Cevat NİSBET, AHMET GÜLER, Gülay ÇİFTÇİ, Gul Fatma Yarim

The ınvestigation of protein prophile of different botanic origin honey and density saccharose-adulterated honey by SDS-PAGE method

Balın protein içeriği ve kalitesi bitki kaynağı, balın üretim ve işleme şartlarına bağlı olarak değişir. Balların botanik kaynağını ve kalitesini belirlemek üzere birçok yöntem geliştirilmiştir. Bu çalışmanın amacını farklı bitki kaynakları (ormangülü, kestane, çiçek, çam) ve farklı besleme koşullarına (glukozlu) tabi tutulan arı kolonilerinden üretilen balların protein profilinin SDS-PAGE yöntemi ile karşılaştırmalı olarak değerlendirilmesi oluşturmaktadır. Çalışmada ormangülü, kestane, glukozlu, çiçek ve çam bitki kaynaklarından üretilen saf ballar ile yoğun şekerli (glukozlu) balın protein profilinin aynı olduğu, ancak protein yoğunluğunun farklılık gösterdiği belirlendi. Balların elektroforez analizi sonucunda 94 kDa, 87 kDa ve 84 kDa olmak üzere başlıca 3 protein bantı belirlenmiştir. Protein (%) oranları ise sırasıyla 1.1±0.07, 1.02±0.04, 0.90±0.03, 1.16±0.09 ve 0.23±0.01 olarak bulunmuştur. Ormangülü, Kestane, çiçek ve çam ballarının protein bant yoğunluklarının aşırı glukoz şerbetiyle yapılan besleme sonucu üretilen baldan yaklaşık 4-7 kat daha fazla olduğu saptandı. Bu çalışma ile saf ve hileli balların ayrımında protein profilinin değerlendirilmesinin önemli kaynak teşkil edeceği ve bu hususta yapılacak olan analizlere de destek olacağı kanısındayız.

Anahtar Kelimeler:

bal, protein içeriği, sakaroz, şeker, SDS-PAGE, elektroforez, gıda koruyucuları

Farklı bitki türlerinden üretilmiş saf ve şekerli balların protein profilinin SDS-PAGE yöntemi ile incelenmesi

Protein content and quality of honeys are varied according to the plant source as well as production and handling conditions. Lots of methods were developed to determine the botanical origins and qualities of honeys. The aim of this study was to comparatively evaluate the protein profiles of the honeys produced from bee colonies exposed to different plant sources (rhododendron, chestnut, blossom, pine) and feeding (Saccharose nutrition) conditions by using SDS-PAGE method. In this study, the protein profiles, but not protein densities, were found similar between pure honeys produced from rhododendron, chestnut, blossom, pine and high sugared (saccharose) honeys. Three main protein bands (94 kDa, 87 kDa and 84 kDa) were determined in the electrophoretic analysis of the honeys. Protein ratios (%) were determined as 1.31±0.07, 1.02±0.04, 0.90±0.03, 1.16±0.09 and 0.23±0.01, respectively. Protein band densities were found higher in rhododendron, chestnut and pine honeys than those in honeys produced by using excessive saccharose syrup. It was concluded that protein profile can be used in differentiation between pure and adulterated honeys.

Keywords:

honey, protein content, sucrose, sugar, SDS-PAGE, electrophoresis, food preservatives,

PDF

___

1. Crane E: Honey: A comprehensive survey. Heinemann, International Bee Research Association (IBRA), London, 1979.
2. White JW, Winters K: Honey protein as international standard for stable isotope ratio detection of adulteration of honey. J Assoc Off Anal Chem,72, 907-911, 1989.
3. Gounari S: Studies on the phenology of Marchalina hellenica (gen.) (Hemiptera: Coccoidea, Margarodidae) in relation to honeydew flow. J Api Res, 45, 8-12, 2006.
4. Şahinler N, Şahinler S, Gül A: Biochemical composition of honeys produced in Turkey. J Agric Food Chem, 43, 53-56, 2004.
5. Anklam E: A review of the analytical methods to determine the geographical and botanical origin of honey. Food Chem, 63, 549-562, 1998.
6. Bogdanov S, Lullmann C, Martin P, Ohe WVD, Russmann H, Vorwohl G: Honey quality, methods of analysis and international regulatory standards: Review of the work of the international honey commission. Liebefeld, Switzerland: Swiss Bee Research Centre, FAM www.fam.admin.ch. 2000.
7. Oddo LP, Bogdanov S: Determination of honey botanical origin: problems and issues. Apidologie, 35, 2-3, 2004.
8. Dimou M, Kasaros J, Klonari KT, Thrasyvoulou A: Discriminating pine and fir honeydew honeys by microscopic characteristics. J Api Res, 45, 16-21, 2006
9. Güler A, Bakan A, Nisbet C, Yavuz O: Determination of important biochemical properties of honey to discriminate pure and adulterated honey with sucrose (Saccharum officinarum L.) syrup. Food Chem, 105, 1119-1125, 2007.
10. Wetherilt H, Başoğlu FN, Pala M: Türkiye’de üretilen saf ve suni ballarKn ayKrt edilebilmesine yönelik kriter geliştirme araştKrmasK. Doğu Karadeniz bölgesi bal Paneli. Trabzon. 22- 52, 1993.
11. Silici S: Türkiye’nin farklK bölgelerine ait bal örneklerinin kimyasal ve pallinolojik özellikleri. Mellifera, 4, 12-18, 2004.
12. Baroni MV, Chiabrando GA, Costa C, Wunderlin DA: Assessment of the floral origin of honey by SDS-PAGE immunoblot techniques. J Agric Food Chem, 50,1362-1367, 2002.
13. Ünal C: Ankara’da Tüketime Sunulan Süzme BallarKn Kimyasal Kaliteleri. Yüksek Lisans Tezi, Ankara Üniv SağlKk Bil Enst, Ankara - Türkiye, 2004.
14. Güler A: Bal ArKsK (Apis mellifera L.). Ondokuzmayis Universitesi Ziraat Fakultesi, Ders KitabK, No: 55, 2006.
15. Sammatora D, Avitabile A: The Beekeepers Handbook. Cornell University Press, New York.1998.
16. Laemmli UK: Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 227, 680- 685, 1970.
17. Candiano G, Bruschi M, Musante L, Santucci L, Ghiggeri GM, Carnemolla B, OrecchFa P, Zardi L, Righetti PG: Blue silver: A very sensitive colloidal Coomassie G-250 staining for proteome analysis. Electrophoresis, 25, 1327-1333, 2004.
18. A.O.A.C: Association of Official Analytical Chemists. Methods of Analysis. AOAC International, USA, 15th ed, 1990.
19. Akyıldız R: Yemler Bilgisi Laboratuvar Kullanımı. Ankara Üniversitesi Ziraat Fakültesi YayKnlarK No: 358, Uygulama KKlavuzu, 122, 174-175 , 1984.
20. Rao CR. Linear statistical inference and its applications. New York: John&Sons, 1973.
21. Hermosin I, Rosa M, Chicón M, Cabezudo D: Free amino acid composition and botanical origin of honey. Food Chem, 83, 263-268, 2003.
22. Pirini A, Conte LS, Francioso O, Lercker G: Capillary gas chromatographic determination of free amino acids in honey as a means of discrimination between different botanical sources. J High Resolut Chrom, 15, 165-170, 1992.
23. Cotte Jf, Casabianca H, Giroud B, Albert M, Lheritier J, Grenier-Loustalot MF: Characterization of honey amino acid profiles using high-pressure liquid chromatography to control authenticity. Anal Bioanal Chemistry, 378, 1342-1350, 2004.
24. Iglesias MT, Martin-Alvarez PJ, Polo MC, De Lorenzo C, Pueyo E: Protein analysis of honeys by fast protein liquid chromatography: Application to differentiate floral and honeydew honeys. J Agric Food Chem, 54, 8322-8327, 2006.
25. Rodriguez-Otero JL, Paseiro P, Simal J: Intento de caracterizacion de las mieles naturales de galicia mediante las fracciones proteicas spradas por electroforesis. An Bromatol, 42, 83-98, 1990.
26. Paramas AMG, Barez JAG, Marcosa CC, García- Villanovaa RJ, Sánchez JS: HPLC-fluorimetric method for analysis of amino acids in products of the hive (honey and bee-pollen). Food Chem, 95, 148-156, 2006.