Pınar KAYNAR, Meşküre CANBOLAT, Aynur POLAT, Mehmet BİNGÖL

Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 miktarının HPLC ile belirlenmesi

Amaç: Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 (riboflavin) miktarının tayinine yönelik floresans dedeksiyonu (FL/250-546 nm) ile kolay, spesifik ve duyarlı, yüksek basınçlı sıvı kromatografi (HPLC) yönteminin uygulanabilirliğini tespit etmektir. Yöntem: Toplam 48 adet enteral beslenme ürününün vitamin B2 miktarlarının belirlenmesi için HPLC yöntemi kullanılmıştır. Kromatografik sistem; C-18 kolon (250x4,60-5micron) ve 250-546 nm'ye ayarlı floresans dedektör kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Mobil faz olarak 1 ml/dk akış hızında hekzansülfonik asit sodyum tuzu içeren tamfton ve metanol (% 75:25) kullanılmıştır. İstatiksel değerlendirme, iki eş arasındaki farkın önemlilik testine göre yapılmıştır. Bulgular: B2 vitaminin alıkonma süresi yaklaşık 14 dakika olarak saptanmıştır. Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 miktarları ise 0,11 -0,40 mg/100 mi arasında tespit edilmiştir. Bu tespit edilen değerlerin, ürün etiketlerindeki değerlere uygunluk gösterdiği belirlenmiştir. Sonuç: Enteral beslenme ürünlerindeki vitamin B2 miktarlarının belirlenmesinde HPLC-FL (HPLC-Floresans Dedektör) kullanılabileceği görülmüştür. Ayrıca bu metodun duyarlı, uygulama süresi ve kolaylığı açısından avantajlı bir yöntem olduğu da düşünülmüştür.

Quantitative determination of vitamin B2 by HPLC in enteral nutritional products

Objective: The aim of this study is to determine the applicability of fluorescence detection (FL/250-546 nm) method by the simply, specific and sensitive high pressure liquid chromatography (HPLC) for quantitative estimation of vitamin B2 (riboflavin) levels in enteral nutritional products.Method: HPLC method was used for quantitative determination of vitamin B2 in total 48 enteral nutritional products. The chromatographic system was done on a C18 column (250x4,60-5micron) with fluorescence detection at 250-546 nm. Buffer containing hexanesulphonic acid sodium salt and methanol (75:25) was used as the mobile phase at a flow rate of 1 ml/min. The results were evaluated using the paired samples test. Results: The retention time of vitamin B2 was determined as ca. 14 min. The concentration of vitamin B2 of enteral nutritional products ranged from 0.11 to 0.40 mg/100 ml. The determined values showed similarity with the labelling values of the products. Conclusion: It was showed that HPLC-FL (HPLC-Fluorescence Detector) can be applied for the quantitative determination of vitamin B2 levels in enteral nutritional products. This had the advantages of improved simplicity, sensitivity and shorter application times.

PDF

___

1. Anonymous. 05.06.2004 tarih ve 25483 sayılı T.C. Başbakanlık, Resmi Gazete'de yayımlanan Gıdaların Üretimi, Tüketimi ve Denetlenmesine Dair Kanun Hükmünde Kararnamenin Değiştirilerek Kabulü Hakkında 5179 sayılı Kanun.
2. Geçim E, Bunin C. Enteral beslenme. Tıp Bilimleri Dergisi,1995; 15(2): 111-113.
3. Balcı D, Genç V, Demirer S, Aydıntuğ S. Total nütrisyon tedavisinde farmakolojik etkileşmeler. www.kepan.org.tr/farmakolojik-etk.asp., 2007.
4. Deuthsch MJ. Vitamins and other nutrients. In: Cunniff P, ed. Official Methods of Analysis of A0AC International. 16th Edition, Volume II. Virginia-USA. AOAC International Suite Wilson Boulevard Arlington, 1995; 1 -79.
5. Polanuer BM, Dedova 0A, Gasparov VS. Comparison of various methods of quantitative determination of riboflavin in the culture fluid of producer strains. Russ Biotechnol, 1996; (6): 30-35.
6. Oetles S. Comparative determination of vitamin B, and B2 in foods by means of various enzyme preparations. Z Lebensm Forsch, 1991; 193(4): 347-350.
7. Torres-Sequeiros RA, Garcia-Falcon M, Simal Gandara J. Analysis of fluorescent vitamins riboflavin and pyridoxine in beverages with added vitamins. Chromatographia, 2001; 53 (Suppl.): 236-239.
8. Zafra-Gomez A, Garballo A, Morales JC, Garcia-Ayuso LE. Simultaneous determination of eight water-soluble vitamins in supplemented foods by liquid chromatography. J Agr Food Chem, 2006; 54(13): 4531-
9. Woollard DC, Indyk HE. Rapid determination of thiamine, riboflavin, pyridoxine and niacinamide in infant formulas by liquid chromatography. J AOAC Int, 2002; 85(4): 945-951.
10.Barna E. Comparison of data obtained by HPLC and microbiological determination of riboflavin in ready-to-eat foods. Acta Aliment Hung, 1992; 21(1): 3-9.
11.Vinas P, Balsalobre N, Lopez-Erroz C, Hernandez-Cordoba M. Liquid chromatqgraphic analysis of riboflavin vitamers in foods using fluorescence detection. J Agr Food Chem, 2004; 52(7): 1789-1794.
12. Sümbüloğlu K, Sümbüloğlu V. Biyoistatik. 9. Baskı. Ankara: Hatiboğlu Yayınevi, 1990:117.
13. Heudi O, Kilinc T, Fontannaz P. Separation of water-soluble vitamins by reversed-phase high performance liquid chromatography with ultra-violet detection: application to polyvitaminated premixes. J Chromatogr A, 2005; 1070 (1-2): 49-56.
14.Ndaw S, Bergaentzle M, Aoude-Wemer D, Hasselmann C. Extraction procedures for the liquid chromatographic determination of thiamin, riboflavin and vitamin B6 in food stuffs. Food Chem, 2000; 71:129-138.
15. Friel JK, Bessie JC, Belkhode SL, Edgecombe C, Steele-Rodway M, Downton G, Gin Kwa P, Aziz K. Thiamine, riboflavin, pyridoxine and vitamin C status in premature infants receiving parenteral and enteral nutrition. J Pediatr Gastr Nutr, 2001; 33: 64-69.