Böbrek Dokusunun Farklı Doku Takip Yöntemleri Kullanılarak Histolojik Olarak İncelenmesi

Amaç:Doku takibi genel olarak; fiksasyon, dehidrasyon, şeffaflandırma, sertleştirme ve doku gömmeyi içermektedir. Bu çalışmada doku bütünlüğünün korunması açısından, böbrek dokusunda dört farklı doku takibi yönteminin karşılaştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: 12 adet Wistar Albino ratlardan alınan 24 adet böbrek dokularına dört farklı doku takibi yöntemi farklı dehidratanlar (alkol ve aseton) ve farklı süreler ( 1 gün ve iki gün) uygulanmıştır. Elde edilen bloklardan alınan kesitler hematoksilen-eozin ve Masson trikrom ile boyanmış ve histomorfolojik olarak ışık mikroskobu altında değerlendirilmiştir. Bunlara ek olarak, dört farklı grupta böbrek glomerül çapları ölçülmüştür. Bulgular: Böbrek preparatlarında glomerulus, tubulus distalis, tubulus proksimalis, inen henle, çıkan henle ve bowman kapsüllerindeki histolojik yapılar ele alınmıştır.Bu doğrultuda, böbrek dokusunda belirtilen bütün bölgeler için alkol ve aseton kullanılan gruplarda anlamlı bir fark olmadığı fakat iki gün süre ile aseton kullanılılan grupta böbrek doku bütünlüğünün bozulduğu saptanmıştır. Tüm gruplarda ölçülen böbrek glomerül çapları normal değerlere yakın bulunmuştur. Sonuç: En iyi düzeyde histomorfolojik incelemeler için, doku takibi izlenmesi gereken önemli bir süreçtir. Bizde çalışmamızın sonuçları doğrultusunda dehidratif ajan olarak uygun süreler doğrultusunda aseton ve alkol kullanımını önermekteyiz.

Anahtar Kelimeler:

Doku takibi, histoloji, böbrek, dehidrasyon, aseton, rat

PDF

___

1. Suvarno K, Layton C, Bancroft JD. Bancroft’s Theory and practice of histological techniques.Suvarno K, Layton C, Bancroft JD; eds. 8th ed. London: Churchill Livingstone ; 2018.p. 43-67.
2. Carson FL. Histotechnology-Asel–Instructional text. 2nd ed. Chicago; 1997.p. 25-37.
3. Carson FL, Kingsley WB, Race GJ. Drierite as a dehydrant, indicator and marker for paraffin embedded tissues. Am J Med Tech. 1970; 36: 283-5.
4. Braet F, Ratinac K. Creating Next-Generation Microscopists:Structural and Molecular Biology at the Crossroads. J Cell Mol Med. 2007;11: 759-763.
5. Hopwood D, Coghill G, Ramsay J,et al. Microwave fixation: its potential for routine techniques, histochemistry, immuno-cytochemistry and electron microscopy. Histochem J. 1984; 16: 1171-91.
6. Turner CR, Zuczek S, Knudsen DJ, et al. Microwave fixation of the lung. Stain Technol. 1990; 65: 95-101.
7. Buesa RJ, Peshkov MV. Histology without xylene. Ann Diagn Pathol. 2009; 13:246- 56.
8. Ventura L, Bologna M, Ventura T, et al. Agar specimen orientation technique revisited: A simple and effective method in histopathology. Ann. Diagn. Pathol. 2001; 5: 107-9.
9. Hurley PA, Clarke M, Crook JM, et al. Cochlera immunochemistry-a new technique based on gelatin embedding. J. Neurosci. Methods. 2003; 129: 81-6.
10. Canbaz S, Gülbandilar E, Özden H, et al. Evaluation of the size and area of the corpus vallosum with the osiris method in alzhemier‘s disease. Neuradegenerative Dis. 2009; 148-153.
11.Ventura L, Bologna M, Ventura T, et al. Agar specimen orientation technique revisited: A simple and effective method in histopathology. Annals of Diagnostic Pathology. 2001; 5: 107-9.
12. Akaydın Y, Özcan Z. Hindi (Meleagris gallopavo) Böbreğinin Yapısı Üzerine Işık Ve Elektron Mikroskobik Çalışmalar. Ankara Üniv Vet Fak Derg. 2005; 52: 149-155.
13. Sayın N. Koyun ve Yeni Doğan Kuzularda Peripolar Hücreler ve Granüllü Tübülüs Hücreleri. Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Mecmuası. 2001; 54: 1-5.
14. Cesta MF. Normal Structure, Function and Histology of the Spleen. Toxicol. Pathol. 2006; 34: 455-465.
15. Köktürk S, Ceylan S, Yardımoğlu M,et al.Tespit Solüsyonlarıyla Perfüzyon ve İmmersiyon Tespit Yöntemlerinin Değişik Dokularda Işık Mikroskobik Düzeyde Karşılaştırılması. Genel Tıp Dergisi. 1999; 9 : 135-139.
16.Arzt L, Kothmaier H, Quehenberger F, et al. Evaluation of formalin-free tissue fixation for RNA and microRNA studies. Exp Mol Pathol. 2011; 91:490-495.
17. Stanta G, Mucelli SP, Petrera F, et al. A novel fixative improves opportunities of nucleic acids and proteomic analysis in human archive's tissues. Diagn Mol Pathol. 2006;15:115-23.
18. Gazziero A, Guzzardo V, Aldighieri E, et al. Morphological quality and nucleic acid preservation in cytopathology. J Clin Pathol. 2009; 62:429-34. 89.
19. Lassalle S, Hofman V, Marius I, et al.Assessment of morphology, antigenicity, and nucleic acid integrity for diagnostic thyroid pathology using formalin substitute fixatives. Thyroid. 2009; 19:1239-48.
20. Cox ML, Schray CL, Luster CN, et al. Assessment of fixatives, fixation, and tissue processing on morphology and RNA integrity. Exp Mol Pathol. 2006; 80:183-91.
21. Baloglu G, Haholu A, Kucukodacı Z, et al.The effects of tissue fixation alternatives on DNA content: a study on normal colon tissue. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2008; 16:485-92.
22. Şimşek F, Sendıkçı M. Ratlarda Kastrasyonun Böbrek Histomorfolojisine Etkisi. Ankara Üniv Vet Fak Derg. 2010; 21: 15 – 19.