Preadipositlerde (3T3-L1) Östrojenin Adiposit Diferansiyasyonu Üzerine Etkisi: Rho/Rho-kinaz Yolağının Olası Katkısı
Türkçe Özet: Amaç: Bu çalışmada estrojenin, preadipositlerin (3T3-L1) olgun yağ hücrelerine diferansiyasyonuna olan etkilerinin incelenmesi ve ayrıca bu etkilere, eğer varsa, Rho/Rho kinaz yolağının katkısını araştırılması amaçlandı. Yöntem: 3T3-L1 hücreleri kültür flasklarına ekilerek 37ºC\'de %5 CO2\'li ortamda inkübe edildi. Konfluent olan flasklar pasajlanarak çoğaltıldı. Estradiol 10-9, 10-8, 10-7, 10-6, 10-5 ve 10-4M konsantrasyonda 3T3-L1 hücrelerine 2 ve 8 gün boyunca uygulandı. 8. günde deney sonlandırıldı ve adiposit diferansiyasyonu Oil Red O boyama ile değerlendirildi. Oil Red uygulanmayan hücreler ise homojenize edilerek Western-Blot yöntemi ile RhoA, ROCK-1 ve ROCK-2 protein ekspresyon düzeyleri ölçüldü. Bulgular: 17β-estradiol diferansiyasyon sürecinin başlangıcında (2. günde) uygulandığında diferansiyasyonu azaltmaktadır. Buna karşılık 8 gün boyunca uygulandığında ise etkisiz bulunmuştur. Ayrıca 17β-estradiol RhoA, ROCK-1 ve ROCK-2 protein ekspresyon düzeylerini anlamlı olarak değiştirmedi. Sonuç: 17β-estradiol, preadiposit diferansiyasyon sürecine farklı zaman dilimlerinde farklı etkilerle katkı sağlamaktadır. Ancak, bu etki Rho/Rho-kinaz yolağı aracılı görünmemektedir.
Anahtar Kelimeler:
adiposit diferansiyasyonu; östrojen; rho-kinaz
Preadipositlerde (3T3-L1) Östrojenin Adiposit Diferansiyasyonu Üzerine Etkisi: Rho/Rho-kinaz Yolağının Olası Katkısı
Abstract Effects of Estrogen on Adipocyte Diferentiation in Preadipocyte Cell Line (3T3-L1): Possible Involvement of Rho/Rho-Kinase Signaling Aim: In this study, it was aimed to investigate potential effects of estrogen on the differantiation of preadipocytes (3T3-L1) to mature adipocytes and the possible involvement of Rho/Rho-kinase pathway in this matter. Method: 3T3-L1 cell suspensions were plated and incubated at 37oC under 5% CO2. Confluent flasks were passaged. Next, 3T3-L1 cells were treated with estradiol at various concentrations (10-9, 10-8, 10-7, 10-6, 10-5 and 10-4M) for a period of 0-2 and 0-8 days. The experiment was concluded on the day of 8. Adipocyte differentiation was assessed by lipid-specific Oil Red O staining. The Oil Red O nontreated cells were homogenized. Subsequently, RhoA, ROCK-1 and ROCK-2 protein expression levels in these cells were measured by Western-Blotting technique. Results: When applied in the beginning of the differentiation process (the 2nd day), 17β-estradiol decrease the differentiation. On the contrary, it becomes ineffective when applied for 8 days. In addition, 17β-estradiol did not significantly change ROCK-1, ROCK-2 and RhoA protein expression levels. Conclusion: 17β-estradiol, the main estrogenic hormone, has diverse effects on adipocyte differentiation at different stages of differentiation. However, this impact does not appear to be mediated via Rho/Rho-kinase pathway.
___
- Jafl'e T. Schwartz B. Leptin promotes motility and invasiveness in human colon cancer cells by activating multiple signal-transduction pathways. Int J Cancer ı123tl ”254356.
- Cooke PS. Heine PA, Taylor IA. Ltıbahn DB. The role of estrogen and estrogen receptor-0t in male adipose tissue. Mn Ce} Emior'rinui 53001379412): 147—54.
- Hong L. Colpan A. Peptan IA, Daw J, George A, Evans CA. "."-Beta estradiol enhances osteogenic and adipogenic differentiation of human adipose—derived stromal cells. Tissue Eng 2007:13(6):l [97-203.
- Heim M, Frank O. Kampmann G. Sochocky N. Pennimpede T. Fuchs P. Hunziker W. Weber P. Martin [. Bendik I. The phytoestrogen genistein enhances osteogenesis and represses adipogenic differentiation of human primary hone marrow stromal cells. Endocrinology 2004;l45(2):848-59.
- Okazaki R. Inoue D. Shibata M, Saika M. Kido S, Ooka H, Tomiyama H. Sakamoto Y, Matsumoto T. Estrogen promotes early osteoblast differentiation and inhibits adipoeyte differentiation in mouse bone marrow stromal cell lines that express estrogen receptor (ER) alpha or beta. Endocrinology 2002; l43(6'):2349—56.
- Giretti MS. Fıt XD. De Rosa G. Sarotto I. Baldacei C. Garibaldi S. Manuella P. Biglia N. Sismondi P, Genazzani AR, Simoneini T. Extra—nuclear signalling of estrogen receptor to breast cancer cytoskeletal remodelling. migration and invasion. PLUS ONE 2008;3(5):2790.
- Chrissobolis S. Budzyn K. Marley PD. Sohey CG. Evidence that estrogen suppresses Rhovkinasc function in the cerebral circulation in vivo. Stroke 2004;35(9):2200-5.
- LetrCtırrie YR. Monroe D, McIntosh MK. Dchydroepiandrosterone and related steroids alter 3T3—Ll preadipocyte proliferation and differentiation. Comp Biochem Physiol C Phnrrnneoi' Tarieol Endocrine ;123(1):l7-25. Kang SI. Ko HC. Shin HS. Kim HM. Hong YS. Lee NH. Kim SJ. Fucoxanthin exerts differing effects on 3T3—Ll cells according to differentiation stage and inhibits glucose uptake in mature adipocytes. Bioehem Biopl'tys Res Continua 20] l :409(4):769-74. MacDougald OA. Lane MD. Transcriptional regulation of gene expression during adipocyte differentiation. Annn Rev Biot—hem 1995;64:345—73.
- Tengku-Muhammad TS. Hughes TR. Cryer A. Ramji DP. Differential regulation of lipoprotein lipase in the macrophage 1774.2 cell line by cytokines. Crtokine ;8(7):525—33.
- Hamosh M. Hamosh P. The effect of estrogen on the lipoprotein lipase activity of rat adipose tissue. J Clin Invest l975‘.55(5}:l I32—5. Cooke PS. Naaz A. Role of estrogens in adipoeyte development and function. Exp Biol Med “ l ): 1 127-35. Büyükafşar K. Yalçin I. Kurt AH. Tiftik RN. Sahan-Firat S. Aksu F. Rho—kinase inhibitor, $27632, has an antinociceptive effect in mice. Eur J Phnnmtml l ( l —2):49—52. kinase inhibitors. Y-27632 and l'asudil. in mice. Br J Platiıunm 2008ı155tl ):44—51 .
- Iwamoto H. Nakamtıta M. Tada S. Sugimoto R. Enjoji M. Navvata H. A p160ROCK—speciŞc inhibitor. Y-27632. attenuates rat hepatic stellate cell growth. J Hepatol ı32t5lz762-70.
- Takano H. Komuro ], Oka T. Shiojima I. Hiroi Y, Mizuno T. Yazaki Y. The Rho family G proteins play a critical role in muscle differentiation. Mol Ceii Biol 1998:18(3):1580-9.
- Sordella R. Jiang W. Chen GC, Curto M, Settleman .l. Modulation of Rho GTPase signaling regulates a switch between adipogenesis and myogenesis. Cell l 13(2): [4758. Pektaş l‘t‘ ark.
- Nügiıchi M. Hosodu K, Fujikuru J. Fujimotu M. iwakuru H, Tomita T. lshii T. Arai N. Hirat'd M. Ebihara K. Mastızaki H. 11011 H, Nurumiya S, Nakai) K. Genetic and phznmacologicul inhibition of Rho—associated kinase ll enhances adipogenesis. J Bia Chem 2()07:282(40):29574
- Kurt AH. Suçun knroner mikrovasküler endotel hücre kültüründe androjenik ve cstmjcnik hormonların rim-kinaz enzim ekspresyonu üzerine etkisi. Yüksek lisa-ıns tezi. Mersin Üniversitesi. Sağlık Bilimleri Enstitüsü. Mersin.
- Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
- Başlangıç: 2008
- Yayıncı: Mersin Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü
Sayıdaki Diğer Makaleler
Akif Hakan KURT, Rukiye Nalan TİFTİK, İsmail ÜN, Kansu BÜYÜKAFŞAR
Mehtap PEKTAŞ, Akif Hakan KURT, Rukiye Nalan TİFTİK, İsmail ÜN, Kansu BÜYÜKAFŞAR
Gül BAYRAM, Nuran DELİALİOĞLU, Gürol EMEKDAŞ
MikroRNA\'ların Terapötik Kullanımı
Palyatif Radyoterapi Tedavisi Yapılan HIV Negatif Klasik Kaposi Sarkomu Olgusu
Özlem YETMEN, Bekir Hakan BAKKAL, Nuriye ÖZER, Rafet KOCA
Gözde TÜRKÖZ, İbrahim Ömer BARLAS, Selma ÜNAL, Ali Bülent ANTMEN, Seval KUL