Kromatografiye Giriş, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografi Kullanımında Basit İpuçları
Tıbbi Laboratuvardan ilaç sanayiine, gıdadan veterinerlik,ziraate; kimyadan çeşitli sanayii dallarına kadar çok geniş biryelpazede kullanım alanı bulan kromatografi; ölçüm, ayrıştırmave saflaştırma gibi değişik amaçlar için kullanılmaktadır. Farklıalanlarda ve çeşitli yöntemlerle kullanılan kromatografininen önemli, etkin ve yaygın kullanım alanına sahip olanı iseLikit Kromatografi temeline dayanan yüksek performanslı sıvıkromatografisi (HPLC) ve Sıvı Kromatografi-Kütle Spektrometri(LC-MS/MS) cihazlarıdır.Kromatografi bir karışım içerisindeki bileşikleri birbirindenayırmak ve maddeleri saflaştırmak için kullanılan bir yöntemdirve ana amacı hedeflediğimiz numunenin ayrımının yapılması vemiktarının ölçülmesidir. Bu yöntem, çeşitli maddelerin, hareketlibir faz yardımıyla, sabit bir faz üzerinde, değişik hızlarla hareketetmeleri veya sürüklenmeleri esasına dayanır.Bu derlemedeki amacımız kromatografiye giriş, kromatografikyöntemlere genel bir bakış, ardından HPLC ve LC-MS/MScihazlarını tanıtmak ve kısa bir örnek ile metot geliştirme basamağıhakkında bilgi vermek, HPLC ve LC-MS/MS cihazlarıyla çalışmayaparken, metot geliştirirken araştırmacılara ve teknikerlere yolgöstermektir.
Anahtar Kelimeler:
Kromatografi, HPLC, LC-MS/MS
Introduction to Chromatography, Basic Working Tips for High Performance Liquid Chromatography
Chromatography that finds usage in a wide range of fields frommedical laboratories to the pharmaceutical industry, from food toveterinary medicine, agriculture, chemistry to different industrialbranches; is used for various purposes such as measurement,separation and purification. The most important, effective andcommon use of chromatography by various methods for differentfields is liquid chromatography which is based on high performanceliquid chromatography (HPLC) and LC-MS/MS devices.Chromatography is a method used to separate and purify thecompounds in a mixture. The main aim of chromatography isseparation and measurement of the amount of our target sample.This method is based on the principle of moving or drifting thevarious materials at different speeds on a stationary phase by amobile phase.The purpose of this article is to introduce an overview ofchromatographic methods, followed by introduction of bydescending to the basics of HPLC and to give brief informationabout a sample analysis and method development step. We hopethat this article will shed light for researchers and techniciansin developing methods and working at HPLC and LC-MS / MSinstruments.
Keywords:
Chromatography, HPLC, LC-MS/MS,
___
- 1. Yıldız A, Genç Ö, Bektaş S. Enstrümental Analiz Yöntemleri. Hacettepe Üniversitesi Yayınları. Ankara. 1997.
- 2. Burtis CA, Ashwood RA, Çeviri Editörü: Prof.Dr.Diler Aslan. Tietz Klinik Kimyada Temel İlkeler, 5.Baskıdan Çeviri (Palme). 2007
- 3. Skoog DA, Holler FJ, Nieman TA. Çeviri Editörleri:Kılıç E, Yılmaz H. Enstrümantal Analiz İlkeleri. 6. Baskıdan çeviri. Bilim yayıncılık, Ankara
- 4. Pathy KS ,Murthy YLN, Sunithasarma, Ramaiah A. Basıc Skılls Traınıng Guıde – HPLC method development and validation – an overview
- 5. Pathy KS. How to Start Analytıcal Method Development
- 6. Fırat Üniversitesi Fen Fakültesi Kimya Bölümü. Enstrumental Analiz Laboratuvarı Deney Föyü. 2013
- 7. Prof. Dr. Ulvi Reha Fidanci. Kromatografi. Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi. http://ulvireha.fidanci.org/kromatografi/
- 8. İşlekel H. LC-Tandem MS-MRM Temel Araştırma ve Klinik Laboratuvarda Kullanım. Dokuz Eylül Üniversitesi Tıp Fakültesi. 2011 (http://www.turkbiyokimyadernegi.org.tr/ dosyalar/belgeler/kongre/huray-islekel.pdf)
- 9. Biberoğlu G. Kütle Spektrometresi ve Tıp Alanında Kullanımı. T Klin Tıp Bilimleri 2003, 23:491-498
- 10. Aguilar, M.I. (2004). HPLC of Peptides and Proteins Methods and Protocols. Totowa, New Jersey: Humana Press Inc.
- 11. Snyder, L.R., Kirkland, J.J., Glajch, J.L. (2012). Practical HPLC Method Development (Second Edition). Canada: John Wiley & Sons, Inc.
- 12. Boyer R. Biochemistry Laboratory: Modern Theory and Techniques. Benjamin Cummings, San Francisco, A.B.D. 2009
- 13. Gault V. A. and McClenaghan, N. H. Understanding Bioanalytical Chemistry. Principles and Applications. Wiley-Blacwell, Fabulous Printers Pte. Ltd., Singapore, 2009
- 14. Reed R., Holmes D., Weyers J., Jones A. Practical Skills in Biomolecular Sciences. Second Edition, Pearson Education, 2003.
- 15. Boyer R. Concepts and Skills in the Biochemistry/Molecular Biology Lab. Biochemistry and Molecular Biology Education 31(2): 102–105, 2003
- 16. Büyüköztürk, Ş., Kılıç Çakmak E., Akgün, Ö. E., Karadeniz, Ş., ve Demirel, F.. Bilimsel Araştırma Yöntemleri, Ankara, Pegem A Yayıncılık, 2008.
- 17. Clark, I.M. (2001). Matrix Metalloproteinase Protocols. Totowa, New Jersey: Humana Press Inc.
- 18. Clark, I.M. (2010). Matrix Metalloproteinase Protocols (Second Edition). London: Springer Science+Business Media, LLC, Humana Press Inc.
- 19. Fernandez-Patron, C., Zouki, C., Whittal, R.M., Chan, J.S., Davidge, S.T., Filep, J. (2002). Methods for Analysis of Matrix Metalloproteinase Regulation of Neutrophil- Endothelial Cell Adhesion. Biol Proced Online, Oct 28;4:38-48.
- 20. Kotnik P, Krajnc MK, Pahor A, Finšgar M, Knez Ž. HPLC-MS/MS method optimisation for matrix metalloproteinase 3 and matrix metalloproteinase 9 determination in human blood serum using target analysis. J Pharm Biomed Anal. 2018 Feb 20;150:137-143.
- 21. Wang Y, Zagorevski DW, Lennartz MR, Loegering DJ, Stenken JA. Detection of in vivo Matrix Metalloproteinase Activity using Microdialysis Sampling and Liquid Chromatography-Mass Spectrometry. Anal Chem. 2009 Dec 15; 81(24): 9961–9971.
- Başlangıç: 2017
- Yayıncı: Marmara Üniversitesi
Sayıdaki Diğer Makaleler
Gebelikte Bitkisel Ürün Kullanımı
Kromatografiye Giriş, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografi Kullanımında Basit İpuçları
Burcu ESER, Aylin SEPICI DINÇEL
Nitel Araştırma Yöntemlerinden İz Sürme (Tracer) ve Kan Transfüzyonu Sürecinde Bir Uygulama Örneği
Ebelik Öğrencilerinin Bilgisayarlı Simülasyon Uygulaması Sonrası Görüşlerinin Değerlendirilmesi
Duygu MURAT ÖZTÜRK, Fatma Deniz SAYINER, Neşe ÇELİK
Sağlık Hizmetleri Meslek Yüksekokulu Öğrencilerinin Uygulamalı Derslere İlişkin Görüşleri