 ± 1.525) (p = 0.940). It was concluded that, in studies which based on AgNOR count and measurement, evaluation of 50 nuclei instead of 100 nuclei does not effect the sevsitivity or specifity of the method, and does not alter the results of the study, conversily, it provide advantage because of less time requirement.

___

  • Rivero, E.R.C., Aguiar, M.C.F., Analise quantitativa das AgNORs no carcinoma adenoide cıstico intra- oral atraves da tecnica de dupla marcacao PCNA/AgNOR, J. Bras. Patol. Med. Lab., 38(1), 39–44, 2002.
  • Schliephake, H., Prognostic relevance of molecular markers of oral cancer-a review, Int. J. Oral Maxillofac Surg., 32, 233–245, 2003.
  • Bukhari, M.H., Niazi, S., Hashmi, I., et al., Use of AgNOR index in grading and differential diagnosis of astrocytic lesions of brain, Pak. J. Med. Sci., 23(2), 206–210, 2007.
  • Trere, D., AgNOR staining and quantification, Micron, 31, 127-131, 2000.
  • Imamoglu, N., Demirtas, H., Donmez-Altuntas, H., et al., NORs Expression increases on metaphase chromosomes of Down syndrome lymphocytes, in concordance with the mitogen concentration in the culture medium, Cytometry Part B-Clin Cytom, 66B, 36–39, 2005b.
  • Pich, A., Chiusa, L., Margaria, E., Prognostic relevance of AgNORs in tumor pathology, Micron 31, 133-4, 2000.
  • Paiva, R.L., Sant‟ana Filho, M., Bohrer, P.L., et al., AgNOR quantification in cells of normal oral mucosa exposed to smoking and alcohol. A cytopathologic study, Anal. Quant. Cytol. Histol. 26, 175–180, 2004.
  • Benn, P.A., Perle, M., Chromosome staining and banding techniques. In: Rooney D.E. Czepulkowski BH. (eds). Human Cytogenetics, Constitutional Analysis, actical approach, Vol 1. pp 91-118, Oxford Univ. Press, 1986.
  • Lindner, L.E., Improvements in the silver-staining technique for nucleolar organizer regions (AgNOR), Journal of Histochemistry and Cytochemistry, 41, 439-445, 1993.
  • Demirtas, H., Imamoglu, N., Donmez, H., et al., Condensed chromatin surface and NOR surface enhancement in mitogen-stimulated lymphocytes of Down syndrome patients, Ann Genet-Paris, 44, 77- 82, 2001.
  • Miller, O.J., Miller, D.A., Dev, V.G., et al., Expression of human and suppression of mouse nucleolus organizer activity in mouse-human somatic cells hybrids, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 73, 4531, 1976.
  • Cardillo, M.R., AgNOR technique in fine needle aspiration cytology of salivary gland masses, Acta Cytologica, 36, 147-51, 1992.
  • Cucer, N., Imamoglu, N., Tozak, H., et al., Two- dimensional agnor evaluation as a prognostic variable in urinary bladder carcinoma: A different approach via total agnor area/nucleus area per cell, Micron, 38, 674–679, 2007.
  • Eroz, R., Cucer, N., Karaca, Z., et al., The Evaluation of Argyrophilic Nucleolar Organizing Region Proteins in Fine-Needle Aspiration Samples of Thyroid, Endocr. Pathol., 22, 74-78, 2011.
  • Dayan, D., Vered, M., Sivor, S., et al., Age-related changes in proliferative markers in labial salivary glands: a study of argyrophilic nucleolar organizer regions (AgNORs) and Ki-67. Exp. Gerontol., 37, 841–50, 2002.
  • Hall, P., Crocker, J., Watts, A., et al., A comparison of nucleolar organizer region staining and Ki 67 immunostaining in non Hodgkin‟ s lymphoma, Histopathology, 12, 373-381, 1988.
  • Jan Mohamed, M., Armstrong, J., Crocker, J., et al., The relationship between number of interphase NOR and NOR bearing chromosomes in non Hodgkin‟s lymphoma, J. Pathol., 158 (1), 3-7, 1989.
  • Imamoglu, N., Demirtas, H., Donmez-Altuntas, H., Higher NORs–expression in lymphocyte of trisomy 21 babies/children: in vivo evaluation, Micron, 36, 503-507, 2005a.
  • Eroz, R., Cucer, N., Unluhizarci, K., et al., Evaluation of AgNOR spot number in thyroid papillary carcinoma and normal cells nuclei. Journal of Health Sciences, 19(2), 102-107, 2010.
  • Eroz, R., Okur, M., Berik, O., Down sendromlu çocuklarda AgNOR sayısı ile gelişim arasında bir ilişki var mı? Sağlık Bilimleri Enstitüsü Dergisi, 1(1), 8-11, 2011.
  • Eroz, R., Okur, M., Ozkan, A., et al., Does higher NORs expression affect the developmental stages of down syndrome infants? Genetic counseling, 23(2), 249-253, 2012.
  • Eroz, R., Unluhizarcı, K., Cucer, N., et al., Kistik Nodüler Guatrlı Olguların Tiroid Hücrelerindeki AgNOR Sayısı ve AgNOR Yüzey Alanı/Çekirdek Alanı Karşılaştırılması, Konuralp Tıp Dergisi, 4(2), 31-35, 2012. ve Cinsiyete göre
  • Eroz, R., Tasdemir, S., Dogan, H., Is there any relationship between decreased AgNOR protein synthesis and human hair loosing? Biotechnic & Histochemistry, 87(8): 494–498, 2012.
  • Hamburger, J.I., Hamburger, S.W., Fine needle biopsy of thyroid nodules: avoiding the pitfalls. NY State J. Med., 86, 241-249, 1986.
  • Ravinsky, E., Safneck, J.R., Differentiation of Hashimoto's thyroiditis from thyroid neoplasms in fine needle aspirates, Acta Cytol., 32, 854-861, 1988.
  • Andersen, J.S., Lyon, C.E., Fox, A.H., et al., Directed proteomic analysis of the human nucleolus, Curr. Biol., 12(1), 1–11, 2002.
  • Denton, T.E., Liem, S.L., Cheng, K.M., et al., The relationship between aging and ribosomal gene activity in humans as evidenced by silver staining, Mech. Ageing Dev., 15(1), 1–7, 1981.
  • Das, B.C., Rani, R., Mitra, A.B., et al., The number of silver-staining NORs (rDNA) in lymphocytes of newborns development, Mech. Ageing Dev., 36(2), 117–123, 1986. relationship to human
  • Buys, C.H., Osinga, J., Anders, G.J., Age- dependent variability of ribosomal RNA–gene activity in man as determined from frequencies of silver staining nucleolus organizing regions on metaphase chromosomes of lymphocytes and fibroblasts, Mech. Ageing Dev., 11(1), 55–75, 1979.
  • Pedrazzini, E., Mamaev, N., Slavutsky, I., Age related decrease of NOR activity in bone marrow metaphase chromosomes from healthy individuals, Mol. Pathol., 51(1), 39–42, 1998.
  • Thomas, S., Mukherjee, A.B., A longitudinal study of human age-related ribosomal RNA gene activity as detected by silver-stained NORs, Mech. Ageing Dev., 92(2–3), 101–109, 1996.
  • Camargo, R.S., Shirata, N.K., di Loreto, C., et al., Significance of AgNOR measurement in thyroid lesions, Analysis and Quantitaive Cytology and Histology, 28, 188-192, 2006.
  • Slowinska-Klencka, D., Klencki, M., Popowicz, B., AgNOR quantification in the diagnosis of follicular pattern thyroid lesions, Analysis and Quantitaive Cytology and Histology, 25, 347-352, 2003.
  • Slowinska-Klencka, D., Klencki, M., Popowicz, B., Multiparameter analysis of AgNOR in thyroid lesions: comparison with PCNA expression, Histol Histopathol, 19, 785-792, 2004.
Erciyes Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Fen Bilimleri Dergisi-Cover
  • ISSN: 1012-2354
  • Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
  • Başlangıç: 1985
  • Yayıncı: Erciyes Üniversitesi