Marmara bölgesinde ruminantlardaki abort olgularında Leptospirozisin levaditi ve immunohistokimyasal yöntemlerle teşhisi ve histopatolojik bulgularla karşılaştırılması

Leptospiroz, abort, ölü doğum, kısırlık ve süt verimi kayıplarına neden olan ve hayvancılık için ekonomik açıdan çok önemli, zoonoz karakterli, bakteriyel bir enfeksiyondur. Bu çalışmada, 2013-2018 yılları arasında Marmara bölgesindeki il ve ilçelerden Pendik Veteriner Kontrol Enstitüsüne getirilen ruminantlardaki abort olgularından leptospirozun immunhistokimyasal (İHK) ve Levaditi yöntemlerle teşhisi ve histopatolojik bulgularla karşılaştırılması amaçlanmıştır. Materyal olarak 12 farklı ilden 750 kuzu, 218 oğlak ve 284 buzağı olmak üzere toplam 1252 adet abort fötüs kullanılmıştır. Fötüslerin nekropsileri yapıldıktan sonra iç organlardan alınan örnekler rutin takipleri yapılarak, hematoksilen eozinle boyanmıştır. Ayrıca böbrekler, karaciğer ve akciğerlerden İHK ve Levaditi yöntemleriyle leptospira etkenleri aranmıştır. Çalışmada, makroskobik olarak bazı fötüslerde deri altı ödemleri ve vücut boşluklarında sıvı birikimi, ikterus, karaciğerde miliyer nekroz odakları görülürken, çoğunda otolitik değişiklikler izlendi. Mikroskobik incelemelerde karaciğerde periasiner nekroz ve böbrek tubullerinde nekroz ve hiyalin silindirlerine rastlandı. İHK yöntemle yapılan boyamalarda 1252 adet fötusun 160 tanesinde ve İHK pozitif örneklerin Levaditi yöntemle boyamalarında ise 108 adet pozitif boyanma tespit edildi. Levaditi boyama metodu ile etkenler sadece böbrekte belirlenirken, karaciğer ve akciğerde gözlenmedi. Ancak İHK metodu ile karaciğer, böbrek ve akciğerde de pozitif boyanmalar saptandı. Sonuç olarak Marmara bölgesinde ruminantlarda leptospiroza bağlı abort oranı %12,8 olarak belirlenmiştir. Leptospirozun teşhisinde, İHK metodunun Levaditi boyama yöntemine göre daha hassas olduğu gösterilmiştir. Çalışma sonucunda Marmara bölgesi için ruminantlarda leptospirozun önemli bir abort sebebi olduğu ortaya konulmuş, hastalıkla ilgili farkındalığın arttırılması ve aşılamaların yapılmasının hastalıkla mücadelede çok etkin olacağı sonucuna varılmıştır.

Anahtar Kelimeler:

Abort, immunohistokimya, leptospiroz, Levaditi, ruminant.

Diagnosis of Leptospirosis with levaditi and immunohistochemical methods in abortion cases in ruminants in marmara region and comparison with histopathological findings

Leptospirosis is a bacterial infection of zoonotic character, which causes abortion, stillbirth, infertility and milk yield losses and is very important for livestock economically. In this study was aimed to diagnose and compare the abortion cases with leptospirosis in ruminants coming to Pendik Veterinary Control Institute from the provinces and districts of Marmara region between 2013-2018 by immunohistochemical (IHC) and Levaditi methods and to compare with histopathological findings. A total of 1252 aborted fetuses; 750 lambs, 218 kids and 284 calves from 12 different provinces were used as materials. After the necropsies of the fetuses, the samples taken from the internal organs were routinely followed and stained with hematoxylin eosin. In addition, leptospira agents were searched by IHC and Levaditi methods from kidneys, liver and lungs. In the study, macroscopically, some fetuses showed subcutaneous edema and fluid accumulation in body cavities, icterus and miliary necrosis foci in the liver, but most had autolytic changes. Microscopic examination revealed periaciner necrosis in liver and necrosis and hyaline cylinders in renal tubules. Positive staining was observed in 160 of 1252 fetus samples in IHC staining and Levaditi staining of IHC positive samples revealed 108 positive staining. Levaditi staining method was used to determine the agent only in kidney tissue, but not in the liver and lung. However, positive results were obtained in liver, kidney and lung by IHC method. As a result, the abortion rate of leptospirosis in ruminants was determined as 12,8% in Marmara region of Turkey. In the diagnosis of leptospirosis, IHC method is more sensitive than Levaditi staining method. As a result of this study, it has been shown that leptospirosis has an important place in abortions in ruminants in Marmara Region of Turkey and it is concluded that raising awareness about the disease and vaccination will be very effective in combating the disease.

Keywords:

Abortion, immunohistochemistry, leptospirosis, Levaditi, ruminant.,

PDF

___

Bisias, G., Burriel, A., Boutsini, S., Kritas, S., & Leontides, L. (2009). A serological investigation of some abortion causes among small ruminant flocks in Greece. The Internet Journal of Veterinary Medicine, 8, 1-7.
Bolin, C.A. (2005). Leptospirosis in cattle: Disease review and update. Proceeding of the NAVC North American Veterinary Conference. 8-12, Orlando, Florida.
Bulu, A.A., Dörterler, R., Özkan, Ö., & Hoştürk, F. (1990). Doğu Anadolunun bazı illerinde (Kars, Erzurum, Gümüşhane, Artvin) sığır ve koyunlarda leptospirosis vakaları, yayılışı ve serotipleri üzerine araştırmalar. Etlik Vet Mikrobiyol Derg, 6, 6, 50-61.
Ellis, T.M., Robertson, G.M., Hustas, L., & Kirby, M. (1983). Detection of leptospires in tissue using an immunoperoxidase staining procedure. Australian Veterinary Journal, 60, 364-67.
Ertaş, H.B., Çetinkaya, B., Muz, A., Öngör, H., Özdemir, V., & Yazıcıoğlu, N. (2000). Sığırlarda leptospirozisin tanısında MAT ve ELISA’nın kullanımı. IV. Ulusal Veteriner Mikrobiyoloji Kongresi, Ankara, s.46.
Falini, B., & Taylor, C.R. (1983). New developments in immunoperoxidase techniques and their application. Archives Pathology Laboratory Medicine, 107, 105-17.
Hamali, H., Joozani, J., & Abdollahpour, R. (2012). Serodiagnosis and molecular survey on leptospiral abortions in the diary cattle of Tabriz. Iranian Journal Veterinary Research, 13, 2, 120-5.
Kıran, M.M., Baysal, T., Gözün, H., Güler, L., Gündüz, K., Kuyucuoğlu, Ö., & Küçükayan, U., (1997). Konya yöresinde koyun abortusları üzerine patolojik, bakteriyolojik ve serolojik çalışmalar. Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, 9, 109-28.
Levett, P.N. (2001). Leptospirosis. Clinic Microbiol Review, 14, 2, 296-326.
Lucheis, S.B., & Ferreira, R.S., (2011). Ovine Leptospirosis in Brazil. Journal of Venomous Animal and Toxins including Tropical Diseases, 17, 4, 394-405.
Luna, L.G. (1968). Manual of histologic staining methods of the Armed Forces Institute of Pathology. 3rd Edition, McGraw-Hill, New York. p.32-39.
Maxie, M.G. (1993). The Urinary System. In: Pathology of Domestic Animals, Eds. Jubb, K.V.F., Kennedy, P.C., Palmer, N. Vol. 2, 4th ed., Academic Press, Inc., San Diego, USA, pp. 480-520.
Miller, D.A., Wilson, M.A., & Beran, G.W. (1991). Survay to estimate prevalance of Leptospira interrogans infection in mature cattle in the United States. American Journal Veterinary Research, 52, 1761-65.
Özdemir, Ö., & Erer H. (2018). Dişi Genital Sistem, In: H. Erer, M.K. Çiftçi (Eds), Veteriner Sistemik Patoloji, II. Cilt, , 3.Baskı, Konya, Güler Ofset, p.199-242.
Özkan, Ö., Dörterler, R., & Hoştürk, F. (1993). Erzurum ili ve yöresindeki sığır ve koyunlarda sarılık ve kan işeme semptomlarıyla seyreden hastalıklarda Clostridium eodemetiens, Leptospira ve kan protozoonlarının insidansının belirlenmesi. Etlik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, 7, 4, 97-104.
Russell, C.J., & Faine, S. (1984). Leptospira. In: R. Krierg, J.G. Hold, (Eds), Bergeys Manual of Systematic Bacteriology. Vol. I, Williams& Wilkins, London, p.62-7.
Sağlam, Y.S., Yener, Z., Temur, A., & Yalcin, E. (2008). Immunohistochemical detection of leptospiral antigens in cases of naturally occurring abortions in sheep. Small Ruminant Research, 74, 1, 119-22.
Scanziani, E., Luini, M., Fabbi, M., & Pizzocaro, P. (1991). Comparison between specific immunoperoxidase staining and bacteriological culture in the diagnostic of renal leptospirosis of pigs. Research in Veterinary Science, 50, 229-32.
Szeredi, L., & Haake, D.A. (2006). Immunohistochemical identification and pathologic findings in natural cases of equine abortion caused by Leptospiral infection. Veterinary Pathology, 43, 5, 755–61.
Şahin, M., Aydın, F., Özdemir, V., Genç, O., & Güler, M.A. (2000). Kars ve Ardahan illerinde sığır Leptospirozisinin kültürel ve serolojik yöntemlerle araştırılması. IV. Ulusal Veteriner Mikrobiyoloji Kongresi, Ankara, s:48.
Temur, A., & Sağlam, Y.S. (2003). Sığır abortuslarında leptospirosiz yönünden immunperoksidaz incelemeler. Turkish Journal of Veterinary Animal Science, 27, 917-21.
Türkütanıt, S.S., Sağlam, Y.S., Arslan, M.Ö., Bozoğlu, H., & Dinler, U. (2002). Sarılık görülen koyun ve sığırlarda kan protozoonları ve leptospirosis üzerine etiyopatolojik incelemeler. Etlik Veterinar Mikrobiyoloji Dergisi, 13, 1, 45-55.
Ulaş, H., & Alver, H. (1973). Batı Anadolu ve Trakya’da sığırlarda leptospira insidensi ve etken izolasyonu üzerine araştırma. Pendik Veteriner Mikrobiyoloji Dergisi, VI, 41-9.
Yener, Z., & Keleş, İ. (2001). Sığırlarda Leptospirosis üzerinde klinik ve patolojik incelemeler, Veteriner Bilimleri Dergisi, 17, 1, 21-26.