Erdinç DURSUN, Duygu GEZEN-AK, Selma YILMAZER

Primer nöron kültürü tekniği

Çeşitli dokulardan izole edilen hücreler ile hazırlanan hücre kültürleri müşterek bazı özellikler gösterir. Kültürdeki hücreler önce büyüme fazı denilen hızlı bir bölünme sürecine girerler. Daha sonra birbirine yaklaşarak temas eden hücreler bölünmeyi yavaşlatır ve alındıkları dokunun karakteristik özelliklerini kazanmak üzere farklılaşma sürecine girerler. Örneğin, böbrek veya barsak epitel hücreleri aralarında bağlantılar oluşturarak birbirleriyle ilişki kurarlar ve iyonların bir hücreden diğerine taşınmasını sağlarlar; kalp kası hücreleri kendi kendilerine kasılmaya başlarlar. Nöronlar için durum oldukça farklıdır. Embriyonik beyinden elde edilen sinir hücreleri kültüre edildiğinde, bölünmeyi tamamen durdururlar. Bu hücreler nöritlerini uzatıp birbirleri ile temas eder ve sinaps oluştururlar böylece elektriksel olarak aktif duruma geçerler. Bu özellikler nöron kültürünü diğer hücre kültürlerinden farklı kılar. Bu hücrelerden köken alan hücre soyları nöron özelliklerini tam olarak gösteremezler. Bu yüzden özellikle nörodejenerasyon mekanizmalarının araştırılmasında primer nöron kültürlerinin kullanılması önem taşımaktadır. Biz bu yazımızda primer nöron kültürü hazırlanması konusunda bilgi ve deneyimlerimizi aktararak benzer konularda nöron kültürleri ile çalışmak isteyen araştırmacılara katkıda bulunmayı amaçlamaktayız.

Anahtar Kelimeler:

primer kültür, nöron kültürü, korteks, hippokampus, nörodejenerasyon

Primary neuronal cultures

Cell cultures that are prepared from the isolated cells of different tissues share common features. Cultured cells first enter a fast proliferation process that is called growth phase. Later, the cells that contact each other slow down the proliferation and enter differantiation process inorder to gain the characteristic features of the tissue that they were harvested. For example kidney or intestine epitelial cells comunicate with connections and allow ion transportation; heart muscle cells contract by themselves. The stiuation is different for neurons. The neurons that gathered from embriyonic brain completely stop proliferating when they are cultured. These neurons contact to each other by the neurites that they grow, form synapses and become electrically active. These properties distinguish neuronal cultures from other cell cultures. The cell lines that are originated from these cultures do not show the characteristic features of the neurons completely. Thus it is important to use primary neronal cultures while investigating the mechanisms of neurodegeneration. In this article our aim is to contribute to the researchers that are interested in similar subjects by sharing our knowledge and experience about preparing primary neuronal cultures.

Keywords:

primary cultures, neuronal cultures, cortex, hippocampus, neurodegeneration,

PDF

___

Higgins D, Banker G.: Primary dissociated cell cultures; in Banker G, Goslin K (ed): Culturing nerve cells. MIT Press, Cambridge, 1998, P 37- 79.
Price P, Brewer GJ.: Serum-free media for neural cell cultures; in Fedoroff S, Richardson A (ed): Protocols for neural cell culture. Humana Press, New Jersey, 1998, P 255-264.
Goslin K, Asmussen H, Banker G.: Rat hippo- campal neurons in low-density culture; in Ban- ker G, Goslin K (ed): Culturing nerve cells. MIT Press, Cambridge, 1998, P 339-371.
Dursun E, Gezen-Ak D, Yilmazer S.: A novel perspective for alzheimer’s disease: Vitamin D receptor suppression by amyloid and pre- venting the amyloid induced alterations by vi- tamin D in cortical neurons. J Alzheimers Dis 2011;23:207-219.
Dursun E, Gezen-Ak D, Yilmazer S.: Beta amy- loid suppresses the expression of the vitamin D receptor gene and induces the expression of the vitamin D catabolic enzyme gene in hippo- campal neurons. Dement Geriatr Cogn Disord 2013:DOI: 10.1159/000350319.
Gezen-Ak D, Dursun E, Yilmazer S.: The effe- cts of vitamin D receptor silencing on the exp- ression of LVSCC-A1C and LVSCC-A1D and the release of NGF in cortical neurons. PLOS ONE 2011;6(3): e17553. DOI: 10.1371/journal. pone.0017553.
Gezen-Ak D, Dursun E,Yilmazer S.: Vitamin D inquiry in hippocampal neurons: Consequences of vitamin D-VDR pathway disruption on cal- cium channel and the vitamin D requirement. Neurol Sci 2012:DOI: 10.1007/s10072-10012- 11268-10076.
Gezen-Ak D, Dursun E, Yilmazer S.: The effect of vitamin D treatement on nevre growth fac- tor release (NGF) in hippocampal neurons. Arch Neuropsych 2013:DOI:10.4274/npa.y7076.
Bottenstein JE, Sato GH.: Growth of a rat neuroblastoma cell line in serum-free supp- lemented medium. Proc Natl Acad Sci U S A 1979 76:514-517.
Brewer GJ, Torricelli JR, Evege EK, et al.: Op- timized survival of hippocampal neurons in B27-supplemented neurobasal, a new se- rum-free medium combination. J Neurosci Res 1993;35:567-576.