Hidrolitik Enzim Aktivitesine Sahip Alkalifilik Bakterilerin Islatma-Yumuşatma Sıvısından İzolasyonu ve Sayımı

Bu çalışmada ıslatma-yumuşatma işlem sıvısında proteaz, amilaz ve lipaz (estereaz) aktivitesine sahip alkalifilik bakteri sayılarının belirlenmesi ve izolasyonu amaçlanmıştır. Araştırma sonuçlarına göre ıslatma-yumuşatma işlem sıvısında 105 ile 108 kob/ml düzeylerinde muhtemel alkalifilik bakteri tespit edilirken, ayırt edici besiyerlerinde sayılan alkalifilik bakterilerin 49'unun proteaz, 38 'inin amilaz ve 73 'ünün Iipaz(esteraz) enzim aktivitesine sahip olduğu belirlenmiştir. Çalışmada 30 adet bakteri izolasyonu yapılmış ve elde edilen izolatların yarısının alkalifilik yarısının ise alkalitolerant bakteriler olduğu tespit edilmiştir. Ayrıca izolatların çoğunluğunun Bacillus cinsine ait oldukları belirlenmiştir. Sonuç olarak pH değeri genellikle 7-8 arası olan ıslatma-yumuşatma işlem sıvılarında da alkalifilik ve alkalitolerant aynı zamanda proteolitik, amilolitik ve Iipolitik özellikteki bakterilerin varlığı ortaya konmuştur. Islatma-yumuşatma sıvısında bulunan bu bakterilerin enzim aktiviteleri nedenıyle potansiyel endüstriyel mikroorganizma olması muhtemeldir. Diğer yandan elde edilen izolatların özellikle proteolitik ve Iipolitik aktiviteye sahip olması nedeniyle; deri proseslerinin kontroliinde alkalifilik ve alkalitolerant bakteriler üzerinde durulması gerekliliği bu çalışma ile ortaya çıkmıştır. Bundan sonraki araştırmalarımızda bu izolatların moleküler tanı yöntemleri ile tür düzeyinde belirlenmesi amaçlanmaktadır.

Isolation and Enumeration of Alkaliphilic Bacteria with Hydrolytic Activities Isolated from Soaking Liquor

The present study attempts to enumerate and isolate the alkaliphilic bacteria with protease, amylase and lipase (esterase)activities in soaking liquor. While the study determined probable alkaliphilic bacteria at level of 105 and 108 cfu/mL inthe soaking liquor, it was revealed that 49% of alkaphilic bacteria in the differential media display protease, 38% amylase,and 73% lipase (esterase) enzyme activity. 30 bacterial isolations were carried out in the study, and it was detected thathalf of the obtained isolated were alkaliphilic and the other half was alkalitolerant. It was also found that most of the isolatesbelong to Bacillus species. Consequently, the research revealed the presence of bacteria with alkaliphilic and alkalitolerant,and also proteolytic, amylolytic and lipolytic properties, in the soaking liquor of pH 7-8. These bacteria found in the soakingfloat are potentially industrial due to their enzyme activities. On the other side, it was revealed in the study that alkaliphilicand alkalitoletant bacteria should be taken into account in the control of tannery processes because of the proteolytic andlipolytic activities of the obtained isolates. Our next research will attempt to identify the species of these isolates throughmolecular methods.

___

  • AOAC, 2000.: Offical Methods of Analysis of AOAC International, Vol. 1, 17th Edition, USA.
  • aygan, A.: Haloalkalofil Bacillus sp. izolasyonu, Ami/az, Selülaz ve Ksilanaz Enzim/erinin Üretimi, Karakterizasyonu ve Biyoteknolojik Uygulamalarda Kullanılabilir/iği. Doktora Tezi. Çukurova Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü, Adana, 2008.
  • Berber, D.: Tuzlarda, Tuz/anmış ve Islatılmış Ham Derilerdeki Bakteriyel Popülasyonun İncelenmesi. Doktora Tezi. Marmara Üniversitesi. Fen Bilimleri Enstitüsü, İstanbul, 2009.
  • ilgi, S.T., Mericli Yapici,B. ve Yapici, A.N.: Determination of Bacterial and Fungal Numbers in Floats of Pre-Tanning Operations. Afr. J. Biotechnol., 2009, 8(8): 1602-1607.
  • Bilgi, T.: Ham Deri/erden İzole Edilen Halofilik Arkelerin Hidrolitik Enzim Kapasite/erinin Belirlenmesi, Fenotipik ve Filogenetik Olarak Tanımlanması. Doktora Tezi. Ç. O.M. Ü. Fen Bilimleri Enstitüsü, Çanakkale, 2012.
  • Birbir, M., Kallenberger, W., Ilgaz, A. ve Bailey, D.: Halophilic Bacteria Isolated From Brine Cured Cattle Hides. Soc Leath. Tech. Ch., 1996, 80: 87-90.
  • Çoban, H. S.: Isolation of Haloalkaliphilic Microorganisms from Leather Industry. Master of science. Izmir Institute Of Technology, Izmir, 2004.
  • Denz, W.: T.C. Çevre ve Orman Bakanlığı Life 06 TCY/TFl/292 Hawaman projesi. 2009.
  • Doğanay D., Mericli Yapici, B. ve Yapici, A.N.: Biyosid Uygulamalı Giysi/ik Deri Üretiminde Tabak/ama ve Sonrası Yaş İşlemlerde Mikıobıyal Yükün Tespiti Üzerine Bir Araştırma. SDÜ Fen Bilimleri Enstitüsü Dergisi, 2013, 7( 1): 15-21.
  • Gomes, J. and Steıner, VII.: The biocatalytic Potential of Extremophiles and Extremozymes. Food Techno/. Biotechnol., 2004, 42(4): 223-235.
  • Gupta, A., Roy, l., Patel, R.K., Sıngh, S.P., Khare, S.K. and Gupta, M. N.: One-step purification and characterization of an alkaline protease from haloalkalophilic Bacillus sp. Journal of Chromathography A, 2005, 1075: 103-108.
  • Hols, P., Feraın, T., Garmyn, D., Bernard, N. and Delcour, J.: Use of Expression Secretion Signals and Vector Free Stable Chromosomal Integration In Engineering of Lactobacillus planetarium for Alfa Amylase and Levanase
  • Expression. Appi. Environ. Microb., 1994, 60(5) 1401 -1413. Horikoshi, K.: AIkaliphiles: Some Applications of Their Products for Biotechnology. Microbiol. and Mol. Biol. Rev., 1999, 63(4): 735- 750.
  • Karaboz, i.: Deri Mikrobiyolojisi Ders Teksiri. E.Ü. Fen Fakültesi. 1994.
  • Kıran, Ö.E., Çömlekçioğlu, U.: Zeytinli Ilıcası (Kahramanmaraş) 'ndan Termofil AIkalifilik Amilolitik Bacillus sp. Suşlarının izolasyonu ve Ami/az Üretme Yetenekleri Üzerine Azot Kaynaklarının Etkisi. KSÜ Fen ve Mühendislik Dergisi, 2003, 6(2): 41 -48.
  • Kumar, G. C. ve Takagı, H.: Microbial alkaline proteases from abioindustrial viewpoint. Biotechnology Advances, 1999, 17: 561-594.
  • Kushner, D.J.: The Halobacteriaceae. In: Woese C. R. ve Wolfe RS ed. The bacteria. treatise on structure and 14 deri bilim [journal ot leather science. function. Archaebacteria. Academic Press, London, 1985, 71 14.
  • Meriç/i Yapıcı, B., Yapıcı, A.N., Karaboz, İ. ve Tozan, M.: Deri Sektöründe Kullanılan Bazı Bakterisidlerin Etkinliğinin Tespiti Üzerine Bir Araştırma. I. Ulusal Deri Sempozyumu, 7- 8. Ekim 2004, izmir, 2004, 77-88
  • Mwatha, W.E. and Grant, W.D.: Natronobacterium vacuolata sp. nov., Haloalkaliphilic Archaeon Isolated from Lake Magadi, Kenya. International Journal Of Systematic Bacteriology, 1993, 43(3): 401 -403.
  • Oppong, D., Bıyant, S. D., Rangarajan, Ft., Steele, S., Radwell, D. ve Hyllengren, L.: Aplication of Molecular Technicques to Identify Bacteria Isolated From The Leather Industry. J. Am. Leather. Chem. As., 2006, 101: 140-145.
  • Orlita, A.: Microbial Biodeterioration of Leather and Its Control: Fteview. International Biodeterioration Biodegradation, 2004, 53: 157-163.
  • Uğur, G.: Deri Islatma Sıvılarındaki Bakterilerin Doğru Elektrik Akımı ile İnaktivasyonu. Yüksek Lisans Tezi. Marmara Üniversitesi. Fen Bilimleri Enstitüsü.2006.
  • Yapıcı, A.N. ve Meriç/i Yapıcı, B.: Deri İşletmelerinde Karşılaşılan Mikrobiyal Olaylar ve Kullanılan Mikrobiosidler. Teknik Bülten, Gemsan, 2002, 34.