Farklı Resveratrol Konsantrasyonlarının Gingival Fibroblastlardaki Hücre Canlılığına Etkisi

Amaç: Bu çalışmanın amacı, farklı resveratrol konsantrasyonlarının gingival fibroblast canlılığı üzerindeki etkisini MTT (3-[4,5-dimetiltiyazol-2-yl]-2,5-difeniltetrazolyum bromür) yöntemiyle belirlemektir. Yöntem: Çalışmamızda, fibroblast kültürlerinin kurulmasında sıçanların mandibular 1.molar dişlerinin bukkalinden alınan dişeti dokuları kullanıldı. Dokular mekanik olarak parçalanarak kültür kaplarına aktarıldı. Hücreler, DMEM besi ortamı içerisinde kültüre edildi. Resveratrolün hücre proliferasyonu üzerindeki etkisinin belirlenmesi için 4. pasaj kültürler kullanıldı. Hücre proliferasyonu, 3-[4,5-dimetiltiyazol-2-yl]-2,5-difeniltetrazolyum bromür (MTT) yöntemiyle ½ dilüsyonile 0,78-400µM konsantrasyon aralığında ve 48, 72 ve96 saat inkübasyon sürelerinin ardından incelendi. Sonuçların istatistiksel değerlendirmesinde tek yönlü ANOVA testinin Tukey ikili karşılaştırma yöntemi kullanıldı. Hücrelerin %50 canlılık gösterdiği inhibisyon konsantrasyonları (IC50) logaritmik canlılık eğrilerinden hesaplandı. Bulgular: 0,78-25µM konsantrasyon ve 72 ile 96 saat inkübasyon süresi aralığında fibroblast canlılığının %85’in üzerinde; 48 saat sonra ise %90’ın üzerinde olduğu saptandı. Uygulanan çözücünün hücre canlılığı üzerinde herhangi bir etkisinin olmadığı belirlendi. IC50 değerleri 48, 72 ve 96 saatler için sırasıyla 120,1±5,7 µM; 85,2±6,4 µM; 105,9±7,1 µM olarak belirlendi. Sonuç: Bu doz belirleme çalışmasının sınırları dahilinde, 0,78-25µM resveratrol konsantrasyonunun fibroblast canlılığı üzerinde olumsuz etkisi olmadığı söylenebilir.

Effect of Different Resveratrol Concentrations on Cell Viability on Gingival Fibroblasts

Objectives: The aim of this study was to investigate the effect of different concentrations of resveratrol on gingival fibroblast viability with (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. Methods: In our study rat buccal gingival tissues from the area surrounding the mandibular first molar were used for establishment of fibroblast cultures. Rat gingival tissues were mechanically disrupted, and cultured in DMEM supplemented with 15% fetal bovine serum, 2 mM L- glutamine, and penicillin (100 IU/mL)/streptomycin (100 μg/mL). The 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5- diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and forth passage cultures were used for evaluating the effects of resveratrol on fibroblast viability in a concentration range of 0,78-400µM after 48, 72 and 96 hours of incubation. Inhibitory concentration 50 (IC50) values were calculated from the logarithmic trend lines of the proliferation versus concentration graphs. Results: MTT assay showed that viability of gingival fibroblast cells were over 85% and 90% after 72-96 hours and 48 hours respectively in a 0.78-25µM concentration range of resveratrol. IC50 were 120,1±5,7 µM; 85,2±6,4 µM; 105,9±7,1 µM for 48, 72, 96 hours, respectively. Conclusion: Within the limitations, it can be concluded that 0.78-25µM concentration range of resveratrol doesn’t have negative effect on fibroblast viability.

___

  • 1. Demmer RT, Papapanou PN. Epidemiologic patterns of chronic and aggressive periodontitis. Periodontol 2000 2010; 53: 28-44
  • 2. Chapple IL. Reactive oxygen species and antioxidants in inflammatory diseases. J Clin Periodontol 1997; 24: 287-296
  • 3. Muniz FW, Nogueira SB, Mendes FL, Rosing CK, Moreira MM, de Andrade GM, Carvalho Rde S. The impact of antioxidant agents complimentary to periodontal therapy on oxidative stress and periodontal outcomes: A systematic review. Arch Oral Biol 2015; 60: 1203-1214
  • 4. Miyasaki KT. The neutrophil: mechanisms of controlling periodontal bacteria. J Periodontol 1991; 62: 761-774
  • 5. Gustafsson A, Asman B. Increased release of free oxygen radicals from peripheral neutrophils in adult periodontitis after Fc delta-receptor stimulation. J Clin Periodontol 1996; 23: 38-44
  • 6. Enwonwu CO. Cellular and molecular effects of malnutrition and their relevance to periodontal diseases. J Clin Periodontol 1994; 21: 643-657
  • 7. Waddington RJ, Moseley R, Embery G. Reactive oxygen species: a potential role in the pathogenesis of periodontal diseases. Oral Dis 2000; 6: 138-151
  • 8. D’Aiuto F, Nibali L, Parkar M, Patel K, Suvan J, Donos N. Oxidative stress, systemic inflammation, and severe periodontitis. J Dent Res 2010; 89: 1241-1246
  • 9. Levy Y. Oxidative stress, antioxidants and periodontal disease. Arch Oral Biol 2015; 60: 1461-1462
  • 10. Iwasaki M, Moynihan P, Manz MC, Taylor GW, Yoshihara A, Muramatsu K, Watanabe R, Miyazaki H. Dietary antioxidants and periodontal disease in community-based older Japanese: a 2-year followup study. Public Health Nutr 2013; 16: 330-338
  • 11. Yagan A, Kesim S, Liman N. Effect of low-dose doxycycline on serum oxidative status, gingival antioxidant levels, and alveolar bone loss in experimental periodontitis in rats. J Periodontol 2014; 85: 478-489
  • 12. Sedlak L, Wojnar W, Zych M, WygledowskaPromienska D, Mrukwa-Kominek E, KaczmarczykSedlak I. Effect of Resveratrol, a Dietary-Derived Polyphenol, on the Oxidative Stress and Polyol Pathway in the Lens of Rats with StreptozotocinInduced Diabetes. Nutrients 2018; 10: 1423
  • 13. Weiskirchen S, Weiskirchen R. Resveratrol: How Much Wine Do You Have to Drink to Stay Healthy? Adv Nutr 2016; 7: 706-718
  • 14. Alles A, Alley K, Barrett JC, Buttyan R, Columbano A, Cope FO, Copelan EA, Duke RC, Farel PB, Gershenson LE, et al. Apoptosis: a general comment. FASEB J 1991; 5: 2127-2128
  • 15. Fontecave M, Lepoivre M, Elleingand E, Gerez C, Guittet O. Resveratrol, a remarkable inhibitor of ribonucleotide reductase. FEBS Lett 1998; 421: 277-279
  • 16. Bertelli AA, Giovannini L, Stradi R, Urien S, Tillement JP, Bertelli A. Evaluation of kinetic parameters of natural phytoalexin in resveratrol orally administered in wine to rats. Drugs Exp Clin Res 1998; 24: 51-55
  • 17. Kopp P. Resveratrol, a phytoestrogen found in red wine. A possible explanation for the conundrum of the ‘French paradox’? Eur J Endocrinol 1998; 138: 619-620
  • 18. Zhang Y, Jayaprakasam B, Seeram NP, Olson LK, DeWitt D, Nair MG. Insulin secretion and cyclooxygenase enzyme inhibition by cabernet sauvignon grape skin compounds. J Agric Food Chem 2004; 52: 228-233
  • 19. Lin JK, Tsai SH. Chemoprevention of cancer and cardiovascular disease by resveratrol. Proc Natl Sci Counc Repub China B 1999; 23: 99-106
  • 20. Olas B, Wachowicz B, Saluk-Juszczak J, Zielinski T. Effect of resveratrol, a natural polyphenolic compound, on platelet activation induced by endotoxin or thrombin. Thromb Res 2002; 107: 141- 145
  • 21. Savaskan E, Olivieri G, Meier F, Seifritz E, WirzJustice A, Muller-Spahn F. Red wine ingredient resveratrol protects from beta-amyloid neurotoxicity. Gerontology 2003; 49: 380-383
  • 22. Marambaud P, Zhao H, Davies P. Resveratrol promotes clearance of Alzheimer’s disease amyloidbeta peptides. J Biol Chem 2005; 280: 37377-37382
  • 23. Casati MZ, Algayer C, Cardoso da Cruz G, Ribeiro FV, Casarin RC, Pimentel SP, Cirano FR. Resveratrol decreases periodontal breakdown and modulates local levels of cytokines during periodontitis in rats. J Periodontol 2013; 84: 58-64
  • 24. Casarin RC, Casati MZ, Pimentel SP, Cirano FR, Algayer M, Pires PR, Ghiraldini B, Duarte PM, Ribeiro FV. Resveratrol improves bone repair by modulation of bone morphogenetic proteins and osteopontin gene expression in rats. Int J Oral Maxillofac Surg 2014; 43: 900-906
  • 25. Correa MG, Absy S, Tenenbaum H, Ribeiro FV, Cirano FR, Casati MZ, Pimentel SP. Resveratrol attenuates oxidative stress during experimental periodontitis in rats exposed to cigarette smoke inhalation. J Periodontal Res 2019; 54: 225-232
  • 26. Ribeiro FV, Pino DS, Franck FC, Benatti BB, Tenenbaum H, Davies JE, Pimentel SP, Casarin RC, Cirano FR, Casati MZ. Resveratrol Inhibits Periodontitis-Related Bone Loss in Rats Subjected to Cigarette Smoke Inhalation. J Periodontol 2017; 88: 788-798
  • 27. Göktas HG, Göktas HG, Bacanli M, Kutluk B, Basaran AA, Baþaran N. Cytotoxic Activity of Resveratrol in Dýfferent Cell Lýnes Evaluated by MTT and NRU Assays. Turk J Pharm Sci 2016; 13: 109-118
  • 28. Chang CC, Lin KY, Peng KY, Day YJ, Hung LM. Resveratrol exerts anti-obesity effects in high-fat diet obese mice and displays differential dosage effects on cytotoxicity, differentiation, and lipolysis in 3T3-L1 cells. Endocr J 2016; 63: 169-178
  • 29. Saczko J, Dominiak M, Kulbacka J, Chwiłkowska A, Krawczykowska H. A simple and established method of tissue culture of human gingival fibroblasts for gingival augmentation. Folia Histochem Cytobiol. 2008;46: 117-119.
  • 30. Berardi V, Ricci F, Castelli M, Galati G, Risuleo G. Resveratrol exhibits a strong cytotoxic activity in cultured cells and has an antiviral action against polyomavirus: potential clinical use. J Exp Clin Cancer 2009; 28: 96
  • 31. Babich H, Reisbaum AG, Zuckerbraun HL. In vitro response of human gingival epithelial S-G cells to resveratrol. Toxicol Lett 2000; 114: 143-153
  • 32. Shahidi M, Vaziri F, Haerian A, Farzanegan A, Jafari S, Sharifi R, Shirazi FS. Proliferative and Anti-Inflammatory Effects of Resveratrol and Silymarin on Human Gingival Fibroblasts: A View to the Future. J Dent 2017; 14: 203-211
  • 33. de la Lastra CA, Villegas I. Resveratrol as an antioxidant and pro-oxidant agent: mechanisms and clinical implications. Biochem Soc Trans 2007; 35: 1156-1160
Ege Üniversitesi Diş Hekimliği Fakültesi-Cover
  • ISSN: 1302-7476
  • Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
  • Başlangıç: 1979
  • Yayıncı: Ege Üniversitesi
Sayıdaki Diğer Makaleler

Elektrokimyasal metodla anodize edilmiş bireysel abutmentlerin siman bağlantılarının karşılaştırmalı araştırılması

Büşra Sultan DOĞAN, Tomurcuk ÖVÜL KÜMBÜLOĞLU

Salivary Resistin and TNF-α Levels in Different Periodontal Diseases

Beral AFACAN, Zeynep Pınar KELEŞ YÜCEL, Çiğdem YENİSEY, Nejat NİZAM, Gülnur EMİNGİL

Türkiye'de diş hekimliği okulu öğrencileri arasında tütün içme oranı

Ülkü BAŞER, Müge LÜTFİOĞLU, Zekeriya TAŞDEMİR, Ebru OLGUN, Leyla KURU, Önder GÜRLEK, Arzu BEKLEN, Güliz N GÜNCÜ, Sema S HAKKI, Mehmet C HAYTAÇ, Pınar MERİÇ, Burcu ÖZDEMİR

Ağız Gargaralarının Diş Dokusu ve Feldspatik Seramik Restorasyonlarda Oluşturduğu Renk Değişikliklerinin Değerlendirilmesi

Akın ALADAĞ, Makbule Heval ŞAHAN, Rahime TÜZÜNSOY AKTAŞ, Niler ÖZDEMİR AKKUŞ

Kanin veya Lateral Diş Bölgesine Yerleştirilen Dental İmplantların Sonlu Elemanlar Analizi ile Karşılaştırılması

Efe Can SİVRİKAYA, Mehmet Sami GÜLER, Muhammed Latif Bekçi

Lazer sinterleme ve döküm metal-seramik restorasyonların seramik kırıklarının değerlendirmesi: prospektif klinik çalışma

Işın ÇALIŞKAN, Yurdanur UÇAR, Orhun EKREN

Farklı Resveratrol Konsantrasyonlarının Gingival Fibroblastlardaki Hücre Canlılığına Etkisi

Yasemin SEZGİN, Mehtap BİLGİN ÇETİN, Özlem Nilgün ALPTEKİN, Şule BULUT, Özlem DARCANSOY İŞER, Yunus Kasım TERZİ

Farklı Periodontal Hastalıklarda Tükürük Resistin ve TNF-α Seviyeleri

Beral AFACAN, Çiğdem YENİSEY, Gülnur EMİNGİL, Nejat NİZAM, Zeynep Pınar KELEŞ YÜCEL

Beyaz nokta lezyonlarının tedavi yöntemleri

İnci KIRMIZIGÜL, Gülsüm DURUK

The ceramic fracture evaluation of metal-ceramic restorations fabricated by casting and laser sintering: a prospective clinical study

Orhun EKREN, Işın ÇALIŞKAN, Yurdanur UÇAR