ENGİN ŞEKER, BURHAN ÇETİNKAYA, MURAT KARAHAN, Naim SAĞLAM, ÜNAL İSPİR, Mustafa SARIEYYÜPOĞLU

Investigation of Yersinia ruckeri infection in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss Walbaum 1792) Farms by polymerase chain reaction (pcr) and bacteriological culture

Bu çalışma, Elazığ ve Malatya illerindeki gökkuşağı alabalığı yetiştirme çiftliklerinde Enterik Kızıl Ağız hastalığına neden olan Yersinia ruckeri etkeninin varlığını incelemek amacıyla gerçekleştirilmiştir. Bu amaçla, çiftliklerden toplanan genç ve yetişkin gökkuşağı alabalıklarınının kan ve bağırsak örnekleri ile balıkların bulunduğu havuz suyu örnekleri bakteriyolojik kültür ve spesifik polimeraz zincir reaksiyonu ile kıyaslanarak incelenmiştir. Y. ruckeri 17 çiftliğin sekizinden izole ve identifiye edilirken, alabalık çiftliklerinde %52.9 oranında tespit edildi. Hastalık Elazığ’daki altı çiftliğin beşinde gözlenirken, Malatya’da lokalize olan 11 çiftliğin üçünde gözlendi. Etken sadece genç balık üretimi yapan altı çiftliğin beşinde tespit edildi. Balık düzeyinde etken izolasyon oranları; yetişkin balıklarda %25.7 (131/510), genç balıklarda %31.7 (19/60) olarak bulunurken, toplamda %26.3 (150/570) oranında saptandı. İzolatların tamamı tür spesifik PCR ile Y. ruckeri olarak başarılı bir şekilde identifiye edilmiş, su örneklerinde ise etken izolasyonu gerçekleştirilememiştir. Sonuç olarak, çalışma bölgesindeki balık çiftliklerinde Y. ruckeri infeksiyonunun balık çiftliklerinde önemli bir düzeyde seyrettiği tespit edildiğinden ERM hastalığından dolayı meydana gelebilecek ekonomik kayıpları azaltmak için acil olarak gerekli önlemler alınmalıdır. Bakteriyel etkenlerin hızlı bir şekilde identifikasyonu için başarılı bir şekilde kullanılabilen PCR sayesinde, su ürünlerinde infeksiyöz hastalıkların yayılmasının önlenmesine yardımcı olunabilecek ve balıkçılık sektörünün üretkenliğine katkıda bulunulabilecektir.

Anahtar Kelimeler:

polimeraz zincir reaksiyonu, balık, gökkuşağı alabalığı, alabalık, Yersinia ruckeri, sucul hayvanlar, sucul organizmalar, bakteriyoloji, hastalık önleme, kültür balığı, balık çiftlikleri

Gökkuşağı alabalığı (Oncorhynchus mykiss Walbaum 1792) Çiftliklerinde Yersinia ruckeri infeksiyonunun bakteriyolojik kültür ve polimeraz zincir reaksiyonu (pcr) ile incelenmesi

This study has been carried out to investigate the presence of Yersinia ruckeri, the causative agent of Enteric Red Mouth (ERM) disease, in rainbow trout fish breeding farms located in Elazig and Malatya provinces in Eastern Turkey. For this purpose, bacteriological culture and a specific polymerase chain reaction (PCR) have been compare with examine blood and intestine samples collected from adult and young rainbow trout fish as well as water samples collected from all the farms. Y. ruckeri was isolated and identified from eight of the 17 fish farms giving a proportion of 52.9% at fish farm. The disease was noted in five of the rainbow trout farms located in Elazig and three of the 11 rainbow trout farms located in Malatya. The agent was detected in five of the six young fish breeding farms. The isolation percentages of the causative agent at fish level were calculated as 25.7% (131/510) in adult and 31.7% (19/60) in young fish, giving an overall proportion of 26.3% (150/570). All the isolates have been successfully identified as Y. ruckeri by species-specific PCR. No isolation could be made from water samples. It is therefore concluded that Y. ruckeri infection poses a significant threat to the fish farms in the study area and necessary precautions should urgently be taken in order to minimize economical losses due to ERM disease. A specific PCR can be utilized successfully in aquaculture for rapid identification of bacterial agents which will help to prevent spread of infectious diseases and will therefore contribute to the productivity of fishery sector.

Keywords:

polymerase chain reaction, fishes, rainbow trout, trout, Yersinia ruckeri, aquatic animals, aquatic organisms, bacteriology, disease prevention, fish culture, fish farms,

PDF

___

1. Bullock GL, Anderson DP: Immunization against Yersinia ruckeri, cause and enteric redmouth disease. Symposium on Fish Vaccination. (Theoretical Background and Practical Results on Immunization Against Infectious Diseases). 20-22 February, O.T.E. Paris, pp.151-156, 1984.
2. Busch RA: Enteric redmouth disease (Hagerman starin). Marine Fisher Rev, 40, 42-51, 1978.
3. Frerichs GN, Roberts RJ: The bacteriology of teleosts. In, Roberts RJ (Ed): Fish Pathology. Second ed., pp. 289-320, Bailliere Tindall, London, 1989.
4. Lucangeli C, Morabito A, Caprioli A, Achene L, Busani L, Mazzolini E, Fabris A, Macri A: Molecular fingerprinting of strains of Yersinia ruckeri serovar O1 and Photobacterium damsela subsp. piscicida isolated in Italy. Vet Microbiol, 76, 273-281, 2000.
5. Ross AJ, Rucker RR, Ewing WN: Description of a bacterium associated with redmouth disease of rainbow trout. Can J Microbiol, 12, 763-770, 1966.
6. Bullock GL, Stuckey HM, Shotts EB: Early records of North American and Australian outbreaks of enteric redmouth bacterium. Fish Health News, 6, 96-97, 1977.
7. Roberts MS: A report of an epizootic in hatchery reared rainbow trout, Salmo gairdneri richardson at an English trout from, caused by Yersinia ruckeri. J Fish Dis, 6, 551-552, 1983.
8. Lesel R, Lesel M, Gavini F, Vuillaume A: Outbreak of enteric red mouth disease in rainbow trout, Salmo gairdneri richardson, in France. Bull Eur Ass Fish Pathol, 6, 385-387, 1983.
9. Çağirgan H, Yüreklitürk O: First isolation of Yersinia ruckeri from rainbow trout farm in Turkey. In, The Fifth Conference of Eafp, Disease of Fish and Shellfish, pp. 24-29, 1991.
10. Timur G, Timur M: An outbreak of enteric redmouth disease in farmed rainbow trout (Onchorynchus mykiss) in Turkey. Bull Eur Ass Fish Pathol, 11, 182-183, 1991.
11. Austin B, Austin DA: Bacterial Fish Pathogens Disease in Farmed and Wild Fish. Second ed., pp. 208-227, Ellis Norwood Ltd., Kingland, 1993.
12. Rucker R: Redmouth disease of rainbow trout (Salmo gairdneri) Bull Off Int Epizoot, 65, 825-830, 1966.
13. Bragg RR, Henton MM: Isolatİon of Yersinia ruckeri from rainbow trout in South Africa. Bull Eur Ass Fish Pathol, 6 (1): 5-6, 1986.
14. Arda M, Seçer S, Sarıeyyüpoğlu M: Balık Hastalıkları. s. 94-95, Medisan, Ankara, 2005.
15. Arda M: Genel Bakteriyoloji. s. 531, Ankara Üniv. Vet. Fak. Yayınları No: 402, Ankara Üniversitesi Basımevi, Ankara, 1985.
16. Holt JG, Krieg NR, Sneath PH, Stanley JT: Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. 9th ed., pp. 137-138, USA, 1994.
17. Altinok I, Grizzle JM, Liu Z: Detection of Yersinia ruckeri in rainbow trout blood by use of the polymerase chain reaction. Dis Aquat Org, 44, 29-34, 2001.
18. Altun S, Kubilay A, Diler Ö: Yersinia ruckeri suşlarının fenotipik ve serolojik özelliklerinin incelenmesi. Kafkas Univ Vet Fak Derg,16 (Suppl-B): S223-S229, 2010.
19. Gibello A, Blanco MM, Morena MA, Cutuli MT, Domenench A, Dominguez L, Fernandez-Garayzabal JF: Development of a PCR assay for detection of Yersinia ruckeri in tissues of inoculated and naturally infected trout. Appl Environ Microbiol, 65, 346-350, 1999.
20. Bullock GL, Cipriano RC: Enteric redmouth disease in salmonids. United States Department of the Interior Fish and Wild Life Service, Fish Disease Leaflet, 1990.
21. Bullock GL: Enteric redmouth disease. United States Department of the Interior Fish and Wildlife Service, Fish Health Bulletin, 1989.
22. Ateşoğlu A: Alabalıklardan Yersinia ruckeri izolasyonu, identifikasyonu ve dokularda indirekt flouresan antikor testi ile antijen aranması. Doktora Tezi, İstanbul Üniv. Sağlık Bil. Enst., 1999.