Keçi (Capra hircus) Testislerinde Isı Şok Proteini 70 (HSP70)’in İmmunohistokimyasal Lokalizasyonu

Bu çalışmada organizma stres durumlarıyla karşılaştığında farklı hücrelerde seviyeleri artan, stres proteinleri ya da Isı Şok Proteinleri (Heat Shock Protein=HSP) olarak adlandırılan protein ailesinden HSP70’in keçi (Capra hircus) testisinde immunohistokimyasal olarak lokalizasyonunun belirlenmesi amaçlandı. Çalışmada materyal olarak 10 adet keçiden alınan testisler materyal olarak kullanıldı. Materyaller Bouin solüsyonunda 16 saat süreyle tespit edildi. Tespit işleminden sonra rutin histolojik doku takibinden geçirilen örnekler parafinde bloklandı. Parafin bloklarlardan 5-6µm kalınlığındaki kesitlere HSP70 varlığının belirlenmesi için Avidin Biotin Peroxidase (ABC) yöntemi uygulandı. Uygulama sonucunda spermatogonyumlarda güçlü reaksiyon gözlendi. Spermatositlerde ise spermatogonyumlara göre daha zayıf bir reaksiyon tespit edildi. Aynı zamanda Leydig hücreleri ve Sertoli hücrelerinde güçlü reaksiyon görüldü. Spermatozoonlarda ise reaksiyona rastlamadı.

Anahtar Kelimeler:

Testis, Keçi; İmmunohistokimya; HSP70

PDF

___

[1] Nihizawa, J., Nakai, A., Natsuda, K., Komeda, M., Ban, T., Negata, K., 1999. Reactive Oxygen Species Play On An İmportant Rolein Activation Of Heat Shock Factor 1 in İschemic Reperfused Heart. Circulation, 99(7), 934-41.
[2] Saibil , H.R., 2008. Chaperone Machines in Action. Curr Opin Struct Biology, 18(1), 35-42.
[3] Verbeke, P., Fonager, J., Clark, B.F.C., Rotton, S., 2001. Heat Shock Response And Ageing: Mechanisms And Applications. Cell Biology International, 25(9), 845-57.
[4] Fan, C.Y., Lee, S., Cry, D.M., 2003. Mechanisms For Regulation Of Hsp 70 Function By Hsp 40. Cell Sress Chaperones. Winter, 8(4), 309-16.
[5] Henle, K.J., Jethma Lani , S.M., Nagle, W .A., 1998. Stress Proteins And Glycoproteins. International Journal Of Molecular Medicine, 1(1), 25-32.
[6] Mosser , D.D., Caron, A.W., Bourget, L., Larose, C.D., Massie, B., 1997. Role Of The Human Heat Shock Protein Aganist Stres İnduced Apoptosis. Moleculer And Cellular Biology , 17(9), 5317-27.
[7] Dian, F., Wang, Q., He, L., Wang, J., Wang, Y., 2012. Characterization Of Heat Shock Protein 70 İn The Red Cray Fish( Cherax Quadricarinatus): Evidence For İts Role İn Regulating Spermatogenesis.Gene, 142, 138-147.
[8] Eduardo, B.O., Castro Sanchez, R., Ramos Gonzalez, B., Tarres Diaz, L., 2010. Rat Spermatogenesis Damage İn Intermittend Hypobaric Hypoxia And The Protective Role Of Melatonin II:Testicular Parameters. Intetrnatiol Journal Of Morphology, 28(2), 537-47.
[9] Zhou , X.C., Zhang,Z.H., Hu, Z.Y., Zou, R.J., Liu,Y.X., 2002. Expression Of Hsp70-2 İn Rhesus Monkey Testis During Germ Cell Apoptosis İnduced By Testosterone Undecanate. Conraception, 66, 377-82.
[10] Dix, D.J., Allen, J.W., Collins, B.W., 1996. Targeted Gene Distruption Of Hsp70 Results Infailed Meosis, Germ Cell Apoptosis And Male Infertilitiy. Developmental Biology, 93, 3264-68.
[11] Wen, C., Huang, P., Zhang, L., Shi, F., 2009. Acute Heat Stres İncreases Hsp 70 Expression İn Testis, Epididymis And Vas Deferens Of Adult Mal Emice. National Journal Of Andrology, 15(3), 200-206.
[12] Tsunekawa, N., Nishida, T., Fujimoto, H., 1999. Expression Of Spermatid- Specific Hsp70 Antigen İs Conseved İn Mammals Including Marsupials. Journal Veterinary Medicine Science, 61(4), 341- 388.
[13] Yangli, P., Ying, J., Yinghe ,Q., 2012. Effect Of Choronic Heat Stress On The Expressions Of Heat Shock Protein 60, 70, 90,A2 And Hsc70 İn Rabbit Testis. Cell Stress And Chaperones, 17, 81-87.
[14] Paminder, K., Bansol, M.P., 2003. Effect Of Oxidative Stres On The Spermatogenic Process and Hsp70 Expression in Mice Testes. Indıan Journal Of Biophysics, 40, 246-51.
[15] Long, L.L., Han, Y.L., Sheng, Z., Du, C., Wong, F.,Zhu, J.Q., 2015. Expression Analysis Of Hsp 70 İn Octopus Tankahkeei Under Termal Stress. Comparative Biochemistry And Physiology, 187, 150-159.
[16] Hasler, M.J., Nolbondow, A.V., 1974. Body And Peritesticular Temperatures Of Musk Shew(Sucus Murinus) Journal Of Reprod Fertil. 36, 397-399.
[17] Özen, O.A., Songur, A., Akpolat, N., Kuş, İ., Baş, O., Sarsılmaz, M., 2006. Erişkin Sıçan Testisinin Seminifer Tübüllerinde Isı Şok 70 Proteinin Gösterilmesi: Bir İmmunohistokimyasal Çalışma. Kocatepe Tıp Dergisi, 7, 23-26.
[18] Pabst, D.A.,Rommel, S.A., Mclellan, W.A., Williams, T.M., Rowles, T.K., 1995. Thermoregulation Of The İntraabdominal Testes Of Bottlenose Dolphin( Tursiops Truncatus) During Exercise. Journal Experimental Biology,198, 221-226.
[19] Carrick, F.N., Setchell, B.P.,1997.The Evolution Of The Scrotum. Reproduction And Evolution, 165-170.
[20] Feng, H.L., 2001.Decreased Expression Of The Heat Shock Protein Hsp70-2 İs Associated With The Pathogenesis Of Male İnfertilitiy. Fertility And Sterility, 76(6), 1136-9.