Aydın GÜREL, Tahsin YEŞİLDERE, Burak KUŞÇU, S. Seçkin ARUN

Tavuklarda spontan Marek hastalığının histopatolojik ve immunoperoksidaz yöntemle tanısı üzerine çalışmalar

Çalışmada ülkemizde tavukçuluk yapılan her bölgede görülen ve ekonomik kayıplar oluşturan, Marek hastalığından şüpheli kümeslerden alınan ölü veya canlı tavukların nekropsileri sonucunda, alınan organlarda hem histopatolojik incelemeler yapıldı, hem de immunoperoksidaz boyama ile direkt antijen arandı ve sonuçlara göre hastalığın kesin tanısı konuldu. Ayrıca immunoperoksidaz boyama sonuçlarına göre histopatolojik sonuçların doğruluğu belirlendi. Çalışmanın materyalini istanbul, Adapazarı, Bolu ve Balıkesir illeri ve çevresindeki tavuk çiftliklerindeki Marek hastalığından şüpheli tavuklardan alınan değişik organlar oluşturdu. Bu amaçla 50 tavuk incelendi. Alınan organlardan hazırlanan kesitler histopatolojik incelemeler için rutin işlemlerden geçirilip Hematoksilen-Eozin ile, immunohistolojik incelemeler için de işaretli StreptAvidin-Biotin Peroksidaz (LSAB) yöntemi ile boyanarak ışık mikroskobunda incelendi. Marek hastalığı şüpheli tavukların histopatolojik incelemelerinde, başta karaciğer olmak üzere böbrek, dalak, proventrikulus, N. ischiadicus'ta değişik yoğunlukta atipik lenfoid hücre infiltrasyonları ve b. Fabricius'ta ise interfolliküler alanlarda retikulum hücreleri ve epiteloid-histiyositik seriden hücre infiltrasyonları ve folliküllerde kist oluşumuyla karakterize değişimler saptandı. İmmunoperoksidaz boyamalarda ise, lezyonların geliştiği karaciğer, dalak, böbrek, proventriculus, b. Fabricius gibi organlarda çoğunluğu intrasitoplazmik, tek tuk de intranükleer yerleşimli çok sayıda antijen pozitif boyanmalar saptandı. Sonuç olarak, Marek şüpheli olarak değerlendirilen 24 olgunun immunoperoksidaz boyanmasında, 17 adedinin Marek pozitif olduğu saptandı. Histopatolojik incelemede Marek hastalığı tanısı konulan 26 olgudan 21 adedinin immunoperoksidaz boyanması sonucunda ise bunların sadece 18 adedinin Marek pozitif olduğu tespit edildi.

Studies on the diagnosis of spontaneous Marek's disease of chickens by histopathological and immunoperoxidase methods

In this study, organ and tissue samples were collected for routine histopathological examinations and also for the detection and definitive diagnosis of Marek's disease (MD) viral antigens by the Labeled StreptAvidin-Biotin Peroxidase (LSAB) method during post-mortem examinations of dead or sacrificed hens. The chickens were taken from various sites located in regions of intensive poultry production in Turkey. This disease is quite frequently encountered in Turkey and is still one of the major causes of economic losses in the poultry industry. The material of this study was composed of various organ samples collected from MD-suspected hens from various houses located within or around Istanbul, Adapazarı, Bolu and Balıkesir. Fifty hens were examined for the suspected disease. Sections prepared from collected organs or tissues were processed for both routine histopathological examinations and also for immunohistochemical evaluations under light microscope by the LSAB method. Lymphoid cell infiltrations of various sizes were observed, particularly in the liver and to a lesser extent in the kidney, spleen, proventricle and sciatic nerves. Various changes such as cell infiltrations through interfollicular areas and cyst formations in the follicular areas of the bursa of Fabricius were determined in the histopathological examinations of some of the samples of birds suspected of MD. In immunoperoxidase stained slides of birds suspected of MD, intracytoplasmic and less frequently intranuclear stainings were detected in a majority of antigen-positive cells. In conclusion, in 24 cases suspected of MD in routine histopathological examinations, 17 were positive. Moreover, of 21 immunoperoxidase stainings of 26 cases diagnosed as having MD by routine histopathology, only 18 were verified to be positive.

PDF

___

Ademoğulları, N., Gürel, A., Çelik, M.: Piliçlerde. Görülen Marek Olgularının Histopatolojik Yöntemlerle Teşhisi. Pendik. Mikrobiyol. Derg. 1993; 24: 81-89.
Arda, M., Mimbay, A., Aydın, N., Akay, Ö., İzgür, M.: Gumboro Hastalığı. Kanatlı Hayvan Hastalıkları. Pfizer İlaçları. İstanbul. 1990.
Başkaya, H., Mimbay, A.: Marek Hastalığı. A.Ü. Vet. Fak. Yay.: 354, Ders Kitabi: 252, Sayfa: 229-243, 246-252. Ankara. 1974.
Gürel, A., Yeşildere, T.: Civcivlerde Deneysel Olarak Oluşturulan Gumboro Hastalığında bursa Fabricius Lezyonları. İ.Ü. Vet. Fak. Derg., 1992; 19: 197-211.
Jakowski, R.M., Fredrickson, T.M., Luginbuhl, R.E., Hemboch, C.F.: Early Changes in bursa of Fabricius from Marek's Disease. Avian Dis. 1969; 13:215-222.
Atılgan, T., Yeşilada, I.: Marek Hastalığından Korunma. Bornova Vet. Araşt. Enst. Derg. 1971; 23: 17-31.
Çetin, İ.: İzmir Yöresinde Tavuklarda Marek Hastalığı ve Patolojik Karekteristikleri. Hayv. Aşıları Kont. Merkz. Derg. 1993; 17: 78- 104
Jordan, F.T.W.: Poultry Diseases. 3rd ed., 96-105, 177-181. Bailliere Tindall. London/England. 1990.
Kutsal, 0.: Bursa Yöresi Tavuklarında Görülen Marek Hastalığının Teşhisinde Deri ve İç Organ Bulguları Üzerinde Floresan Antikor ve Histolojik Yöntemler Kullanarak Yapılan Araştırmalar. A.Ü. Vet. Fak. Derg., 1989; 36: 15-39.1
Gimeno, B.T., Witter, R.L., Reed, W.M.: Four Distinct Neurologic Syndromes in Marek's Disease: Effect of Viral Strain and Pathotype. Avian Dis. 1999; 43: 721-737.
Heier, B.T., Jarp, J.: Risk Factor for Marek's Disease and Mortality in White Leghorns in Norway. Prev. Vet. Med. 2000; 44: 153-165.
Calnek, B.W., Witter, R.L.: Marek's Disease, Disease of Poultry. Ninth Edition. Iowa State University Press. 342-385. Iowa. 1992.
Ubertini, T., Calnek, B.W.: Marek's Disease Herpes Virus in Peripheral Nerve Lesions. J. Natl. Cancer Inst. 1970; 45: 507- 514.
Aksoy, E.: Kanatlılarda Marek Hastalığı ve Bursal Lezyonlar. Etlik Vet. Mikrobiyol. Derg. 1992; 7; 1-13.Fujimoto, Y. Okada, K., Kakihata, K., Matsui, T., Narita, M.,Onuma, M., Mikama, T.: Initial Lesions in Chickens Infected with JM Strain of Marek's Disease Virus. Jpn. J. Vet. Res. 1974; 22: 80-94.
Gürel, A., Yeşildere, T.: Civcivlerde Deneysel Olarak Oluşturulan Marek Hastalığında bursa Fabricius Lezyonları. İ.Ü. Vet. Fak. Derg. 1992; 19: 183-195.
Jani, P.B., Ghodasara, D.J., Khana, K., Prajapati, K.S.: Pathological and Serological Studies on Natural Outbreaks of Acute Marek's Disease in Chickens (Visceral) Indian Vet. J. 1993; 70: 108-112.
Köküuslu, C, Özkul, İ.A., Alçığır, G.: Tavukların Lenfoid Leukosiz, Retiküloendotheliosis ve Marek Hastalıklarının Ayrımsal tanımında Uygulanan Histopatolojik Yöntemlerle İmmunfloresan Tekniği Sonuçlarının Karşılaştırılması. DOĞA TU Vet. Hay. D. 1989; 13: 180-190.
Aksoy, E.: Sığır Vebası Hastalığının Histolojik ve İmmunoperoksidaz Yöntemle Tanımı Üzerine Çalışmalar. Doktora Tezi. A.Ü. Sağlık Bilimleri Enstitüsü. 1997.
Can, A.: Uygulamalı İmmunositokimya Teknikleri Kursu Kitapçığı. A.Ü. Tıp Fakültesi Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, 8-10 Mayıs 1996, Ankara. 1996.
Jeurissen, S.H.M., Janse, E.M., Kok, G.L., De Boer, G.F.: Distribution and Function of Non-Lymphoid Cells Positive for Monoclonal Antibody CVI-ChNL-68.2 in Health Chickens and Those Infected with Marek's Disease Virus. Vet. Immunol. Immunopathol. 1989; 22: 123-133.
Bourgon, A.R., Charlton, K.M.: The demonstration of rabies antigen in paraffin embedded tissues using the peroxidase- antiperoxidase method. A comparative study. Can. J. Vet. Res. 1987;51: 117-120.
Cho, K.O., Ohashi, K., Onuma, M.: Electron Microscopic and Immunohistochemical Localisation of Marek's Disease (MD) Herpes Virus Particles in MD Skin Lymphomas. Vet. Pathol. 1999; 36: 314-320.
Cruz-Coy, J.S., Grambrone, J.J., Hoerr, F.J.: Immunohistochemical detection of infectious bursal disease virus in formalian-fixed, paraffin embedded chicken tissues using monoclonal antibody. Avian Dis. 1993; 37: 577-581.
Jeurissenr S.H.M., Scholten, R., Hilgers, L.A., Pol, J.M.A., De Boer, G.F.: In situ Detection by Monoclonal Antibody D-35.1 of Cells Infected with Marek's Disease Virus that Interact with Splenic Ellipsoid-Associated Reticulum Cells. Avian Dis.,-1989; 33: 657-663.
McNeilly, F., Allan, G.M., Moffet, D.A., McNultys, M.S.: Detection of Chicken Anaemia Agent by Immunofluorescence and Immunoperoxidase Staining. Avian Path. 1991; 20: 125-132.
Silva, R.F., Calvert, J.G, Lee, L.F.: A Simple Immunoperoxidase Plaque Assay to Detect and Quantitate Marek's Disease Virus Plaques. Avian Dis. 1995; 41: 528-534.
Calnek, B.W., Hitchner, S.B.: Localisation of Viral Antigen in Chickens Infected with Marek's Disease Herpes Virus. J. Natl. Cancer Inst. 1969; 43: 935-949.
Calnek, B.W., Ubertini, T. Adldinger, H.K.: Viral Antigen, Virus Particles and Infectivity of Tissues from Chickens with Marek's Disease. J. Natl. Cancer Inst. 1970; 45: 341-351.
Yamomato H., Yoshino, T.: Histopathologic Comparison of Marek's Disease with Avian Leucosis. Nat. Inst. Anim. Hlth. Quart. 1972; 12: 29-42.
Luna, L.G.: Manual of Histological Staining Methods of the Armed Forces Institute of Pathology, 3rd ed. McGraw Hill Book Company. 1968.
Swayne, D.E., Fletcher, O.J., Schierman, L.W.: Marek's Disease Virus-Induced Transient Paralysis in Chicken: Demonstration of Vasogenic Brain Oedema by Immunohistochemical Method. J. Comp. Path., 1989; 101: 451-462.
Witter, R.L., Gimeno, I.M., Reed, W.M., Bacon, L.D.: An Acute Form of Transient Paralysis Induced by Highly Virulent Strains of Marek's Disease Virus. Avian Dis. 1999; 43: 704-720.
Witter, R.L., Sharma, J. M.: Pathogenecity of Variant Marek's Disease Virus Isolants in Vaccinated and Unvaccinated chickens. Avian Dis. 1980; 24: 210-232.