Polimerik Nanoküreler Üzerine Enzim İmmobilizasyonu ve Optimizasyonu

Enzimler, pek çok endüstride kullanılan, maliyetleri oldukça yüksek olan önemli materyallerdir. Katalitik tepkimelerde enzimler için şartlar uygun olsa bile yüksek sıcaklık, yüksek veya düşük pH ve organik/inorganik çözücülerin varlığında enzimler aktifliklerini kolaylıkla kaybedebilirler. İmmobilizasyon işlemi ile birlikte, enzimlerin ekonomik açıdan kullanılabilirliğini sağlamak mümkündür. Bu amaçla, (aminometil) polistiren (APS) kaynaklı nanokürelere glukoz oksidaz (GOx) enzimi immobilize edildi ve optimizasyon parametreleri (pH, sıcaklık, tekrar kullanım sayısı, depolama kararlılığı, substrat derişimi) belirlendi. Serbest ve immobilize enzim için Michaelis-Menten eşitliği ile Km ve Vmak değerleri hesaplandı. Özellikle Pt(IV) iyonu içeren immobilize enzimin substratına karşı yüksek ilgi gösterdiği tespit edildi. 12 ay sonunda immobilize enzimlerin yaklaşık % 85 aktifliklerini korudukları görüldü.
Anahtar Kelimeler:

GOx, İmmobilizasyon, Nanoküreler

Enzyme Immobilization and Optimization on Polymeric Nanospheres

Enzymes are important materials that are used in many industries and they have a very high cost. Although the conditions for the enzymes in catalytic reactions are appropriate, enzymes can easily lose their activity in the presence of high temperature, high or low pH and organic / inorganic solvents. With the immobilization process, it is possible to ensure that the enzymes are economically usable. For this purpose, the glucose oxidase (GOx) enzyme was immobilized to aminomethyl polystyrene (APS) nanospheres and the optimization parameters (pH, temperature, reusability number, storage stability, substrate concentration) were determined. Michaelis-Menten equation for free and immobilized enzyme and Km and Vmax values were calculated. In particular, it has been found that the substrate of the immobilized enzyme containing Pt(IV) ion shows a high affinity for the substrate. After 12 months, immobilized enzymes were found to maintain about 85% of their activity.

___

  • N. Kurnaz Yetim, “Ferrosen içeren yeni Pt(II), Pt(IV) dendrimerlerinin sentezi ve immobilizasyonda kullanımı,” Doktora Tezi, Fen Bil. Enst., Gazi Üni., Ankara, Türkiye, 2016.
  • A. Wiseman, “Handbook of Enzymes Biotechnology (Book style with paper title and editor),” in The application of enzymes in industry, 2nd ed., E. Horwood, Ed. Chichester, UK, 1987, pp. 274-373.
  • E. Hasanoğlu Özkan, N. Kurnaz Yetim, D. Nartop, N. Sarı, “Influence of load on the recycling stability of nanospheres attached platinium ion for determination of glucose,” J. Ind. Eng. Chem., 25, 180-185, 2015.
  • S. Dönmez, F. Arslan, N. Sarı, E. Hasanoğlu Özkan, H. Arslan, “Glucose biosensor based on immobilization of glucose oxidase on a carbon paste electrode modified with microspheres attached L-glycine,” Biotechnol. Appl. Biochem., 64 (5), 745-753, 2017.
  • X. Wang, Y. Zhang, C. E. Banks, Q. Chen and X. Ji, “Non-enzymatic amperometric glucose biosensor based on nickel hexacyanoferrate nanoparticle film modified electrodes,” Colloids Surf. B, 78, 363-366, 2010.
  • H. Öğütcü, N. Kurnaz Yetim, E. Hasanoğlu Özkan, O. Eren, G. Kaya, N. Sarı, and A. Dişli, “Nanospheres Caped Pt(II) and Pt (IV): Synthesis and Evaluation as Antimicrobial and Antifungal Agent,” Pol. J. Chem., 19, 74-80, 2017.
  • P. Trinder, “Determination of glucose in blood using glucose oxidase with an alternative oxygen acceptor,” Ann. Clin. Biochem., 6, 24-27, 1969.
  • V. Leskovac, S. Trivic, G. Wohlfahrt, J. Kandrac, D. Pericin, “Glucose oxidase from Aspergillus niger: the mechanism of action with molecular oxygen, quinones, and one-electron acceptors,” Int. J. Biochem. Cell Biol., 37 ( 4), 731-750, 2005.
  • N. Kurnaz Yetim, E. Hasanoğlu Özkan, B. Danış, H. Tümtürk, N. Sarı, “Research on the Repeated Use of Novel Ferrocene-Tagged Nanomaterial for Determination of Glucose,” Int. J. Polym. Mater. Polym. Biomater., 64, 888-893, 2015.
  • N. Kurnaz Yetim, E. Hasanoğlu Özkan, N. Sarı, “Immobilization of GOx on Trp / Trp-Fc Functionalized Nanospheres: Improved of Reusability and Stability,” Gazi Univ. J. Sci., 30 (4), 114-122, 2017.
  • A. H. Memon, R. Ding, Q. Yuan, H. Liang, Y. Wei, “Coordination of GMP ligand with Cu to enhance the multiple enzymesstability and substrate specificity by co-immobilization process,” Biochem. Eng. J.,136, 102-108, 2018.
  • P. Zhou, F. Li, W. Dong, K. Huang, Y. Chen, C. Wei, B. Ling, M. Li, “Covalent Immobilization of Glucose Oxidase onto Electrosynthesized Nanocomposite with PEDOT Derivative for Amperometric Glucose Biosensing,” Int. J. Electrochem. Sci.,13, 5294-5310, 2018.
  • H. Azak, H. B. Yildiz, B. Bezgin Carbas, “Synthesis and characterization of a new poly(dithieno (3,2-b:20, 30-d) pyrrole) derivative conjugated polymer: Its electrochromic and biosensing applications,” Polym., 134, 44-52, 2018.
  • C. Hou, D. Zhao, Y. Wang, S. Zhang, S. Li, “Preparation of magnetic Fe3O4/PPy@ZIF-8 nanocomposite for glucose oxidase immobilization and used as glucose electrochemical biosensor,” J. Electroanal. Chem., 822, 50-56, 2018.
  • S. Dönmez, F. Arslan, N. Sarı, N. Kurnaz Yetim, H. Arslan, “Preparation of carbon paste electrodes including poly(styrene) attached glycine-Pt(IV) for amperometric detection of glucose,” Biosens. Bioelectron., 54, 146-150, 2014.
  • J. Shim, G. Y. Kim, S. H. Moon, “Covalent co-immobilization of glucose oxidase and ferrocenedicarboxylic acid for an enzymatic biofuel cell,” J. Electroanal. Chem., 653, 14-20, 2011.
  • R. Ahmad, M. Sardar, “Enzyme Immobilization: An Overview on nanoparticles as immobilization matrix,” Biochem Anal. Biochem., 4, 1-8, 2015.
  • E. Çınar, S. Ercan, N. Güleşçi, “Lewatit Partikülüne Üreaz Enziminin İmmobilizasyonu,” Batman Univ. J. Life Sci., 7, 124-136, 2017.
  • N. Özdem, E. Hasanoğlu Özkan, N. Sarı, F. Arslan, H. Tümtürk, “Investigation of glucose oxidase enzyme as biocatalysts, new nanospheres attached azomethine,” Macromol. Res., 22 (12), 1282-1287, 2017.
Süleyman Demirel Üniversitesi Fen Edebiyat Fakültesi Fen Dergisi-Cover
  • Yayın Aralığı: Yılda 3 Sayı
  • Başlangıç: 2006
  • Yayıncı: Süleyman Demirel Üniversitesi Fen-Edebiyat Fakültesi
Sayıdaki Diğer Makaleler

Gömme Fonksiyonu Kullanılarak Küme Optimizasyonuna Göre Verilen Küme Değerli Optimizasyon Problemlerinin Optimallik Koşulları

Emrah KARAMAN

SPECT – BT ’nin Kalite Kontrolleri

Duygu TUNÇMAN GENÇ, Bilal KOVAN, Bayram DEMİR, Cüneyt TÜRKMEN

2,4,6-Trinitrofenol ve Trinitrotoluen ile 1-Bromopiren Arasında Oluşan Yeni Enerjik Ko-kristalin Karakterizasyonu ve Enerjik Performans Özellikleri

Nilgün ŞEN, Sinecan İrem BOZKUŞ

(±)-(1SR,8RS,10RS)-9,9,10-Tribromtrisiklo[6.2.1.02,7]undeka-2,4,6-trien Molekülünün Hesaplamalı Kimya Yöntemiyle Lokal ve Global Kimyasal Aktivite ve DNA Bazları ile Yük Transferinin Tayini

Zeynep DEMİRCİOĞLU, Cem Cüneyt ERSANLI

Bootstrap Tahminini Kullanarak Pearson Korelasyon Katsayısının Önemliliğinin Araştırılması

Tolga ZAMAN, Kamil ALAKUŞ

Lineer-Kuadratik Anizotropik Saçılma için Kritiklik Probleminde Yansıtıcı Özdeğerleri

R. Gökhan TÜRECİ

UV Absorbans Spektrofotometrisi ve Türev Spektrofotometrisi Kullanılarak Oftalmik Çözeltilerde Siprofloksasinin Kantitatif Tayini

Saadet DERMİŞ, Sümeyye KILIÇ, Zehra Ceren ERTEKİN, Erdal DİNÇ

Polimerik Nanoküreler Üzerine Enzim İmmobilizasyonu ve Optimizasyonu

Nurdan KURNAZ YETİM, Elvan HASANOĞLU ÖZKAN, Nurşen SARI

Tanacetum kotschyi (Boiss.) Grierson ve Tanacetum tomentellum (Boiss.) Grierson Ekstraktlarının Fenolik Madde İçeriği ve Biyolojik Aktiviteleri

Ahmet SAVCI, Yusuf ALAN, Enver Fehim KOÇPINAR, Murat KURŞAT, Sıraç TOPDEMİR, Mizbah KARATAŞ, Birsen ÇAKMAK

Spin-1 Tek Boyutlu Ising Sisteminin Manyetik Özellikleri

Gökçen DİKİCİ YILDIZ