Sadık AKGÜN, Gülnur Tarhan, Hakan Sezgin Sayıner

Adıyaman ilinde kan kültürlerinden izole edilen brucella türlerinin identifikasyonu

Amaç: Brucellosis, Brucella cinsi bakterilerin neden olduğu tüm dünyada hem hayvanlarda hem de insanlarda yaygın olarak görülen zoonotik bir enfeksiyondur. Bu çalışmada, Adıyaman ilinde izole edilen Brucella cinsi bakterilerin türlerinin identifikasyonu yapılarak, biyotip dağılımı ve profillerinin belirlenmesi amaçlandı.Gereç ve Yöntem: Kan kültürlerinde Brucella cinsi bakteriler üreyen 40 hasta (22 erkek, 18 kadın) çalışmaya dahil edildi. Hasta örnekleri, kan kültürü için 10 gün boyunca inkübe edildi. Pozitif sinyal veren örnekler, %5 koyun kanlı agar besiyerine ekildi. 48 saat, 37°C’lik sıcaklıktaki bir inkübatörde üremesi sağlandı. Gram boyama ile Gram negatif kokobasil olarak tesbit edilenler için, serolojik doğrulama yapıldı. Kültür antibiyogram cihazı kullanılarak identifiye edildi. Genotiplendirilmeleri için, Polymerase Chain Reaction yöntemi, kullanılarak çalışıldı. Bulgular: Çalışmaya alınan 40 hastanın 22’si erkek, 18’i kadındı. İzole edilen bakterilerin tümü, tam otomatize kültür antibiyogram cihazı ile Brucella melitensis (B. melitensis) olarak saptandı. Biyovar tiplendirme çalışması, nedeni anlaşılamayan bir inhibisyondan dolayı, nükleik materyal amplifikasyonu başarısızlıkla sonuçlandı. Sonuçlar: Ülkemizde olduğu gibi ilimizde de insanlarda Bruselloz olgularının büyük çoğunluğunda etken olarak Brucella melitensis saptandı.

Anahtar Kelimeler:

Brucella melitensis, identifikasyon, kan kültürü

The identification of brucella species isolated from blood cultures in Adıyaman province

Aim: Brucellosis is a zoonotic infection that is common in both animals and humans all over the world, caused by Brucella bacteria. In this study, it was aimed to identify species of Brucella bacterial isolates isolated in Adıyaman province and to determine biotype distribution and profiles.Material and Methods: Fourty patients (22 males, 18 females) that Brucella grew in their blood cultures, were included in the study. Patient samples were incubated for 10 days for blood culture. Positive signaling samples were plated on 5% sheep blood agar medium. Then, they were incubated for 48 hours at 37 °C. For those who were identified as Gram negative coccobacilli, using by Gram staining, serologic confirmation was performed. The bacterial strains were identified using an antibiogram device. For the genotyping, the Polymerase Chain Reaction method was used.Results: Of the 40 patients included in the study, 22 were male and 18 were female. All of the isolated bacteria were detected as B. melitensis with fully automated culture antibiogram device. The biovar studying failed due to an unknown inhibition in the amplification of the nucleic acid material. Conclusion: As in our country, B. melitensis was detected as the causative factor in the majority of cases of brucellosis in humans, in our province too.

Keywords:

Brucella melitensis, identification, blood culture,

PDF

___

1. Bilgehan H: Klinik Mikrobiyoloji Ozel Bakteriyoloji ve Bakteri Enfeksiyonları. 199-204, 10. Baskı, Barıs Yayınları, Fakulteler Kitabevi, İzmir, 2000. 2. Gotuzzo E, Cellillo C. Brucella. In: Gorbach SL, Bartlett JG, Blacklow NR (eds). Infectious Diseases. 2nd Edition. W.B. Saunders Co., Philadelphia, 1992; 1513- 1521. 3. Yuce A, Alp Cavus S. Brucellosis in Turkey. A review. Klimik Journal 2006;19:87–97. 4. Lindquist D, Chu MC and Probert WS. (Ceviren Z.Cetinkaya): Francisella ve Brucella, “Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Landry ML, Pfaller MA (eds) (Ceviri ed: A.Basustaoğlu): Klinik Mikrobiyoloji, 9.baskı, s.815-834, Atlas Kitapcılık, Ankara 2009. 5. Kose S, Kilic S and Ozbel Y: Identification of Brucella species isolated from proven brucellosis patients in Izmir, Turkey, J Basic Microbiol; 45(4): 323-327, 2005. 6. Cerekci A, Kilic S, Bayraktar M, Uyanik MH, Ekrem Yasar E, Esen B. Comparison of Conventional Methods and Real-Time Multiplex Polymerase Chain Reaction for Identification and Typing of Brucella Isolates of Human Origin. Mikrobiyol Bul 2011; 45(3): 392-400) 7. Hall WH: Modern chemotherapy for brucellosis in humans, Rev Infect Dis; 12(6): 1060-1099, 1990. 8. Ozsut H: Bruselloz tedavisi. Klimik Derg; 3(1): 26-29, 1990. 9. Rolain JM, Maurin M and Raoult D: Bactericidal effect of antibiotics on Bartonella and Brucella spp.: clinical implications, J Antimicrob Chemother; 46(5): 811- 814, 2000. 10. Anğ O ve Yumuk Z: Bruselloz. Cev: Madkour’s Brucellosis. Ed: M.M.Madkour, Nobel Tıp Kitabevleri, İstanbul, 2008. 11. Smith LD and Ficht TA: Pathogenesis of Brucella. Crit Rev Microbiol; 17: 209-230, 1990. 12. Morata P, Queipo-Ortuno MI, Reguera JM, Miralles F, Lopez-Gonzalez JJ and Colmenero JD: Diagnostic yield of a PCR assay in focal complications of brucellosis, J Clin Microbiol. 2001; 39(10): 3743-3746 13. Bricker BJ, Ewalt DR and Halling SM: Brucella 'HOOF-Prints': strain typing by multi-locus analysis of variable number tandem repeats (VNTRs), BMC Microbiol.; 11(3): 15, 2003. 14. Coppola N: New diagnostic frontiers in brucellosis, Infez Med; 9(3): 130- 136, 2001. 15. Eşel D, Sümerkan B, Ayangil D, Telli M. Brucella melitensıs suşlarının antibiyotik duyarlılıklarının belirlenmesinde agar dilüsyon ve e-test yöntemlerinin karşılaştırılması. ANKEM Derg 2004;18(4):196-199. 16. Navarro E, Casao MA, Solera J. Diagnosis of human brucellosis using PCR. Expert Rev Mol Diagn 2004; 4(1): 115-23. 17. Cengiz AT ve Dolapcı Gİ: Brucella’ların ozellikleri ve brusellozda tanı yontemleri, Ankara U Tıp Fak Mec; 50(1): 41-46, 1997. 18. Aktas O: Brusellozda Mikrobiyolojik Tanı, ANKEM Derg; 17(3): 336-339, 2003. 19. Young EJ. Brucella species. In: Mandel Gl, Bennet JE, Dolin R. Principles and Practice of Infectious Diseases. Churchill Livingstone. Philadelphia, 2000; 2386-2393. 20. Sozen TH. Bruselloz. In “İnfeksiyon Hastalıkları ve Mikrobiyolojisi” Ed. Willke Topcu A, Soyletir G, Doğanay M. 486-91, Nobel Tıp Kitabevleri, İstanbul, 1996. 21. Kılıc D, Kurt H, Sozen TH ve Kandilci S: Kan Kulturlerinden izole edilen Brucella cinsi bakterilerin antibiyotiklere duyarlılıkları ve klinik yönünden değerlendirilmesi, İnfeksiyon Derg; 8(1-2): 59-62, 1994. 22. Cekovska Z, Petrovska M, Jankoska G, Panovski N, Kaftandzieva A. Isolation, identification and antimicrobial susceptibility of brucella blood culture isolates. Prilozi. 2010;31(1):117-32. 23. Zahidi JM, Yong TB, Hashim R, Noor AM, Hamzah SH, Ahmad N. Identification of Brucella spp. isolated from human brucellosis in Malaysia using high-resolution melt (HRM) analysis. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 81 (2015) 227–233 24. Mustafa AS, Habibi N, Osman A, Shaheed F, and Khan MW. Species identification and molecular typing of human Brucella isolates from Kuwait. PLoS One. 2017; 12(8): e0182111. 25. Simsek H, Erdenlig S, Oral B, Tülek N. İnsan Kaynaklı Brucella izolatlarının Tip-Biyotip Tayini ve Epidemiyolojik Olarak irdelenmesi. Klimik Derg 2004; 17(2):103-106 26. Mugizi DR, Muradrasoli S, Boqvist S, Erume J, Nasinyama GW, Waiswa C, Mboowa G, Klint M, and Magnusson U. Isolation and Molecular Characterization of Brucella Isolates in Cattle Milk in Uganda. Biomed Res Int. 2015; 2015: 720413.