Bovine serum albumin proteinin amonyum sülfat tuzu ile çöktürülmesi

Proteinlerin çökeltme metodu ile saflaştırılmasında kullanılan çeşitli tuzlar vardır. Amonyum sülfat tuzu bunlardan en önemli olanlarından birisidir. Bu çalışmada pH ve amonyum sülfat tuzu konsantrasyonu $2^2$-faktöriyel deney tasarımında bağımsız faktörler olarak seçilmiş ve bu faktörlerin Bovine Serum Albumin proteinin çözünürlüğüne etkileri Box-Wilson deneysel tasarım metoduna göre belirlenerek yapılan deney sonuçlarına dayanarak incelenmiştir. Minimum çözünürlüğün 0,076 mg $ml^{-1}$ olduğu, ve bu değere pH ve amonyum sülfat tuz konsantrasyonun, sırası ile 5,0 ve 4 M olduğu şartlarda ulaşıldığı belirlenmiştir.

Precipitation of Bovine serum albumin protein with ammonium sulfate salt

There are many salts used in the precipitation of proteins. Ammonium sulfate salt is one of the commonly used ones. In this work, pH and ammonium sulfate salt concentration were selected as independent factors in the $2^2$ -factorial experimental design, and the effects of these factors on the solubility of Bovine Serum Albumin protein were investigated according to tht Box-Wilson experimental design method. Minimum solubility was obtained as 0,076 mg $ml^{-1}$ at a pH of 5.0 and ammonium sulfate salt concentration of 4 M.

___

1.Korkmaz, K., "Sulu iki faz sistemlerinde protein dağılımı", Yüksek lisans tezi, G.Ü. Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Mühendisliği Anabilim Dalı, Ankara (1999).
2.McGregor, W. C, "Large scale isolation and purification of proteins from recombinant E. coli ", Ann. N. Y. Acad. Sci., 413, 231 (1983).
3.Foster, P., Dunhill, R.. P. and Lilly, M. D., "The precipitation of enzymes from cell extracts of Saccharomvces cerevisie by polyethylene glycol", Biochem. Biophys.Acta, 317, 505(1973).
4.Haire, R. N., Tisel, W. A., White , J. C. and Rosenberg, A., "On the precipitation of proteins by polymers", Biopolymers, 23, 2761 (1984).
5.Shin, Y. C, Prausnitz , J. M. and Blanch, H. W., "Some characteristics of protein precipitation by salts", Biotech. Bioeng., 40, 1155 (1992).
6.Niederauer, M. Q. and Glatz , C. E., "Selective precipitation", Adv. Biochem. Eng. Technol., 47, 159,(1992).
7.Chiew, Y. C, Kuehner , D., Blanch , H. W. and Prausnitz , J. ML, "Molecular thermodynamics of salt-induced protein precipitation", AIChE Journal, 41,2150(1995).
8.Shiau, K. S. and Chen , T. L., "Initial protein concentration effects on precipitation by salt", Biotechnol. Bieng. 53, 202 (1997).
9.Kawamoto, H. and Nakatsubo, F., "Effects of environmental factors on two-stage tannin-protein co-precipitation", Phytochemistry, 46, 479 (1997).
10.Box, G., Hunter, W., and Hunter, J., Statistics for Experiments, Wiley, New York, (1978).
11.Box, G., and Hunter, W., "Multifactor Experimental Design for Exploring Response Surfaces", Ann. Math. Stat, 28, 195 (1957).